基于AMPK/Sirt1通路延龄草总皂苷对脑缺血再灌注继发肺损伤大鼠的保护作用

摘 要 目的：探讨延龄草总皂苷（TST）对脑缺血再灌注大鼠肺组织的影响及其可能机制。 方法: 选取80只雄性大鼠随机分为8组：假手术组、模型组、阳性对照组（尼莫地平,200 mg·kg-1）、TST低（50 mg·kg-1）、中（100 mg·kg-1）、高（200 mg·kg-1）剂量组、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/沉默信息调节因子1（Sirt1）通路抑制剂组(1 mg·kg-1)、TST+AMPK/Sirt1通路抑制剂组(200 mg·kg-1+1 mg·kg-1),每组10只。苏木精 伊红（HE）染色检测大鼠肺组织病理变化;检测各组大鼠氧分压（PaO2）;酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液中炎性因子水平;检测各组大鼠肺组织氧化应激水平。蛋白免疫印迹（Western blot）法检测肺组织AMPK、磷酸化AMPK（p AMPK）、Sirt1蛋白表达水平。 结果: 模型组大鼠肺损伤评分较假手术组高,而阳性对照组与TST不同剂量组均较模型组低（P＜0.05）;模型组大鼠PaO2、氧合指数（OI）、超氧化物歧化酶（SOD）、p AMPK及Sirt1蛋白表达水平均较假手术组低,而阳性对照组与TST组（高剂量）较模型组高,AMPK/Sirt1通路抑制剂组与TST+AMPK/Sirt1通路抑制剂组较TST组低,AMPK/Sirt1通路抑制剂组较TST+AMPK/Sirt1通路抑制剂组低（P＜0.05）;模型组IL-18、IL-1β、TNF-α、IL 6、肺组织湿干质量比、MDA、ROS、Ac NF κB p65蛋白表达水平均较假手术组高,而阳性对照组与TST组（高剂量组）较模型组低,AMPK/Sirt1通路抑制剂组与TST+AMPK/Sirt1通路抑制剂组较TST组高,AMPK/Sirt1通路抑制剂组较TST+AMPK/Sirt1通路抑制剂组高（P＜0.05）;阳性对照组与TST组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。 结论: TST可通过激活AMPK/Sirt1通路并减轻肺组织炎性反应及氧化应激反应进而减缓脑缺血再灌注继发肺损伤。     

延龄草甾体皂苷抗大鼠急性心肌缺血有效成分的研究

目的:探讨延龄草中3个甾体皂苷单体抗急性心肌缺血的生物活性作用.方法:取SD雄性大鼠90只随机分为9组,分别为假手术组、模型组、地奥心血康组(60.0 mg/kg)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷单体高剂量组(Y2TH)29.14 mg/kg、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠...     

延龄草脂溶性成分的GC—MS研究

目的：运用GC-MS法研究延龄草的脂溶性成分,为延龄草的开发利用提供参考,方法：采用有机溶剂法提取脂溶性成分,运用GC-MS进行分离测定,结合质谱库检索技术对化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果：鉴定出31种化合物。结论：首次采用GC-MS联用技术对延龄草脂溶性成分进行全面研究,为延龄草的进一步开发利用提供了一定的理论基础．     

延龄草苷通过上调miR-1247-3p表达减轻高糖诱导的视网膜血管内皮细胞损伤

目的 探讨延龄草苷对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞(HRVEC)损伤的影响及作用机制.方法 5、10、20μmol/L的延龄草苷作用于30 mmol/L葡萄糖诱导的HRVEC细胞,或30 mmol/L葡萄糖诱导转染miR-1247-3p模拟物的HRVEC细胞,或20μmol/L的延龄草苷作用于30 mmol/L葡萄糖诱...     

延龄草生物学特性研究

通过对延龄草生物学性状进行系统的观察,初步总结了延龄草的生物学特性,以期为开展延龄草野生变家植栽培技术研究,指导延龄草种植基地建设服务。     

延龄草无菌培养体系的建立及防褐变措施

目的:对延龄草外植体的筛选及灭菌条件和培养基进行优化,降低污染率和褐变率,建立延龄草根茎无菌组织培养体系。方法:从延龄草子房、叶、茎、地下根茎、根尖5种材料中筛选出最适宜的外植体,考察多种药液交替灭菌和培养基中添加抗生素对降低组培污染率的影响,研究培养基中添加抗坏血酸(V_C),聚乙烯吡咯烷酮(PVP),活性炭对降低褐变率的效果。结果:地下根茎为延龄草组织培养最适宜的外植体,可采用紫外线照射30 min,800倍多菌灵浸泡30 min和0.2%Hg Cl_2处理20 min交替灭菌,培养基中添加100 mg·L~(-1)氨苄青霉素和1.0 g·L~(-1)活性炭可降低根茎组培污染率和褐变率。结论:建立了低污染率和褐变率的延龄草根茎无菌培养体系,为其他根茎类植物组织培养提供参考。     

五指莲重楼的黄酮和甾体类化学成分研究

目的:研究五指莲重楼根茎中的化学成分。方法:采用溶剂法提取,利用正相硅胶色谱、葡聚糖凝胶SephadexLH-20、反相制备色谱等手段进行分离纯化,并通过现代波谱技术进行结构鉴定。结果:从乙酸乙酯层和正丁醇层中分离得到14个化合物,分别鉴定为胡萝卜苷(1),豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),β-蜕皮激素(3),偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(4),薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(5),山柰酚(6),芦丁(7),杨梅素(8),4,2′,4′-trihydroxychalcone(9),异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10),异鼠李素-3-O-芸香糖苷(11),异鼠李素-3-O-龙胆双糖苷(12),5,5′,7-三羟基-4′,4,7″-三甲氧基-[3′-8″]双黄酮(13),5,5′,7,4′,4,7″-六羟基-[3′-8″]双黄酮(14)。结论:化合物1~3,6~14为首次从该种植物中分离得到,其中化合物7~9,13和14为首次从该属植物中分离得到。     

延龄草脂肪酸类成分分析

目的 研究延龄草脂肪酸类成分及主要成分的测定.方法 采用GC-MS对延龄草脂肪酸类成分进行鉴定,主要成分甲酯化后,采用GC法定量测定.结果 延龄草脂肪酸类成分主要有3种;甲酯化后,主要成分亚油酸进样量在0.585 8～4.184μg范围内线性关系良好,r=0.999 9,平均加样回收率为87.6％(RSD为1.75％).结论 方法均简便合理,可以用于延龄草药材脂肪酸类成分的鉴定和测定.     

延龄草总皂苷调控hsa_circ_0025033/miR-149对非小细胞肺癌细胞生物学行为的影响

目的:研究延龄草总皂苷对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞A549增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:将不同浓度的延龄草总皂苷作用于A549细胞,应用实时定量PCR检测hsa_circ_0025033和miR-149的表达,应用双荧光素酶基因系统验证hsa_circ_0025033与miR-149的靶向关系。分析干扰hsa_circ_0025033表达对A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。结果:延龄草总皂苷可抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,下调hsa_circ_0025033表达,上调miR-149表达(P＜0.05)。干扰hsa_circ_0025033可抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡(P＜0.05)。hsa_circ_0025033可靶向结合miR-149,干扰hsa_circ_0025033表达可上调miR-149表达(P＜0.05)。过表达hsa_circ_0025033逆转延龄草总皂苷对A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响(P＜0.05)。结论:延龄草总皂苷能够抑制NSCLC细胞A549增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,可能与调节hsa_circ_0025033/miR-149通路有关。     

延龄草 续断上调抗氧化酶表达作用的比较研究

目的:观察和探讨延龄草、续断对氟哌啶醇致痴呆大鼠抗氧化酶表达作用的影响。方法:雄性W istar大鼠40只,随机分为对照组、模型组、实验1组和实验2组。除对照组外,其余大鼠均用氟哌啶醇建立痴呆症(A lzhe im er D is-ease,AD)动物模型,实验组分别腹腔注射延龄草注射液、续断注射液。测定各组大鼠血、肝、肾、海马、脑皮质超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的含量。结果:与对照组比较,延龄草注射液、续断注射液均能使模型大鼠多种组织SOD、GSH-PX显著升高,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:延龄草和续断都能增强抗氧化酶表达作用,但对多数组织SOD和GSH-PX表达值的影响,延龄草显著强于续断。