RhoA和肌球蛋白轻链在肝纤维化大鼠肝组织中的表达

目的观察Rho/Rho激酶信号转导通路关键信号分子RhoA和磷酸化肌球蛋白轻链[p-MLC(Thr18/Ser19)]在大鼠肝纤维化组织中的表达规律。方法HE及Masson三色染色观察肝病理组织学变化;用Western blot检测RhoA、p-MLC(Thr18/Ser19)蛋白的表达;RT-PCR方法检测RhoAmRNA的表达。结果随着肝纤维化的进展,RhoA、p-MLC(Thr18/Ser19)蛋白表达明显增加,RhoAmRNA基因表达也逐渐加强。RhoA和p-MLC(Thr18/Ser19)分别与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)呈显著正相关。结论Rho/Rho激酶信号转导通路在肝纤维化形成过程中发生变化。     

大鼠肝纤维化过程中肝组织磷酸化肌球蛋白轻链表达增加

目的 观察Rho信号通路信号分子磷酸化肌球蛋白轻链(phosphorylated myosin light chain,p-MLC)在实验性大鼠肝纤维化组织中的表达规律.方法 采用胆总管结扎(BDL)方法建立大鼠肝纤维化模型;分别于手术后1、2、3、4周麻醉动物,假手术组4周麻醉动物,留取肝组织;HE及Masson三色染色观察大鼠肝纤维化的病理组织学变化;用免疫组织化学和Western blot检测p-MLC的表达.结果 免疫组织化学显示假手术组p-MLC仅在血管壁呈现弱表达;BDL组随着纤维化发展,血管壁表达增强,并在肝窦周围出现阳性表达细胞.Western blot结果显示随着肝纤维化的进展,p-MLC(Thr18/Ser19)蛋白表达明显增加.p-MLC(Thr18/Ser19)表达分别与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)呈显著正相关.结论 肝维化形成过程中Rho信号通路信号分子p-MLC表达增强.     

ROCK通路在DLC-工基因调控人结肠癌HT29细胞侵袭中的作用

目的 观察肝癌缺失基因1(DLC-1)对HT-29细胞侵袭能力的影响.方法 用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-DLC-1转染HT-29细胞;应用Rho激酶(ROCK)特异性抑制剂Y27632处理HT-29细胞;Western blot检测p-MLC蛋白表达;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力.结果 野生型HT-29细胞DLC-1基因表达呈阴性,经转染获得DLC-1稳定表达细胞系;与对照组及空载组HT-29细胞相比,转染组和ROCK抑制剂组p-MLC蛋白表达均下调,细胞侵袭能力受到抑制(P<0.05).结论 转染DLC-1基因可能通过抑制ROCK活性,从而抑制HT-29细胞的侵袭能力.