大黄虫丸对H2O2诱导大鼠肝星状细胞氧化应激的影响

目的研究大黄■虫丸对H_2O_2诱导大鼠肝星状细胞氧化应激的影响,并探讨其分子机制。方法制备大鼠大黄■虫丸血清和正常血清;将肝星状细胞(HSCs)分为正常血清低浓度H_2O_2(50 nmol/L)组、大黄■虫丸血清低浓度H_2O_2组、正常血清高浓度H_2O_2(100μmol/L)组和大黄■虫丸血清高浓度H_2O_2组,应用化学荧光和流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平。蛋白质免疫印迹实验中,将HSCs分为正常血清组、大黄■虫丸血清组、正常血清低浓度H_2O_2(50 nmol/L)组和大黄■虫丸血清低浓度H_2O_2组,以检测ROS生成相关分子RAC1、p67~(phox)、p22~(phox)和p-ERK的表达。结果正常血清高浓度H_2O_2组和大黄■虫丸血清高浓度H_2O_2组细胞内均有较强ROS荧光,但两组之间差异无统计学意义(P0.05);大黄■虫丸血清低浓度H_2O_2组细胞的ROS荧光强度明显弱于正常血清低浓度H_2O_2组(P0.01);与正常血清组比较,正常血清低浓度H_2O_2组RAC1、p67~(phox)、p22~(phox)和p-ERK蛋白表达水平均显著升高(P0.01);与正常血清低浓度H_2O_2组比较,大黄■虫丸血清低浓度H_2O_2组RAC1、p67~(phox)、p22~(phox)和p-ERK蛋白表达下调(P0.01)。结论大黄■虫丸可能通过调控RAC1、p67~(phox)、p22~(phox)和p-ERK等分子,参与拮抗H_2O_2诱导的氧化应激,阻止ROS的生成,并最终抑制HSCs活化、增殖,防治肝纤维化。     

姜黄素和环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞时效的双向调节体外实验研究

【目的】观察抗氧化剂姜黄素（Cur）与选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂NS-398两种药物同时联用或分时联用对大鼠肝星状细胞（HSC）生长的影响。【方法】体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6，接种96孔板，分为5组。I：单独姜黄素系列浓度组（0、20、30、40μmol／L）；单独NS-398系列浓度组（0，20,40，80μmol／L）；Ⅱ：单独NS-398系列浓度组（ABS1）和NS-398系列浓度组＋姜黄素20μmol／L（,4BS2）对大鼠HSC增殖的影响。Ⅲ：两种药物同时加药组；Ⅳ：两种药物先后6h加药组：先加姜黄素20μmol／L作用HSC6h后加NS-398系列浓度组（0、20、40、80wmol／L）；先加NS-398系碉浓度（0、20、40、80Vunol／L）作用HSC6h后加姜黄素20μmol／L组，V：析因分析组。各组设不加药物的细胞对照组，与HSC共同培养，以MTT法检测姜黄素、NS-398单用或同时、分时联用对HSC生长的影响。LDH法检测各组对HSC的细胞毒性舴用。[结果]单独NS-398系列浓度组和单独姜黄素系列浓度组有抑制HSC的作用，但姜黄素的作用比NS-398强；同时加两药组比分时加药组有明显不同，先加NS-398作用HSC6h组比先加姜黄素作用HSC6h组的抑制率明显降低。【结论】时间因素导致两药联用是双向调节，同时加药或先加姜黄素作用HSC6h组后加NS一-98时呈正调节作用，抑制率升高，而先加黼98作用ItSC6h后加姜黄素呈负调节作用，抑制率降低。NS-398对HSC作用一定时间后有抑制姜黄素对HSC起生物效应的作用。     

激活素A对人肝星状细胞系LI 90细胞增殖的影响

目的：检测激活素（ACT）A对肝星状细胞（HSC）系LI90细胞增殖的影响。方法：采用基因重组人ACT A（0．025－250ng/ml）、转化生长因子－β1（TGF－β1）、镦泡抑素（FS）处理体外培养的人HSC系LI90，采用四唑盐比色法（MTT法）检测其对细胞增殖的影响。结果：ACT A浓度在0.025-250ng/ml范围内，均可刺激LI90细胞增殖，0.025-25ng/ml浓度范围内的ACT A作用轻微，而250ng/ml的ACT A作用明显增强（P＜0．01）；相反，TGF－β1（2．5ng/ml）对LI90细胞增殖无明显影响；0．315ng/ml FS与浓度为0.25ng/ml的ACT A共同孵育可阻断ACT A促进LI90增殖的活性（P＜0．05），而0．315ng/ml FS单独作用对LI 90细胞生长明显影响。结论：ACT可促进HSC增殖，在肝纤维化发病机制中发挥重要作用。     

Micro-RNAs在肝纤维化发生中的作用

1993年Lee et al在秀丽新小杆线虫中发现编码形成可抑制LIN-14蛋白合成,大小为22 nt的小分子RNA基因lin-4,当时并未引起注意.直到2000年,Reinhart et al又在此线虫中发现第二种类似的基因let-7,此后不到一年间又相继发现了数百种类似的小分子RNA,被称为micro-RNAs(miRNAs).近年来,miRNAs的研究突飞猛进.miRNAs与肿瘤发生发展的关系及其潜在的诊断价值是目前研究的热点之一,且在非肿瘤疾病中,miRNAs的研究方兴未艾.现将与肝纤维化发生有关的miRNAs研究作一简介.     

星状神经节阻滞对颈面部疾病的治疗与临床观察

星状神经节阻滞(SGB)是疼痛治疗中一种重要的治疗手段。在临床中，尤其在各院麻醉科中的疼痛门诊中最为常用。治疗颈面部疾病中，常有神奇的疗效。现将我院2000年至今的几年中治疗的140例患者SGB的效果总结报告如下。     

星状神经节阻滞并发症浅析

星状神经节属于交感神经节,星状神经节阻滞(SGB)对植物神经系统,内分泌系统及免疫系统均有良好的调节作用.对维持内环境稳定,纠正植物神经系统功能失调可发挥独特功效[1],其阻滞作用大体可分为局部效应及中枢效应两部分.局部效应是其作为交感神经节阻滞的最基本、最直接的作用.而中枢效应则是通过调节下丘脑、垂体发挥作用的,即维护机体的内分泌免疫及植物神经功能[2].     

星状神经节阻滞疗法治疗100例顽固性皮肤瘙痒症

皮肤瘙痒症是一种常见病,大部分患者经各种疗法治疗,均能治愈或症状明显缓解,也有少部分患者经过至少1年的治疗,病情不能缓解,成为顽固性瘙痒。我们采用星状神经节阻滞治疗顽固性瘙痒100例,获得满意疗效。报道如下。     

Effect of nuclear factor-κB p65 ASOND on I typ collagen expression and rat hepatic stellate cells proliferation

Objective Sstudy effect of nuclear factor-κB ASOND on I type collagen expression and rat hepatic stellate cells(HSC)proliferation.Methods Rat HSCs were separated by affusing and digestingof Ⅳ type collagenenzyme and density acentric method.Lipid-mediated NF-κB p65 ASOND(0.001,0.01,0.1,1μmol/L)Was transferred into rat HSCs.Toxicity of HSCs caused by NF-κB p65 ASOND and activity of LDH were determined by trypan blue staining.Proliferation affection of transferring NF-κB p65 ASOND into HSCs was determined by MTT.In different concentration NF-κB p65 ASOND.expression of Ⅰ type collagen stimulated by 1mg/L TNF-αwas determined by RT-PCR and ELISA.Results After transfection of NF-κB p65 ASODN,expression of NF-κB protein in HSCs was decreasing.Toxicity experiment indicated that NF-κB p65 ASOND of different concentration(0.001,0.01,0.1 and 1.0 μmol/L)had no effect on HSCs livability and LDH activity(P<0.05).Four different concentration NF-κ B p65 ASOND could restrain HSCs proliferation stimulated by 1 mg/L TNF-α.The expression of I type collagen and mRNA stimulated by 1mg/LTNF-αwas increased,and had a positive correlation with concentration(P>0.05).Conclusion NF-κB p65 ASOND may depress NF-κB activity to restrain HSCs proliferation and Ⅰ type collagen expression,and reduce extracellular matrix.     

扶正化瘀方对大鼠肝星状细胞旁分泌与自分泌活化途径的干预

为研究扶正化瘀方对肝星状细胞（HSC）旁分泌与自分泌活化途径的干预，用含药（由桃仁、丹参、虫草菌丝等组成的319方）血清分别添加于大鼠损伤肝库普弗细胞（IKC）与传代HSC（MFBC）中培养，制备含药血清作用过的KC条件培养液（IKCM）与MFBC条件培养液（MCM）；并以添加正常血清制备的条件培养液为对照，温育大鼠原代HSC。通过MTT法观察有HSC增殖与ELISA法观察对HSC分泌Ⅰ型胶原的影响。结果显示，IKCM与MCM可明显促进HSC的增殖与Ⅰ型胶原的分泌；扶正化瘀方则明显抑制了这一作用。提示扶正化瘀方对HSC旁分泌与自分泌活化途径有明显的抑制作用。     

肝纤维化防治对策及药物研究进展

肝纤维化(hepatic firosis)是指肝细胞发生坏死及炎症刺激时，肝脏中胶原蛋白等细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的增生与降解失去平衡。进而导致肝脏内纤维结缔组织异常沉积的病理过程，轻者称为纤维化。重者使肝小叶结构改建、假小叶及结节形成。称为肝硬化^[1]。近年来，随着医学分子生物学技术的应用，人们对肝纤维化