落新妇甙对小鼠心脏移植排斥反应的抑制作用

目的探讨落新妇甙对小鼠心脏移植排斥反应的抑制作用。方法采用小鼠颈部心脏移植模型。随机将心脏移植后的48只小鼠分为四组：A组心脏移植后每天用生理盐水1ml灌胃，B组心脏移植后每天用环孢素A5mg／kg灌胃，C组心脏移植后每天用落新妇甙1ml／kg灌胃，D组心脏移植后每天用环孢素A2．5mg／kg及落新妇甙1ml／kg灌胃。观察移植心脏的存活时间及心脏跳动情况。结果B组、C组及D组移植心脏存活时间均较A组显著延长（P＜0．01）；D组移植心脏存活时间最长，优于C组（P＜0．05）和B组（P＜0．01）。结论落新妇甙对心脏移植排斥反应有较强的抑制作用，并与环孢素A有协同作用。     

落新妇苷通过促进IL-10表达保护小鼠缺血再灌注损伤肝脏

目的:观察落新妇苷对肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用,对其机制进行初步探讨。方法:C57BL/6小鼠随机分为4组：假手术组(Sham)、模型组(I/R)、落新妇苷小剂量(10 mg/kg)干预组和落新妇苷大剂量(40 mg/kg)干预组。缺血前24 h和1 h干预组小鼠腹腔注射分别给予10或40 mg/kg的落新妇苷,建立肝左、中叶70％部分肝缺血再灌注模型,模型组和假手术组给予同样体积的生理盐水。小鼠肝脏左叶缺血90 min、再灌注6 h后各实验组采集血液和肝脏组织样本。检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)的活性作为肝功能损伤的指标,同时用ELISA检测肝组织中MPO含量。观察肝脏组织病理学改变。Western印迹检测肝组织中IL-10蛋白含量,半定量RT-PCR检测IL-10 mRNA表达情况。结果:落新妇苷干预能有效降低部分肝脏热缺血再灌注小鼠血清ALT水平,能有效降低缺血肝脏中MPO含量,改善肝组织病理表现。干预组肝组织中IL-10蛋白表达与I/R模型对照组比较均渐次升高,与半定量RT-PCR结果相符(小剂量干预组P<0.05；大剂量干预组P<0.01)。结论:落新妇苷干预能减轻小鼠肝脏热缺血再灌注损伤后的炎症反应,有效改善肝功能和肝脏病理损害；机制可能在于其能促进缺血再灌注损伤肝组织中IL-10的高表达。     

The inhibitory effect of astilbin on the arteriosclerosis of murine thoracic aorta transplant

The inhibitory effect of astilbin on transplant arteriosclerosis in murine model of thoracic aorta transplantation was examined. Model of rat thoracic aorta transplantation was established. Ninety rats were divided into three groups. In isograft group, the thoracic aorta of Brown Norway （BN） rat was anastomosed with the abdominal aorta of another BN rat. In allograft group, the thoracic aorta of BN rat was anastomosed with the abdominal aorta of Lewis rat. In astilbin group, the rats receiving allo-transplantation were given astilbin 5 mg/kg per day for a time of 28 days. The donor thoracic aorta and the recipient abdominal aorta were anastomosed by means of a polyethylene can- nula （inner diameter： 1.5 mm, length： 3 mm length）. The grafts were histologically examined for structural changes. The areas of arterial lumen and endatrium were calculated. Our results showed that, in the allograft group, 28 days after allografting, conspicuous proliferation of smooth muscles and infiltration with a great number of inflammatory cells were found in the tunica intima and tunica media. Astilbin significantly inhibited the proliferation of smooth muscles and ameliorated the infiltration of inflammatory cells thereyby prevent against the development of transplant arteriosclerosis. It is concluded that asltilbin can effectively prevent the development of arteriosclerosis in allotransplant by inhibiting the proliferation of smooth muscles and inhibit the proliferation of smooth muscles in tunica of intima and media and reducing infiltration of the inflammatory cells.     

染料木素等5种黄酮类物质对小鼠血清尿酸水平及黄嘌呤氧化酶活性的影响

目的探讨黄酮类化合物染料木素、芹菜素、槲皮素、芦丁和落新妇苷体外对黄嘌呤氧化酶活性的影响,对正常小鼠血清和肝脏黄嘌呤氧化酶活性的影响,同时评价对小鼠血清尿酸水平的作用。方法采用改良的紫外分光光度法测定染料木素、芹菜素、槲皮素、芦丁和落新妇苷体外对黄嘌呤氧化酶的抑制作用,采用分光光度法研究对小鼠血清和肝脏黄嘌呤氧化酶活性的影响,以磷钨酸法测定对小鼠血清尿酸水平的作用。结果体外实验表明黄酮类化合物染料木素、芹菜素、槲皮素、芦丁和落新妇苷体外对黄嘌呤氧化酶活性无明显影响。体内实验观察到这5种黄酮类化合物能够显著升高或降低黄嘌呤氧化酶的活性;而且,血清尿酸水平与血清黄嘌呤氧化酶活性密切相关,与肝脏黄嘌呤氧化酶活性无明显关联。用这些黄酮类化合物给药的小鼠血清尿酸水平都高于正常对照组。结论这5种黄酮类化合物不能够作为替代别嘌醇的药物用来降低血清尿酸水平。     

芍苓消银缓释片Beagle犬体内药物动力学评价

目的：比较Beagle犬口服芍苓消银片或其缓释片后血清芍药苷、落新妇苷的药动学差异,评价缓释制剂效果。方法：采用单剂量、两周期交叉试验,给定时间采血,HPLC法测定血清中芍药苷、落新妇苷药物浓度,DAS 2.0软件处理数据。结果：口服普通片或缓释片,芍药苷AUC_（0-t）分别为（1 029.35±26.97）μg·h·L^-1和（2 305.85±28.85）μg·h·L^-1;MRT_（0-t）分别为（2.43±0.02）h和（5.99±0.04）h;t_1/2分别为（0.98±0.01）h和（6.85±1.38）h;落新妇苷：AUC_（0-t）分别为（2 938.92±19.03）μg·h·L^-1和（4 195.67±30.65）μg·h·L^-1;MRT_（0-t）分别为（2.31±0.05）h和（6.04±0.24）h;t_1/2分别为（0.73±0.14）h和（9.08±3.06）h。结论：芍苓消银缓释片可显著提高芍药苷、落新妇苷的生物利用度,有效降低血药波动,提高患者顺应性。     

土茯苓活性分子落新妇苷抗顺铂诱导的人肾小管上皮细胞凋亡作用研究

目的观察土茯苓活性分子落新妇苷抗顺铂诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡的作用。方法采用MTT法分别观察不同浓度落新妇苷(30、50、100、200、300μM)联合顺铂(50μM)对HK-2细胞活力的影响;将HK-2细胞分为对照组、顺铂组、落新妇苷(100、200μM)组,药物干预24h后,Annexin V/PI流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和cleaved-caspase-3表达情况;RT-PCR法和Western blot法检测药物转运蛋白OCT2 m RNA和蛋白质表达情况。结果 MTT结果显示,落新妇苷能够增强顺铂诱导HK-2细胞活力(P0.05),且呈一定剂量依赖关系。流式细胞凋亡结果显示,与对照组比较,顺铂组细胞凋亡率显著升高[(61.5±5.67)%比(1.2±1.13)%,P0.01];落新妇苷能够显著抑制顺铂诱导HK-2细胞凋亡,尤其200μM剂量组显著[(33.5±6.93)%比(61.5±5.67)%,P0.01]。Western blot结果显示,与对照组比较,顺铂组细胞Bax、cleaved-caspase-3表达显著增加[(0.33±0.07)比(0.02±0.01)、(0.54±0.06)比(0.08±0.03),P0.01],Bcl-2表达显著减少[(0.11±0.02)比(0.63±0.07),P0.01];与顺铂组比较,落新妇苷能够显著下调Bax、cleaved-caspase-3,上调Bcl-2蛋白表达[Bax:(0.19±0.04)、(0.18±0.02)比(0.33±0.07),P0.05;cleaved-caspase-3:(0.28±0.06)、(0.20±0.05)比(0.54±0.06),P0.01;Bcl-2:(0.26±0.04)、(0.28±0.04)比(0.11±0.02),P0.05]。RT-PCR和Western blot结果显示,与顺铂组比较,落新妇苷能够显著抑制HK-2细胞药物转运蛋白OCT2 m RNA表达[(0.53±0.14)、(0.47±0.03)比(0.89±0.09),P0.01]和蛋白质表达[(0.36±0.08)、(0.25±0.03)比(0.52±0.05),P0.05,P0.01]。结论落新妇苷具有抑制顺铂诱导的HK-2细胞凋亡的作用,其机制可能与抑制OCT2蛋白表达有关。     

MECC法测定兔血浆落新妇苷浓度及其药代动力学研究

目的建立落新妇苷血药浓度测定方法,研究其在家兔体内的药代动力学。方法家兔耳缘静脉注射10 mg.kg-1落新妇苷,胶束电动毛细管电泳法测定血药浓度,3p97药动学软件分析药动学参数。结果落新妇苷血药浓度在2.05～24.6 mg.L-1范围内呈良好线性,r=0.9993,平均回收率为101.15%,日内、日间RSD均〈6%。落新妇苷在家兔体内的药代动力学过程符合二室开放模型。结论本法简便、快速、准确、干扰小,适用于落新妇苷血药浓度测定,为研究其在人体药代动力学及制定给药方案提供方法学基础。     

落新妇苷固体分散体在大鼠体内的药动学研究

目的 研究大鼠口服落新妇苷固体分散体后的药物动力学参数。方法 采用HPLC法测定大鼠口服落新妇苷固体分散体后血浆中的落新妇苷血药浓度。用kinetica软件计算动力学参数。结果 落新妇苷在大鼠体内的药物动力学过程符合二室模型。AUC0-480min为1.98±0.60 mmol?min?L-1。结论 将落新妇苷制成固体分散体可以显著提高其生物利用度。     

28个不同采集地土茯苓(断面红色、白色)中落新妇苷分析及抗炎作用的比较

目的:采用HPLC分析测定28个不同采集地土茯苓(断面红色、白色)中落新妇苷的含量,并通过对土茯苓(断面红色、白色)渗透型炎症的研究,拟对该品种进行药效与成分的评价.方法:RP-HPLC测定落新妇苷含量,采用依利特Hypersil ODS2色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％冰醋酸溶液(21∶ 79),流速1.0 mL·min-1,检测波长291 nm,柱温25℃,理论塔板数以落新妇苷计不得低于5 000.用毛细血管通透性试验比较不同断面颜色药的抗炎作用.结果:在选定的色谱条件下,落新妇苷在0.003 379 ～4.004 μg呈良好线性关系.加样回收实验加样80％,100％,120％,平均回收率分别为100.1％,101.9％,99.3％.断面白色土茯苓中落新妇苷质量分数为0.19％ ～2.46％,断面红色土茯苓中落新妇苷质量分数为2.10％ ～ 5.92％.药效学实验结果表明,断面白色土茯苓抗炎抑制率为32％,断面红色土茯苓抗炎抑制率仅为21％.结论:红、白2种断面土茯苓中落新妇苷的含量及抗炎作用均存在较大差异,土茯苓中落新妇苷的含量高低与其抗炎作用的强弱不呈正相关.     

HPLC法测定银灵康胶囊中绿原酸和落新妇苷的含量

目的建立同时测定银灵康胶囊中绿原酸和落新妇苷含量的方法。方法采用HPLC法。色谱柱为Kromasil C18柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为乙腈(A)-体积分数0.05%磷酸水溶液(B),梯度洗脱,柱温为30℃,检测波长为291 nm。结果绿原酸质量浓度在9.6～96 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为98.4%(RSD=1.6%,n=9);落新妇苷质量浓度在0.550～5.50 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 5),平均回收率为100.8%(RSD=1.8%,n=9)。结论建立的方法简便﹑准确﹑重现性好,可用于银灵康胶囊的质量控制。