柱色谱-紫外分光光度法测定广金钱草中总黄酮的含量

目的建立广金钱草中总黄酮的含量测定方法。方法选用测定波长272nm，以6-C-葡萄糖-8-C-木糖洋芹素(vicenin-2)为对照品，采用柱色谱-紫外分光光度法对不同来源的广金钱草进行了总黄酮的含量测定。结果vicenin-2在10．8～25．2μg／mL具有良好的线性关系，回归方程为Y=0．0309x 0．016(r=0．9999)，平均回收率为100．82％，RSD为1．30％。结论该方法操作简便，结果准确，重复性好，可用于广金钱草的质量控制。     

广金钱草资源调查与药材质量评价

目的:对我国广金钱草资源进行调查,并对不同产地药材质量进行评价,为广金钱草资源的可持续利用、合理开发以及规范化种植提供科学依据.方法:资源调查采用查阅文献、走访调查和现地调查相结合的方法进行,药材质量评价采用高效液相色谱法测定夏佛塔苷含量并进行统计分析.结果:广金钱草野生药用植物资源正逐步减少,部分地区很难找到野生资源.人工栽培广金钱草技术不完善、药材质量参差不齐,影响广金钱草进一步的开发和综合利用.结论:应该加大保护资源的力度,保护广金钱草的生态环境,促进其种群恢复.同时,应该尽快建立GAP基地,完善人工栽培、加工技术,满足市场对广金钱草药材的需求.     

广金钱草总黄酮胶囊Ⅰ期临床耐受性和安全性研究

目的:评价健康受试者单次和多次口服广金钱草总黄酮胶囊的临床安全性和耐受性。方法:本研究共选取64例健康受试者,男女各半,其中54例受试者随机双盲法分配到单次给药试验组,共分7个剂量组(剂量分别为133、399、798、1197、1596、1995、2394 mg),每剂量组人数(试验药+安慰剂)分别为4(4+0)、4(4+0)、6(6+0)、10(8+2)、10(8+2)、10(8+2)和10(8+2)例;10例(8+2)受试者进入连续多次给药试验组,给药剂量为一次665 mg,3次/日,连续10 d。给药前后对全部入组受试者的血常规、尿常规、血生化、ECG、凝血功能进行定时检测,并记录生命体征。结果:64例受试者全部完成研究且无严重不良反应。单次给药试验组46例受试者中有9例(19.6%)和安慰剂组8例受试者中有2例(25.0%)均出现了轻度不良反应;连续给药试验组8例受试者中有6例(75%)和安慰剂组2例中有1例(50%)出现轻度不良反应;上述出现的不良反应,受试者均转归,且研究者判断为与试验药物可能无关。结论:健康人体单日单次口服广金钱草总黄酮胶囊不超过2394 mg或连续服药665 mg/次,3次/日,具有较好的安全性和耐受性。建议Ⅱ期临床试验使用剂量不高于665 mg/次,3次/日。     

四种商品金钱草的辨析及鉴别

目前按金钱草销售使用的中药共有4种，通过调研，对金钱草、广金钱草、连钱草和聚花过路黄4种商品金钱草的名称、来源和功效进行了考证，同时对4种金钱草的药材性状特征进行了较系统的描述和比较。其中金钱草（过路黄）系《中国药典》规定的正品，广金钱草、连钱草2种分别按不同药名收栽于《中国药典》，另一种聚花过路黄则为金钱草的混伪品。     

金钱草和广金钱草不能混用

中药饮片金钱草是治疗胆、胃和膀胱结石的常用药。金钱草和广金钱草药物名称类似,功效也相近,但二者的来源、性状、功效都有很大区别,在《中国药典》中是作为两个品种收录的。应作为两种药品区别对待,不能混用。     

贮藏时间对广金钱草种子质量的影响

以广金钱草种子为材料,研究4℃贮藏条件下不同贮藏时间种子的发芽率、发芽势、千粒重、抗氧化物酶活性及种子浸出液电导率、可溶性糖、可溶性蛋白、淀粉含量的变化,以揭示种子劣变机制。结果表明:①随贮藏时间的延长广金钱草种子发芽率、发芽势、千粒重逐渐降低,种子颜色逐渐加深。②在种子发生劣变的过程中,SOD,POD活性变化趋势类似,均随贮藏时间的延长而降低。SOD活性在贮藏1095~1185 d降低幅度最大,POD活性在贮藏365~395 d显著降低。③种子浸出液的电导率、可溶性糖含量、淀粉含量随贮藏时间增加而增加,可溶性蛋白含量呈降低趋势。④对各项特征指标进行相关分析发现,广金钱草种子发芽率、发芽势、千粒重与SOD,POD活性呈显著或极显著正相关关系,与种子浸出液电导率、可溶性糖含量、淀粉含量呈极显著负相关关系。研究发现,在广金钱草种子贮藏过程中,种子抗氧化酶活性降低、浸出液电导率上升、可溶性糖和淀粉外渗及可溶性蛋白的降解等均是导致种子发生劣变的主要原因。     

广金钱草药材的UPLC特征图谱及其质量评价

目的：通过建立药材广金钱草特征图谱的检测方法,对目前市售广金钱草药材的质量进行可控性评价。方法：色谱柱使用CORTECS T3(2.1mm×150mm,1.6μm,Waters),以乙腈为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱,流速设置为0.2mL/min,柱温设置为30℃,检测波长设置为340nm。运用中药色谱指纹图谱相似度评价软件,以及SIMCA聚类分析软件对市售18批广金钱草药材特征图谱进行研究。结果：通过建立药材广金钱草特征图谱的检测方法,确定共有峰7个,显示18批广金钱草药材质量差别无显著性。结论：此次建立的特征图谱方法为广金钱草药材的质量控制提供了快速评价方法。     

响应面法优化广金钱草中总黄酮的酶法提取工艺

目的 采用响应面法优化广金钱草中总黄酮的酶法提取工艺.方法 在单因素试验的基础上,根据Box-Behnken设计原理,采用四因素三水平响应面分析方法,考察酶解时间、温度、酶用量和pH值对总黄酮得率的影响,建立二次多项式回归方程的预测模型,绘制以总黄酮含量为响应值的等高线图和响应曲面,讨论各因素间的交互作用.结果 确定了酶法提取工艺的最佳参数为:以60％乙醇提取、料液比为1∶50、0.23％纤维素酶、酶解1.49 h、酶解温度为30.55℃、pH5.52;实际测得总黄酮的得率为6.560 mg·g-1,与预测值6.481 mg·g-1相近.结论 酶法提取广金钱草中总黄酮的反应条件温和,可避免破坏有效成分的结构;优选的工艺稳定可行,提高了提取效率.     

健康人体对广金钱草总黄酮胶囊单次给药的耐受试验研究

目的：探讨健康志愿者单次口服不同剂量广金钱草总黄酮胶囊的安全性和耐受性。方法：采用随机双盲安慰剂对照（试验组∶安慰剂组＝4∶1）、单剂量递增设计,将54例符合入选标准的受试者分为试验组46例、安慰剂组8例。试验组受试者分别单剂量口服广金钱草总黄酮胶囊133、399、798、1197、1596、1995、2394 mg,给药后定时进行血常规、尿常规、血生化、心电图、凝血功能监测,并记录生命体征和不良反应发生情况。结果：54例受试者均完成研究,试验组46例受试者中有9例出现了不良反应（占试验组受试者的19.6％）;安慰剂组8例受试者中,2例发生了不良反应（占安慰剂组受试者的25-0％）,不能除外与试验药物的可能关系,其他受试者无不良反应发生。结论：健康人体单次服用133～2394 mg广金钱草总黄酮胶囊较为安全,耐受性良好。     

复方广金钱草合剂改善肾草酸钙结石大鼠肾功能的效果及其机制

目的:探讨复方广金钱草合剂改善肾草酸钙结石大鼠肾功能的效果及其机制。方法:将SPF级雄性SD大鼠40只随机分为观察组和对照组,每组20只。观察组采用L-羟脯氨酸注射法诱导创立肾草酸钙结石大鼠模型,并以复方广金钱草合剂灌胃干预28 d。分别于对照组入组后和观察组建模前、建模后1 d、建模后28 d收集尿液标本,进行尿量、尿蛋白、尿肌酐、尿钙等肾功能相关指标的检测。并在收集尿液标本的同时取2组尾静脉血2 mL,进行血肌酐、血尿素氮等肾功能指标的检测。观察组干预28 d均双肾标本,其中左肾制成10%匀浆进行丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平检测,右肾组织切片并通过免疫组织化学检测骨桥蛋白(OPN)和转化生长因子-β(TGF-β)等炎性相关蛋白表达情况。结果:与对照组比较,观察组建模后1 d尿量降低,尿蛋白、尿肌酐、尿钙、血肌酐、血尿素氮水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与同组建模前比较,观察组建模后1 d尿量降低,尿蛋白、尿肌酐、尿钙、血肌酐、血尿素氮水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与同组建模后1 d比较,观察组建模后28 d尿量升高,尿蛋白、尿肌酐、尿钙、血肌酐、血尿素氮水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,观察组肾组织MDA水平以及OPN、TGF-β阳性表达率升高,SOD、GSH-Px水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:复方广金钱草合剂可改善肾草酸钙结石大鼠肾功能,而改善氧化应激和炎性反应可能为其作用机制。