高效毛细管电泳法检测生药龙胆中龙胆苦苷含量

目的:建立高效毛细管电泳法测定生药龙胆中有效成分龙胆苦苷含量的方法。方法:毛细管区带电泳(CZE):运行电解质为含10%甲醇的20mmol.L~(-1)硼砂缓冲液(pH 10.6);工作电压18kV;柱温25℃;检测波长280mm。结果:测得龙胆苦苷的回归方程为Y=0.0787 1.9981X(r=0.9998);平均回收率为101%;RSD=2.64%(n=5)。结论:本方法简便,准确,快速,重复性好。可用于龙胆中龙胆苦苷的测定。     

不同采收期龙胆中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷和獐牙菜苷的变化研究

目的研究不同采收期龙胆中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷的变化规律。方法采用Welchrom C_(18)色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–水(25∶75);检测波长:270(龙胆苦苷)、240 nm(獐芽菜苦苷和獐牙菜苷);体积流量:1.0 m L/min;柱温:25℃;进样量为10μL。分别采收9、10月上、中、下旬的龙胆,考察其中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷的变化。结果在9—10月,龙胆中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷和獐牙菜苷的量基本呈现同步上升、同步下降趋势。在9月中旬最高,9月下旬最低。与9月下旬比较,10月上旬的量有所回升,而10月下旬的量再次呈下降趋势。结论龙胆药材最佳采收季节为9月中旬,此时龙胆苦苷、獐芽菜苦苷和獐牙菜苷的量最高。     

UPLC-Q-Orbitrap HRMS法同时测定秦艽炮制前后8种成分

目的建立一种UPLC-Q-Orbitrap HRMS定量分析方法,同时测定秦艽炮制前后8种化学成分(龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、木犀草素、异牡荆素、芹菜素、山柰酚)含量的变化。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,柱温35℃。质谱采用负离子检测模式进行检测。结果秦艽经清炒、酒炙后环烯醚萜类含量均明显升高,且清炒后龙胆苦苷和马钱苷酸含量具有统计学差异。黄酮类在清炒和酒炙后含量变化不大。2类成分总的含量变化为环烯醚萜类成分含量清炒酒炙生品;黄酮类成分含量生品酒炙清炒。结论建立的UPLC-Q-Orbitrap HRMS同时测定秦艽炮制前后8种成分的方法准确、稳定,为进一步研究秦艽炮制前后主要成分的变化奠定了基础。     

HPLC双波长法同时测定炎热清片中6种有效成分的含量

目的 建立HPLC双波长法同时测定炎热清片中龙胆苦苷、栀子苷、芒果苷、黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素6种成分的含量。方法 采用Agilent TC-C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为甲醇∶0.2%磷酸水溶液（梯度洗脱）,柱温为35℃,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长0~20 min为254 nm,同时检测龙胆苦苷、栀子苷、芒果苷,20~50 min为280 nm,同时检测黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素。结果 龙胆苦苷、栀子苷、芒果苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素分别在18.92~189.2 ng（r=0.999 9）,107.44~1 074.4 ng（r=0.999 9）,9.82~98.2 ng（r=0.999 9）,767.68~7 676.8 ng（r=1.000 0）,100.94~1 009.4 ng（r=0.999 9）,49.84~498.4 ng（r=0.999 9）线性良好,平均回收率（n=9）分别为98.31%,98.35%,98.40%,98.03%,98.46%,98.24%,RSD分别为0.4%,0.3%,0.3%,0.4%,0.4%,0.3%。结论 该方法灵敏、简便、准确,可用于炎热清片的质量控制。     

不同提取方法对秦艽2种苦苷成分含量的影响

目的探讨不同提取方法对秦艽中獐牙菜苦苷和龙胆苦苷含量测定的影响。方法采用HPLC法,比较甲醇超声提取法、甲醇索氏提取法、药典法(2005版药典秦艽项下方法)三种提取方法对2种苦苷成分含量测定结果的影响。结果甲醇超声提取法优于其它二种方法。结论甲醇超声提取法操作简便易行,重现性好,准确度高,为科学控制秦艽质量提供一个可靠的方法。     

基于指纹图谱结合化学计量学的独活寄生丸的质量评价研究

目的 建立独活寄生丸的指纹图谱,并采用化学计量学进行评价。方法 采用HPLC法建立独活寄生丸的指纹图谱和相似度评价,以聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析法分析数据。结果 建立了独活寄生丸HPLC特征指纹图谱,共确定32个共有峰,指认6个成分龙胆苦苷、川芎嗪、芝麻脂素、蛇床子素、细辛脂素、二氢欧山芹醇当归酸酯。15批独活寄生丸与对照图谱的相似度均大于0.900。15批独活寄生丸样品可分为2类,S1、S4、S6聚为一类,其余样品为另一类。9个主成分因子可作为独活寄生丸的评价指标。对模型分类贡献较大的3个变量,分别为共有峰4、17、2。结论该方法可用于独活寄生丸的质量评价,为独活寄生丸的质量标准研究提供依据。     

龙胆苦甙后处理对心脏缺血再灌注损伤的防治作用

目的 观察龙胆苦甙（GPS）后处理对离体心肌缺血/再灌注损伤（I/R）的防治作用及其可能的机制.方法 将30只C57BL6小鼠分为三组,即假手术组（只开胸不结扎冠状动脉左前降支）,I/R组以及I/R＋GPS后处理组（I/R＋GPS组）.采用小鼠在体模型,小鼠麻醉后,开胸短暂结扎冠状动脉左前降支模拟缺血,缺血30 min后松开线结进行再灌注,再灌注前10 min腹腔注射给药.分别于再灌注2h（Western blot法检测Caspase-3、Bax、Bcl-2）以及24 h（心脏超声测定EF值、TTC伊文氏蓝双染色检测心肌梗死面积以及经颈动脉取血行LDH活性检测）后处死动物.结果 与假手术组比较,I/R组EF值降低,心肌梗死面积增加,血清中LDH含量增高,Caspase-3、Bax表达增高,Bcl-2表达降低（P均＜0.01）.与I/R组相比,I/R＋GPS组的EF值升高,心肌梗死面积减少,血清中LDH含量降低,Caspase-3、Bax表达降低,Bcl-2表达增高（P均＜0.01）.结论 GPS后处理可以明显降低缺血再灌注对心脏的损伤,增加心脏收缩能力,增强抗凋亡分子Bcl-2的表达,抑制Bax以及Caspase-3所介导的心肌细胞凋亡.     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中的龙胆苦苷浓度

目的:建立测定人血浆中龙胆苦苷浓度的液相色谱-串联质谱法。方法:血浆加入内标咖啡因后经固相萃取处理,采用 RESCEK C_8柱(150 mm×2.1 mm,5μm)分离,流动相为甲醇-10 mmol·L~(-1)醋酸铵溶液-乙腈(50:40:10),流速为0.2mL·min~(-1)。样品在三级四极杆串联质谱中经 ESI 源离子化后以多反应离子监测方式测定。结果:龙胆苦苷在3～5000 ng·mL~(-1)线性良好(r=0.9985),检测限为3 ng·mL~(-1),回收率为94.4%～104.2%,绝对回收率为92.4%～98.0%,日内、日间变异(RSD)均≤15%,色谱峰保留时间为2.25 min。结论:方法灵敏、准确、快速、特异性强,适用于中药龙胆苦苷的血药浓度测定和临床药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定丽江獐牙菜中4种有效成分的含量

目的：建立测定丽江獐牙菜中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷、齐墩果酸的高效液相色谱测定方法.方法：测定獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷的色谱条件是ZORBAX SB C18色谱柱（4.6 mm× 150 mm,5μm）,流动相为甲醇-水（含0.1%磷酸）的比例在0～30min内线性梯度洗脱（甲醇%：0 min 20%,30 min 30%）,检测波长为240 nm,流速为0.60 mL·min^-1,柱温为30℃;测定齐墩果酸的色谱柱同上,流动相为乙腈-水（含0.1%磷酸）75∶25,检测波长为210 nm,流速为1.0 mL·min^-1,柱温40℃.结果：獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷和齐墩果酸分别在0.155～19μg,0.018 6～1.24μg,0.006 80～1.36μg,0.15～3.9μg范围内线性关系良好,r分别为0.999 9,0.999 9,0.999 8,0.999 6,平均回收率均在99%～103%,RSD均小于2%.结论：本方法操作简便、快速、分离效果好、稳定性高、重复性好,为全面控制丽江獐牙菜质量提供了一个可靠的方法.