PBX1基因对系统性红斑狼疮易感基因IFI16表达的影响

探讨PBX1基因转染人单核细胞系THP1后,对IFI16基因表达的影响。以携带人PBX1基因表达序列的复制缺陷型5型腺病毒载体(pDC315-PBX1-EGFP)转染THP1细胞后,采用实时定量PCR(RT-PCR)和Western blot技术分别在mRNA水平和蛋白水平检测PBX1和IFI16表达的变化。结果,pDC315-PBX1-EGFP转染THP1细胞后,PBX1基因的表达水平都增高,同时发现IFI16基因的表达水平降低。PBX1作为一种转录因子,能调节干扰素诱导蛋白IFI16的表达。     

高频电汽化切除并注射THP治疗浅表膀胱癌18例

目的：探讨高频电汽化切除后粘膜下注射及膀胱内灌注抗癌药物治疗浅表膀胱肿瘤的效果。方法：经尿道高频电汽化膀胱肿瘤、肿瘤周围粘膜下和基底部注射盐酸吡柔比星（THP）,术后间断膀胱内灌注THP。结果：本组18例浅表膀胱肿瘤,术中、术后均无输血,无膀胱穿孔,未引起组织坏死。术后随访（6－15）月,未引起骨髓抑制,未见肿瘤复发。结论：此方法操作简单、安全、恢复快,并发症低。粘膜下注射并膀胱内灌注抗癌药物重点部位突出,药液扩散均匀,既可杀灭存留的肿瘤细胞,又对微小癌灶产生毒性作用,对治疗和预防浅表肿瘤复发疗效可靠。     

Palmitate enhanced the cytotoxicity of ZnO nanomaterials possibly by promoting endoplasmic reticulum stress

We recently synthesized ZnO nanomaterials (denoted as ZnO nanorods [NRs] and Mini‐NRs) and suggested that their cytotoxicity could be related with the activation of endoplasmic reticulum (ER) stress apoptosis. However, in a complex biological microenvironment, the ER stress‐apoptosis pathway could also be modulated by biological molecules, such as free fatty acids, leading to unpredicted biological effects. In this study, we investigated the combined toxicity of ZnO NRs/Mini‐NRs and palmitate (PA) to THP‐1 macrophages. PA influenced the zeta potential and solubility of ZnO NRs and ZnO Mini‐NRs in water, which indicated a change of colloidal stability. Exposure to ZnO NRs and Mini‐NRs dose‐dependent decreased cellular viability and release of soluble monocyte chemotactic protein 1 (sMCP‐1), and these effects were significantly promoted with the presence of PA. However, ZnO NR‐ and Mini‐NR‐induced intracellular Zn ions or reactive oxygen species were not significantly affected by PA. ZnO NRs and ZnO Mini‐NRs significantly promoted the expression of ER stress genes HSPA5, DDIT3, XBP‐1s and apoptotic gene CASP3, whereas PA also modestly promoted the expression of HSPA5, DDIT3 and CASP3. Interestingly, the ER stress inducer thapsigargin showed a similar effect as PA to promote the cytotoxicity of ZnO NRs and ZnO Mini‐NRs. It is suggested that PA might promote the cytotoxicity of ZnO NRs and ZnO Mini‐NRs possibly by promoting ER stress.     

氧化低密度脂蛋白致损人单核细胞白血病细胞株源性巨噬细胞Notch信号的表达

目的 研究氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）致损人单核细胞白血病细胞株（THP1）源巨噬细胞Notch信号的表达,探讨Notch信号各成分对动脉粥样硬化（AS）发病的可能作用。方法 用不同浓度的ox-LDL刺激THP1源巨噬细胞,在不同时间分别应用实时定量聚合酶链式反应及蛋白免疫印迹检测Notch信号通路受体配体的差异表达。结果 与对照组比较,加入ox-LDL后,THP1源巨噬细胞四种受体中Notch1表达明显升高（P〈0. 05）,五种配体中DlL4和Jagged1表达明显升高（P〈0. 05）;Notch1、DlL4和Jagged1升高的作用在ox-LDL浓度为50 mg/ L 6 h点作用最强。结论 ox-LDL致损THP1源巨噬细胞参与AS的发生与Notch1,DlL4和Jagged1高表达有关。     

THP与ADM对乳腺癌的体外生长抑制及诱导凋亡研究

目的比较吡柔比星(THP)和阿霉素(ADM)对乳腺癌细胞的体外抑制及凋亡诱导作用。方法采用ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)及AnnexinV凋亡检测技术比较吡柔比星和阿霉素对人乳腺癌细胞株MCF-7的体外生长抑制及细胞凋亡诱导作用。结果吡柔比星对MCF-7细胞株生长抑制作用明显高于阿霉素,其IC50仅相当于阿霉素的1/3-1/6,差异具有显著意义(P0.01);吡柔比星和阿霉素对MCF-7细胞抑制作用均有剂量依赖性,并均能在低浓度下诱导MCF-7细胞凋亡,吡柔比星处理组的细胞凋亡比例高于阿霉素组(P0.01)。结论吡柔比星较阿霉素对乳腺癌细胞MCF-7具有更好的体外生长抑制和诱导细胞凋亡作用。     

125I标记Toll样受体4-抗体与人单核细胞系THP1的体外结合研究

目的：125I标记Toll样受体4抗体（TLR4）研究其与人单核细胞系THP1细胞体外结合的特性。方法：用125I标记TLR4,以快速硅胶簿层层析纸（ITLC-SG）分析方法鉴定125I标记抗体的放射化学纯度,再用γ计数器测定125I标记抗体与THP1细胞的TLR4结合量,其中特异结合（SB）=总结合管（TB）-非特异管（NSB）。结果：125I标记TLR4-Ab的标记率为80.27%（n=7）。用快速硅胶簿层层析纸（ITLC-SG）分析方法鉴定其放射化学纯度都能〉95%,测定125I标记抗体的比活度为3.145TBq.mg-1。结论：125I标记的TLR4-Ab具有良好的标记率和放射化学纯度,且125I标记TLR4-Ab与THP1细胞在体外具有很高结合亲和力。     

巴西日圆线虫虫体蛋白体外诱导THP-1来源巨噬细胞极化的研究

目的　分析巴西日圆线虫虫体蛋白体外诱导人单核细胞白血病THP?1细胞来源巨噬细胞的极化方向,探索机体对巴西日圆线虫感染的免疫应答机制。方法　建立并维持巴西日圆线虫培养的实验室循环,无菌条件下收集L3和L5虫体,分别制备虫体蛋白;建立THP?1细胞体外培养体系,经500 ng/mL佛波酯（PMA）刺激培养后呈贴壁状态的M0型细胞分别采用500 ng/mL脂多糖（LPS）+ 100 ng/mL γ?干扰素（IFN?γ）、白细胞介素4（IL?4）+ IL?13（浓度均为100 ng/mL）、L3及L5虫体蛋白（浓度均为5 mg/mL）进行刺激,同时设不加任何刺激的阴性对照组。通过显微镜镜检观察刺激后细胞形态、实时荧光定量PCR（qPCR）检测M1/M2型巨噬细胞特异性基因mRNA表达水平、流式细胞术检测巨噬细胞表面标志物及酶联免疫吸附试验（ELISA）检测M1/M2型巨噬细胞分泌的细胞因子含量,观察巴西日圆线虫虫体蛋白体外诱导THP?1来源巨噬细胞的极化方向。结果　THP?1细胞经PMA刺激培养呈贴壁的M0型细胞后,经LPS + IFN?γ刺激培养后呈特征性M1型极化;经IL?4 + IL?13刺激培养后呈特征性M2型极化;经L3和L5蛋白刺激培养后均呈特征性M2型极化。阴性对照组、LPS + IFN?γ刺激组、IL?4 + IL?13刺激组、L3蛋白刺激组、L5蛋白刺激组间M1型巨噬细胞比例差异有统计学意义（[χ2] = 3 721.00,P < 0.001）,其中LPS + IFN?γ刺激组M1型巨噬细胞比例最高;各组间M2型巨噬细胞比例差异有统计学意义（[χ2] = 105.43,P < 0.001）。各组间C?C基序趋化因子配体2（CCL2）、肿瘤坏死因子α（TNF?α）、IL?12b、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、IL?10、甘露糖受体C型1（Mrc1）基因mRNA表达水平差异均有统计学意义（F = 191.95、129.95、82.89、11.30、9.51、12.35,P均< 0.001）,各组间CD86、CD206阳性率差异均有统计学意义（[χ2] = 24 004.33、832.50,P均< 0.001）。LPS + IFN?γ刺激组IL?1β、TNF?α表达水平均显著高于IL?4 + IL?13刺激组、L3蛋白刺激组及L5蛋白刺激组（P均< 0.001）;IL?4 + IL?13刺激组、L3蛋白刺激组和L5蛋白刺激组TGF?β1、IL?10表达水平均显著高于阴性对照组和LPS + IFN?γ刺激组（P均< 0.05）。结论　巴西日圆线虫L3和L5虫体蛋白体外均可诱导THP?1来源巨噬细胞向M2型极化。     

紫杉醇联合阿霉素/吡柔比星治疗晚期乳腺癌的临床疗效及安全性观察

目的观察紫杉醇联合阿霉素/吡柔比星化疗方案治疗晚期乳腺癌的疗效、安全性及毒副反应。方法经病理证实的晚期乳腺癌患者45例,其中乳腺癌肺转移28例,肝转移8例,骨转移25例。既往未曾采用过蒽环类药物者17例给紫杉醇联合阿霉素方案化疗,既往曾采用过蒽环类药物者28例给予紫杉醇联合吡柔比星方案化疗,21 d为一个周期,2周期后评价疗效。有效者给予4周期的化疗。结果45例患者均可评价疗效,其中联合阿霉素组CR 1例,PR 8例,SD 5例,PD 3例,总有效率(CR PR)为52.9%;联合吡柔比星组CR 2例,PR 13例,SD 9例,PD 4例,总有效率为53.6%。主要毒副反应为脱发、骨髓抑制、消化道反应和心脏毒性。其中联合阿霉素组Ⅲ度以上白细胞减少发生率为47.1%,联合吡柔比星组为35.7%;S-T段的改变及心律失常的发生率:联合阿霉素组为29.4%,联合吡柔比星组为10.7%。结论紫杉醇联合阿霉素/吡柔比星方案治疗晚期乳腺癌有较好的疗效,毒副反应可以耐受,而且吡柔比星组较阿霉素组的心脏毒性及骨髓抑制更小,因此,吡柔比星对于老年患者及曾接受过蒽环类药物治疗的患者更安全且有效。