黄皮酰胺促钾通道开放

一种新发现的具有促智作用的药物——黄皮酰胺能抑制去甲肾上腺素(NE)或KCl引起的血管平滑肌收缩。本研究旨在应用膜片钳(patch clamp)技术探讨黄皮酰胺对Wistar大鼠尾动脉平滑肌细胞膜钾离子通道的作用。单个平滑肌细胞用酶法分离,以细胞封接方式记录离子通道活动。在细胞池内注入2μM黄皮酰胺后,钾离子通道活动明显增强。用本实验室开发的计算机软件(patch clamp analysis system,Version 1.0)计算分析通道活动的特征参数。     

HPLC—MS法测定血浆中左旋黄皮酰胺的浓度

目的:建立测定血浆中左旋黄皮酰胺浓度的 LC-MS 方法。方法:血浆样品经醋酸乙酯提取处理后,以2%冰醋酸-甲醇(45∶55)为流动相,在1.0 mL·min~(-1)的流速下,用 Shimadzu ODS 色谱柱(150mm×4.6mm,5μm)分离,样品经电喷雾离子化后,通过 HP 1100 HPLC-MS 质谱仪液相色谱串联质谱法,以格列吡嗪为内标测定左旋黄皮酰胺的浓度。结果:血浆中左旋黄皮酰胺的线性范围为0.01-10μg·mL~(-1),最低定量浓度为10ng·mL~(-1),准确度在80%-90%之间,日内、日间精密度(RSD)在±10%之内。结论:该方法高效、准确,可用于左旋黄皮酰胺在体内的药代动力学研究及血浆中左旋黄皮酰胺的含量测定以控制质量。     

黄皮酰胺类似物的合成(Ⅱ)3-羟基-4-(4-硝基苯基)-5-α-羟苄基-N-甲基-γ-内酰胺的合成

以对硝基苯甲醛为原料，经Ｄａｒｚｅｎｓ缩合、酰胺化、氧化、环合和还原五步反应合成黄皮酰胺的类似物３－羟基－４－（４－硝基苯基）－５－α－羟苄基－Ｎ－甲基－γ－内酰胺，总收率２．７％，产物结构经元素分析、红外光谱、质谱及核磁共振氢谱确证。     

黄皮酰胺对糖尿病大鼠海马HO-1和HO-2表达的影响

目的探讨黄皮酰胺(Clausenamide,Clau)对糖尿病大鼠海马血红素加氧酶1和2(HO-1和HO-2)表达的影响。方法♂Wistar大鼠腹腔注射链脲佐菌素(48mg·kg-1)建立糖尿病模型,给予不同药物治疗3mon后,分别以RT-PCR法和免疫组织化学法观察大鼠海马HO-1和HO-2 mR-NA和蛋白质的表达。结果①RT-PCR结果显示,糖尿病大鼠海马的HO-1和HO-2 mRNA表达水平明显增加(P<0.01);而Clau(50,25mg·kg-1)治疗组大鼠海马的HO-1和HO-2 mRNA的表达水平明显降低(P<0.01),表明Clau可明显抑制糖尿病大鼠海马HO-1和HO-2 mRNA的表达水平;②免疫组化结果表明,糖尿病大鼠海马HO-1和HO-2的蛋白质表达明显升高(P<0.01),表明HO-1和HO-2蛋白质的异常表达参与了糖尿病障碍的过程,而Clau通过抑制HO-1和HO-2的蛋白质表达对糖尿病大鼠起到保护作用的。结论黄皮酰胺可能通过抑制海马的HO-1和HO-2 mRNA及蛋白质表达起到糖尿病大鼠的海马保护作用的。     

黄皮酰胺类似物的合成Ⅰ．3－羟基－4－（4－甲氧基苯基）－5－α－羟苄基－N－甲基－γ－内酰胺的合成

报道了黄皮酰胺类似物的合成，产物结构经元素分析、红外光谱、质谱及核磁共振氢谱确证。     

右旋黄皮酰胺在大鼠肝微粒体中的代谢转化

目的：研究黄皮酰胺的主要代谢途径,为进一步研究黄皮酰胺代谢的立体选择性打下基础。方法：用大鼠肝微粒体体外温孵法对右旋黄皮酰胺((+)-clausenamide)进行温孵,用硅胶柱色谱、制备TLC分离纯化代谢产物并通过光谱分析鉴定其结构。结果：分离得到5个代谢产物CM1,CM3,CM4,CM5及CM6,其结构分别鉴定为6-羟基,4-羟基,4,6-二羟基,4-苯环邻位羟基,4,7-苯环间位-二羟基黄皮酰胺。结论：黄皮酰胺的代谢主要发生羟化或双羟化,CM3是其主要代谢产物,量较少的CM4,CM6为其进一步代谢产生的双羟基代谢产物;另2个代谢产物CM1,CM5产生的量也较少;CM2未分离得到,但通过HPLC分析知其为右旋黄皮酰胺的微量代谢产物。     

手性黄皮酰胺生物转化的立体选择性

以相同的肝微粒体温孵体系对(+) 和(-) 黄皮酰胺(Cla)进行了温孵,以HPLC分析比较了代谢结果,发现(+)-和(-)-Cla所产生的主要代谢产物基本相同,但主要代谢产物在(+)-和(-)-Cla温孵体系中含量差别较大,左旋体代谢产生的CM1和CM5的量比右旋体大;CM2是左旋Cla的主要代谢产物之一,右旋体产生极小的量;而CM3是右旋Cla的主要代谢产物,左旋体产生的量较少. CM4, CM6是由CM3进一步代谢所产生的双羟基代谢产物,右旋体产生的量多于左旋体. 定量分析(+)-,(-)-Cla在肝微粒体中不同时间的代谢情况,发现(+)-,(-)-Cla在实验浓度下均为非线性动力学,二者代谢速率基本相同,不同时间代谢的立体选择性基本相同.     

胎鼠神经干细胞培养方法的建立及药物对干细胞增殖的影响

目的建立神经干细胞培养模型，观察药物对其增殖能力的影响。方法建立大鼠胎脑神经干细胞的培养方法，并用MTT法和3H-胸腺嘧啶核苷参入法观察黄皮酰胺、丹酚酸A及人参皂苷Rg1等对第2代神经球细胞状态的影响。结果免疫细胞化学结果显示，培养的神经细胞具备干细胞的基本特性；MTT和液闪结果则表明，上述3种药物可不同程度地影响神经干细胞的存活率和/或增殖活性。结论本实验所建立的胚胎大鼠神经干细胞培养模型可以观察到一些有脑保护作用的药物对干细胞存活和增殖有一定影响。     

Hepatoprotective action of nine constituents isolated from the leaves of Clausena lansium in mice

The hepatoprotective actions of nine compounds isolated from the leaves of Clausena lansium (Loor.) Skeels, Rutaceae were studied. The nine compounds at the dose of 250 mg/kg, except demethylsecoclausenamide, significantly depressed the elevated serum transaminase in mice intoxicated with CCl₄. Further study on the more abundant components, seco-clausenamide and clausenamide, demonstrated that both compounds decreased the hepatotoxicity of thioacetamide and acetaminophen in mice. Clausenamide was shown to significantly inhibit CCl₄-induced lipid peroxidation of liver microsomes and ¹⁴C-CCl₄ covalent binding to microsomal lipids. The results indicate that eight compounds isolated from Clausena lansium have hepatoprotective activity in mice. Drug Dev. Res. 39:174–178. © 1997 Wiley-Liss, Inc.     

手性黄皮酰胺的研究进展

黄皮酰胺是从中药黄皮叶中提取到的天然成分,现已完成其16个光学活性异构体的合成和拆分。通过对其中一对对映体(-)黄皮酰胺和( )黄皮酰胺的深入研究发现,其代谢转化、药理作用等均具有立体选择性,即其中(-)黄皮酰胺是有效对映体,具有显著的保肝、促智、抗神经细胞凋亡等作用,而( )黄皮酰胺为劣映体。现对手性黄皮酰胺的代谢转化、药动学和对神经系统的作用及机制研究进展进行综述。