人参根总皂甙对效应激小鼠免疫功能的影响

小鼠在45℃高温环境下暴露15min,其网状内皮系统对碳粒的廓清作用明显降低,血清溶血素含量显著下降,绵羊红细胞(SRBC)诱发的迟发型超敏反应明显受到抑制.应激前15min人参根总皂甙(GRS)50、100 mg·kg~(-1),ip,对小鼠的免疫功能有保护作用,可使热应激小鼠网状内皮系统对碳粒的廓清作用免于下降,防止血清溶血素含量的降低,迟发超敏反应不受抑制.     

Contribution of the tdh 1 gene of Kanagawa phenomenon-positive Vibrio parahaemolyticus to production of extracellular thermostable direct hemolysin

Kanagawa phenomenon-positive strains of Vibrio parahaemolyticus contain two copies of the tdh gene (tdh1 and tdh2) encoding thermostable direct hemolysin (TDH). Previous studies suggested that the tdh2 gene, but not the tdh1 gene, was responsible for production of extracellular TDH. In this study, a tdh2-deficient isogenic mutant of Kanagawa phenomenon-positive strain AQ3815 was constructed by a suicide vector-mediated in vivo recombination method. The intact tdh1 gene in the mutant contributed little to Kanagawa phenomenon on Wagatsuma agar but produced TDH in broth media, accounting for 0.5–9.4% of total extracellular TDH of AQ3815.     

白藜芦醇对小鼠免疫系统调节作用的研究

目的研究白藜芦醇对小鼠免疫功能的影响。方法通过碳粒廓清试验,测定白藜芦醇对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响;通过比色法测定鸡红细胞免疫后小鼠血清溶血素抗体水平,研究白藜芦醇对小鼠体液免疫的影响。结果白藜芦醇30 mg/kg和15 mg/kg剂量对环磷酰胺致小鼠细胞免疫抑制有对抗作用,能使免疫功能低下小鼠吞噬指数和吞噬系数得到恢复;白藜芦醇30 mg/kg剂量可对抗环磷酰胺致小鼠体液免疫抑制,提高血清溶血素抗体水平。结论白藜芦醇对小鼠免疫功能有较好的调节作用。     

疏通化纤丸对小鼠免疫功能的调节作用

目的观察疏通化纤丸对小鼠免疫功能的影响。方法以地塞米松引起小鼠免疫功能低下 ,以左旋咪唑作阳性对照 ,测定疏通化纤丸对免疫功能正常和低下小鼠巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素含量以及ConA诱导T淋巴细胞增殖的作用。结果疏通化纤丸能明显提高免疫功能正常和低下小鼠的廓清指数、吞噬指数 ,能促进ConA诱导的正常小鼠脾淋巴细胞的增殖 ,而左旋咪唑仅对免疫低下的小鼠才有提高以上指标的功能。结论疏通化纤丸对机体免疫功能具有显著的提高作用。     

丹皮酚对小鼠免疫功能的影响

目的：研究丹皮酚对小鼠免疫功能的影响。方法：测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能，小鼠血清溶血素的形成，二硝基氯苯(DNCB)所致小鼠迟发型变态反应。结果：丹皮酚能提高巨噬细胞的吞噬功能．使小鼠血清溶血素明显增加，增强DNCB所导致的皮肤迟发性变态反应。结论：丹皮酚对特异性体液免疫功能和特异性细胞免疫功能以及非特异性免疫功能均有增强作用。     

橙皮苷对免疫功能低下小鼠免疫调节作用的实验研究

目的研究橙皮苷(hesperidin,HDN)对小鼠免疫调节的作用。方法腹腔注射环磷酰胺(Cy)复制免疫功能低下的动物模型,测定胸腺、脾脏重量计算脏器指数;碳廓清法测定网状内皮系统吞噬功能;分光光度法测定血清溶血素IgM、IgG(HCIgM、HCIgG);绵羊红细胞(SRBC)的定量溶血测定法(QHS)测定脾溶血空斑形成细胞(PFC);噻唑蓝(MTT)法测定脾淋巴细胞增殖反应;二硝基氟苯(DNFB)诱导迟发型变态反应模型,观察HDN对小鼠迟发型变态反应(DTH)和T淋巴细胞亚群的影响。结果HDN可提高免疫低下小鼠的脏器指数、碳廓清指数K和吞噬指数α;HDN可以改善免疫抑制小鼠低下的脾淋巴细胞增殖反应,恢复小鼠DTH和提高CD4+、CD8+细胞数;对特异性HCIgM、HCIgG和PFC无影响。结论HDN对小鼠的非特异性免疫和特异性细胞免疫反应有促进作用,对特异性体液免疫反应无影响。     

快速检测单核细胞增生李斯特菌LAMP方法的建立

目的:建立一种检测单核细胞增生李斯特菌核酸的快速、特异的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermalamplification,LAMP)方法。方法:针对单核细胞增生李斯特菌的李斯特菌溶血素hlyA基因设计4条LAMP引物,在水浴箱内65℃保温约60 min,完成对单核细胞增生李斯特菌的扩增,扩增产物经肉眼、SYBR Green I染色和电泳鉴定。利用LAMP和PCR方法同时检测1株单核细胞增生李斯特菌和10株非单核细胞增生李斯特菌(对照组)来验证LAMP方法的特异性。用LAMP和PCR方法分别检测一系列稀释后的单核细胞增生李斯特菌菌液,比较两者的敏感性。结果:经肉眼、加染料和电泳均能观察到1株单核细胞增生李斯特菌LAMP扩增阳性反应,10株非单核细胞增生李斯特菌没有出现LAMP扩增。LAMP敏感度比PCR高,LAMP检测单核细胞增生李斯特菌的检测下限为3 cfu/ml,PCR检测下限>300 cfu/ml。LAMP检测速度比PCR更快,只需要60 min。结论:建立了一种检测单核细胞增生李斯特菌的快速、特异的LAMP方法。     

杭州地区2000-2002年副溶血弧菌的分子分型研究

目的了解杭州地区2000-2002年副溶血弧菌临床和环境分离菌株的分子流行病学特征.方法对172株2000年和2002年从临床食物中毒患者和散发腹泻病例以及外环境（小水产品）中分离的副溶血弧菌菌株进行血清分型.对40株临床来源O3：K6型菌株及环境来源O3：KUT（K抗原未分型）型菌株,应用PCR技术进行耐热直接溶血素基因（tdh）和耐热直接溶血素相关基因（trh）的检测,并进行核糖体基因分型（ribotyping）、随机扩增多态性DNA分析（RAPD）、肠道细菌重复基因间共同序列PCR（ERIC-PCR）等.结果在调查的13起副溶血弧菌引起的食物中毒中,tdh阳性、trh阴性的O3：K6血清型引起的有11起（84.6%）;tdh阳性、trh阴性的O4：K8菌引起有2起（15.4%）.在散发腹泻病例中,tdh阳性、trh阴性的O3：K6、O4：K8和O1：KUT菌株分别占26.5%（9/34）、17.6%（6/34）和38.2%（13/34）,未能分型的占17.6%（6/34）.在水产品中分离的菌株中,37株分属7种O血清型,其中未见有O3：K6和O4：K8血清型;另外有9株未能分型;其中除1株O1：KUT菌株trh阳性外,其余tdh和trh均为阴性.绝大部分食物中毒患者和散发腹泻病例分离的O3：K6菌株在ribotyping、ERIC-PCR及RAPD三种指纹上均属于一种密切相关的克隆群,而环境分离的O3：KUT菌株与临床分离的O3：K6菌株间,在三者指纹上均有明显差异.结论临床来源和小水产品来源的副溶血弧菌菌株间血清型分布有显著差别;一群关系密切、tdh阳性、trh阴性的O3：K6血清型菌株在杭州地区呈优势流行.     

西洋参提取物增强免疫力作用的实验研究

[目的]验证西洋参提取物的增强免疫力作用。[方法]以小鼠为实验对象,研究西洋参提取物对刀豆蛋白A(concanavalin.ConA)诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验、小鼠血清溶血素测定、抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验、脏器/体重比值等试验的影响。[结果]与阴性对照组比较,西洋参提取物能提高ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力、提高小鼠血清溶血素抗体积数水平、增加小鼠溶血空斑数、提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率;差异均有显著性(P<0.05)。[结论]西洋参提取物具有增强免疫力作用。     

双曲钩端螺旋体溶血素基因tlyA的克隆、表达及初步功能鉴定

目的研究双曲钩端螺旋体(简称双曲钩体)是否含有溶血素基因,并鉴定其溶血活性。方法对双曲钩体LEBIa2503基因编码产物进行结构域预测、序列比对后,PCR扩增目的片断,克隆到原核表达载体pET28b( ),转化宿主细胞,并诱导表达产物进行初步功能鉴定。同时,以RT-PCR检测LEBIa2503的转录情况。另外,也对双曲钩体菌体本身有无溶血活性进行检测。结果双曲钩体LEBIa2503基因与问号钩体tlyA溶血素基因在蛋白水平上有相同的结构域,属于直系同源基因(orthologues gene)。原核表达的重组融合蛋白在羊血平板上出现β-溶血环。以RT-PCR的方法能检测到在双曲钩体中有LEBIa2503基因的转录,但双曲钩体菌体本身则检测不到溶血活性。结论未发现双曲钩体有溶血活性,但其含有溶血素基因tlyA,并且在普通培养环境下能被转录,这对进一步研究其内在机制奠定了基础,并对探索致病性问号钩体致病机制提供了一定线索。