银杏内酯药理作用的研究进展

银杏内酯为银杏叶提取物及其制剂中的主要药效成分,为公认的血小板激活因子拮抗剂。综述近10年来银杏内酯药理作用的研究进展,特别是对中枢神经系统和心血管系统的作用,指出了目前存在的主要问题及今后研究的方向,以期对银杏内酯的进一步研究有一定的指导作用。     

银杏总内酯注射液对大、小鼠脑缺血的改善作用

目的:研究银杏总内酯注射液对大鼠实验性局部脑缺血的改善作用,并初步探讨其作用机制。方法:用三氯化铁(FeCl₃)造成大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO),观察对缺血大鼠行为状态、脑梗死面积及脑组织形态学的影响;应用肾上腺素-胶原蛋白诱导的小鼠体内血栓形成模型,观察该药整体抗血栓作用;应用二磷酸腺苷(ADP)诱导大鼠血小板聚集试验和葡聚糖-500造成的大鼠高血黏度试验,观察该药对血小板聚集和血液流变性的影响。结果:银杏总内酯注射液3.0 mg.kg^-1及以上剂量可改善MCAO大鼠的行为障碍,减少脑缺血区的梗死范围;6.0 mg.kg^-1及以上剂量可显著抑制小鼠体内血栓的形成,降低大鼠全血黏度;1.5 mg.kg^-1及以上剂量可明显降低ADP诱导的血小板聚集率。结论:银杏总内酯注射液对动物实验性脑缺血具有明显的改善作用,其作用机制可能与改善血凝状态、抑制血小板依赖性血栓的形成有关。     

多中心评价银杏内酯注射液治疗缺血性脑卒中药物经济学

目的 研究多中心常规方法加银杏内酯注射液治疗缺血性脑卒中的临床疗效、经济性、安全性,评价药物经济价值。方法 采用前瞻性队列研究的试验方法,收集各中心2013年8月-2014年12月缺血性脑卒中患者,以银杏内酯注射液加常规治疗的患者为治疗组;对照组患者在常规治疗基础上可使用其他活血化瘀类药物,治疗组354例,对照组180例;在出院后3、6、12个月对两组患者进行电话随访,获取药效指标：日常生活活动能力评价（ADL）评分、生活自理患者比例、痊愈率、复发率、全因死亡率;经济学指标：患者工作恢复率、成本效果比（CER）;以及不良事件发生率、严重程度,评估患者不同治疗方案的远期获益差异。结果 出院后3、6、12个月,治疗组的ADL评分、痊愈率、自理率、工作恢复率均优于对照组,且差异显著（P<0.05）;出院后12个月,治疗组复发率和死亡率优于对照组,且差异显著（P<0.05）;出院后6、12个月,治疗组的CER均小于对照组（P<0.05）;两组不良反应发生率均较低。结论 远期评估发现,经银杏内酯注射液治疗患者较未接受其治疗患者临床效果更佳,CER更优,证明了银杏内酯注射液治疗脑卒中的有效性及经济性。     

高效液相色谱法测定银杏叶缓释胶囊中银杏内酯的含量

目的:建立高效液相色谱法,测定银杏叶缓释胶囊中银杏内酯的含量.方法:色谱柱:C18(Sperisorb 4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相:甲醇-水(30∶70),流速:1.0 mL*min-1,柱温:25℃,示差折光检测器.结果:白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C进样量与色谱峰面积在10～80 mg*L-1范围内呈良好的线性关系, R分别为0.9996,0.9995,0.9999,0.9997,回收率分别为100.0%,99.1%,99.2%,99.9%,精密度测定RSD小于6.6%.结论:该方法灵敏、准确、经济,可用于测定银杏叶缓释胶囊中银杏内酯的含量.     

银杏内酯对血小板活化因子加重离体豚鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的:研究银杏内酯对外源性血小板活化因子(PAF)加重离体豚鼠心肌缺血再灌注损伤的影响.方法:采用离体豚鼠心脏Langendorff灌流装置,观察银杏内酯(4,8,16mg·L -1 )对离体豚鼠心肌再灌注心律失常、心肌组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、三磷酸腺苷酸酶(ATPase)以及冠脉流量(CF)的影响.结果:银杏内酯、普萘洛尔有效减少损伤心肌MDA含量及Ca 2 -ATP酶活力,增加GSH-PX活力,并且对抗PAF加重的离体豚鼠心肌缺血再灌注心律失常的发生.结论:银杏内酯对抗PAF加重离体豚鼠心肌缺血再灌注损伤的作用与拮抗PAF受体、抑制自由基产生、减少心肌细胞钙超载、防止心律失常的发生有关.     

银杏叶提取工艺研究

目的优选银杏叶总黄酮醇苷和总内酯的提取方法。方法以提取后银杏叶总黄酮醇苷和总内酯的含量为评价指标,通过正交试验优选最佳提取工艺,即选择不同提取时间、乙醇量和乙醇浓度作为相关因素,初步优化了提取工艺。结果及结论结果表明,银杏叶最佳提取工艺为:加药材15倍量(9,6)60%乙醇,回流2次,每次1.5h。     

新型银杏叶内酯微球的制备工艺研究

目的 对银杏叶内酯微球的制备工艺进行优化.方法 采用乳化溶剂挥发法制备银杏叶内酯微球,采用以微球的粒径,载药量,体外释放等为评价指标,进行工艺筛选.结果 银杏叶内酯微球粒径为(56.62±0.39)μm,载药量为(80.66%±0.90%),银杏叶内酯微球在pH为7.4的溶液中均匀缓慢释放2周.结论 本研究的制备工艺合理可行,微球的粒径均一,包封率高,在pH 7.4的磷酸盐缓冲盐中可匀速释放2周.     

银杏内酯组分自微乳释药系统的制备及各成分溶出行为相似度分析

目的基于组分生物药剂学性质制备银杏内酯组分(GC)自微乳释药系统(SMDDS)(GC-SMDDS),并对组分中各成分释药行为进行相似度分析。方法采用平衡溶解度方法筛选油相、乳化剂与助乳化剂;以外观、自微乳粒径、Zeta电位、表面活性剂和助表面活性剂的比例、混合表面活性剂与油相比例为考察因素,采用伪三元相图法筛选GC-SMDDS的处方工艺。对自微乳的载药量、粒径分布、Zeta电位、稳定性等进行评价,并借助溶出相似因子、曲线线性回归斜率分析,对组分中成分释药速度与程度进行相似度分析。结果 GC-SMDDS最优处方为聚山梨酯80(T80)与聚乙二醇(PEG)200质量比为4∶1,T80和PEG200的总质量与辛酸癸酸甘油三酯的质量比为9∶1,载药量为100 mg/g,粒径小于40 nm。GC-SMDDS于48 h内在常温、高温及低温状态下稳定性良好,通过相似度分析可知该自微乳系统能自行调节使得各成分之间的释药量相似度达到96.9%,最终基本达到同步释药。结论 GC-SMDDS不仅提高难溶性药物的溶出,还能自主调节各成分的释药行为,使得组分释药保持良好的一致性。     

银杏二萜内酯葡胺注射液中银杏内酯A、B、K与人血浆蛋白结合率的测定

目的：研究银杏二萜内酯葡胺注射液与人血浆蛋白的结合情况。方法：采用平衡透析法测定银杏二萜内酯葡胺注射液中银杏内酯A（GA）、银杏内酯B（GB）和银杏内酯K（GK）与人血浆蛋白的结合 率,以LC-MS/MS法测定透析内外液中各待测物的浓度,计算其血浆蛋白结合率。结果：血浆中其他成分对测定无干扰,各待测物在选择浓度范围内线性关系均良好,精密度及稳定性结果均符合方法学要求;样品孵育8 h后,GA、GB和GK与人血浆蛋白结合基本达到平衡,此时GA（0.34、1.70 和8.51 μg·mL^-1）与人血浆蛋白结合率为84.03%-88.11%,GB（0.62、3.09 和15.5 μg·mL^-1）与人血浆蛋白结合率为41.21%-53.56%,GK（0.04、0.20 和1.01 μg·mL^-1）与人血浆蛋白结合率为45.24%-59.59%。结论：该方法操作简便、快速,灵敏度高,能满足生物样品的分析要求。GA与血浆蛋白结合较强,GB和GK具有中等强度的蛋白结合率。     

银杏内酯抗过氧化氢致神经细胞损伤和对即早基因表达的影响

目的 :探讨银杏内酯 (ginkgolides ,Gin)对过氧化氢 (H2 O2 )诱导的皮层神经细胞损伤的保护作用及其机制。方法 :在小鼠皮层神经细胞的培养基中加入H2 O2 ,建立神经细胞氧化损伤模型 ,利用MTT比色法检测细胞存活率 ,Westernblot技术分析c fos、c jun基因表达产物C FOS蛋白、C JUN蛋白的变化。结果 :H2 O2 可诱导原代培养的神经细胞损伤和存活率降低 ,其损伤作用呈现浓度和时间依赖性 ;同时可诱导神经元C FOS、C JUN表达增加。Gin预处理2 4h可明显减轻神经细胞形态学改变 ,提高神经细胞存活率 ,且在 0～ 37.5mg·L-1范围内呈现浓度依赖关系。Gin能明显逆转H2 O2 诱导的C JUN蛋白表达的增高 ,对H2 O2 刺激的C FOS蛋白表达无明显影响。结论 :Gin可对抗H2 O2 引起的神经细胞损伤 ,该保护作用与其抑制细胞c jun基因过度表达有关。