RhoC蛋白在原发性肝细胞癌中的表达

目的：观测RhoC基因蛋白在原发性肝癌中的表达，探讨其与原发性肝癌临床病理指标和预后的关系。方法：采用免疫组化法，检测43例原发性肝癌及癌旁组织标本RhoC基因蛋白表达情况，并对其中36例接受根治性手术的患者进行随访。结果：RhoC蛋白在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织，在多结节、低分化、包膜不完整以及有门脉侵犯的原发性肝癌组织中RhoC呈高表达，RhoC低表达的患者较高表达者的同期生存率明显增加。结论：RhoC蛋白与原发性肝癌的浸润和转移有密切关系，可以作为原发性肝癌的预后判断指标之一。     

肝细胞癌中RhoC mRNA的表达及其临床意义

目的：探讨RhoC mRNA在人肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）组织中的表达及其与HCC复发转移的关系。方法：用荧光定量PCR技术检测82例HCC及其癌旁肝组织,16例正常肝组织中RhoC mRNA的表达情况。分析mRNA表达量与临床资料之间的关系。结果：RhoC mRNA在HCC、癌旁组织和正常组织中均可检测到表达,表达量分别为1.18±0.77、0.67±0.29和0.38±0.18,组间表达量比较差异有统计学意义（P〈0.05）,RhoC mRNA在HCC组织中的表达水平明显高于癌旁肝组织中的表达水平,两者差异有统计学意义（P〈0.05）;RhoC mRNA在HCC中的表达量与结节数目多,门静脉癌栓,术后复发转移相关（P〈0.05）,RhoC mRNA高表达的患者术后5年生存率明显低于RhoCmRNA低表达的患者（P〈0.05）。结论：RhoC mRNA的过表达可能与HCC的发生及复发转移有关,有可能做为HCC患者术后复发转移的预测指标。     

三氧化二砷抑制肝癌细胞RhoC基因表达对其侵袭转移行为的影响

目的 观察三氧化二砷(As2O3)抑制肝癌HepG2细胞侵袭转移的作用及对转移相关基因BhoC表达的影响.方法 分别采用AnnexinV/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡,噻唑蓝(MTT)比色法、TransweU法检测As2O3对HepG2细胞黏附、迁移、侵袭能力的影响.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot法检测AS2O3作用后HepG2细胞中RhoC基因表达的变化.结果 As2O3作用后HepG2细胞的早期凋亡细胞明显增多(P＜0.05),黏附、迁移及侵袭穿膜细胞数较对照明显减少(P＜0.01).As2O3作用4、6.8d后RhoC基因表达水平下降(P＜0.05).结论 As2O3可通过下调RhoC基因的表达及诱导细胞凋亡而抑制肝癌细胞的侵袭转移.     

RhoC/ROCK-Ⅰ信号通路的过度激活对卵巢癌细胞恶性行为的影响

目的 探讨 RhoC/ROCK-Ⅰ的过度激活对卵巢癌细胞生物学特性的影响.方法 RT-PCR 及 Western blot检测 RhoC 及ROCK-Ⅰ在卵巢癌细胞 SW626、Skov-3、A2780 和 Caov-3 中 mRNA 及蛋白的表达水平;将携带ROCK-Ⅰ组成性激活突变体 p160ROCK-Ⅰ△3的质粒(pCAG-myc-p160ROCK-Ⅰ△3)以脂质体介导,转染上述 4 株人卵巢癌细胞,划痕试验和 Boyden 小室检测转染前后 4 种卵巢癌细胞的体外迁移与侵袭能力的变化,MTT 比色法测定 p160ROCK-Ⅰ△3 对细胞增殖能力的影响.结果 RhoC 和 ROCK-Ⅰ在 4 种卵巢癌细胞中呈不同程度表达,其中 RhoC 的表达水平与癌细胞侵袭力和迁移能力呈正相关(r=0.95,P<0.01),转染 pCAG-myc-p160ROCK-Ⅰ△3后,4 株细胞的侵袭能力与对照组比较分别提高31.1%、33.0%、24.5%和39.4%;迁移能力分别提高33.9%、33.0%、25.0%和40.2%.各株细胞的增殖能力未显示出明显的变化.结论 RhoC/ROCK-Ⅰ信号通路的活性与卵巢癌细胞的体外侵袭和迁移能力相关,ROCK-Ⅰ活性的提高可显著增强卵巢癌肿瘤细胞的体外侵袭和迁移能力.     

反义RhoC基因对胆管癌QBC939细胞株基质金属蛋白酶－2的抑制作用

目的 观察反义RhoC基因对胆管癌QBC939细胞株的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响.方法 将反义RhoC真核表达载体转染人胆管癌细胞株QBC939,逆转录－聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测MMP-2在QBC939细胞、转染空载体的QBC939细胞(QBC939-V)、转染反义RhoC的QBC939细胞(QBC939-AS)的mRNA和蛋白相对表达量.结果 QBC939细胞MMP－2 mRNA吸光度相对值为0.588±0.074,QBC939-V细胞为0.629±0.061,两者差异无统计学意义(P＞0.05),QBC939-AS细胞MMP-2 mRNA吸光度相对值为0.286±0.097;与QBC939及QBC939－V比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 反义RhoC基因能够抑制QBC939细胞株的MMP-2表达.     

反义RhoC基因对胆管癌QBC939细胞株基质金属蛋白酶-9的抑制作用

目的 探讨反义RhoC基因对胆管癌QBC939细胞株的金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响.方法 通过质粒转染的方法向QBC939细胞中转染反义RhoC cDNA真核表达载体pcDNA 3.1Hyp(+)质粒,RT-PCR和Western-Blot检测MMP-9在QBC939细胞、转染空载体的QBC939细胞(QBC939-V)、转染反义RhoC的QBC939细胞(QBC939-AS)的mRNA和蛋白相对表达量.结果 对照组细胞QBC939中MMP-9 mRNA和蛋白的平均光密度值分别为(0.265±0.059)和(0.242±0.063),QBC939-V细胞中MMP-9 mRNA和蛋白的平均光密度值分别为(0.257±0.039)和(0.303±0.031),而反义RhoC cDNA质粒转染组细胞中MMP-9 mRNA和蛋白的平均光密度值分别为(0.125±0.062)和(0.095±0.043);对照组中MMP-9 mRNA和蛋白的平均光密度值均高于反义RhoC转染组,统计学分析表明在QBC939-AS组和对照组之间,MMP-9的平均光密度值差异有统计学意义(P<0.05).结论 反义RhoC基因在QBC939细胞株中可以抑制MMP-9表达.     

Farnesyl transferase inhibitor treatment of breast cancer cells leads to altered RhoA and RhoC GTPase activity and induces a dormant phenotype

Farnesyl transferase inhibitors (FTIs) were shown to be effective in modulating tumor growth in Ras‐transformed tumor cells. Recent studies have focused on Rho GTPases as putative targets of FTI action. Previously, we demonstrated that FTIs were effective in inhibiting the growth and invasiveness of RhoC GTPase‐overexpressing inflammatory breast cancer (IBC) cells however, RhoC activity was increased. In this study, we examine the mechanisms of FTI action on breast cancer cells in culture through modulation of RhoC and RhoA GTPases. We found that FTI inhibition of breast cancer cell growth was reversible and resembled what has been described for an in vitro model of tumor cell dormancy. On FTI treatment, levels of active RhoA decreased significantly, whereas levels of active RhoC increased 3.8‐fold. We studied the role of these two GTPases in a fibronectin and basic FGF‐induced model of breast cancer cell dormancy. Hypoactivation of RhoA and hyperactivation of RhoC were seen to induce morphology and growth changes consistent with tumor cell dormancy in culture. In addition, the JNK/SAPK pathway was induced on FTI treatment. A pharmacologic inhibitor of the JNK/SAPK pathway significantly reduced the number of dormant cells. This study has implications for the use of FTIs as therapeutic agents as well as potential mechanisms for breast cancer cell dormancy.     

RhoC、CXCR4基因与宫颈癌生物学行为的关系

目的:探讨宫颈癌和正常宫颈组织中RhoC、CXCR4 mRNA的表达及意义。方法:采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术分析宫颈癌(36例)和正常宫颈组织(30例)中RhoC、CXCR4 mRNA的表达。结果:RhoC、CX-CR4 mRNA在宫颈癌中表达增高,其表达与宫颈癌的临床分期、淋巴结转移有关,而与癌细胞分化程度无关。结论:RhoC、CXCR4基因的过量表达与宫颈癌的发生发展和转移密切相关。     

胃癌中RhoC和CD44v6的表达及其临床意义

背景与目的:探讨Ras相似蛋白C(Ras homologue C,RhoC)和CD44剪接变异体v6(CD44 splice variant V6,CD44v6)在胃癌中的表达及其与临床病理因素之间的关系.材料与方法:采用免疫组化SP法检测97例胃癌组织中RhoC和CD44v6的表达情况.结果:97例胃癌组织中RhoC和CD44v6阳性率分别为77.31%(75/97)、83.50%(81/97),两者表达存在相关性(P＜0.05).RhoC和CD44v6表达均与胃癌的浸润深度和肿瘤分期有关(P＜0.05),且淋巴结转移组RhoC表达显著高于无淋巴结转移组(P＜0.05).结论:RhoC和CD44v6蛋白的过量表达是胃癌的发生发展中的频发事件,可以作为判断预后的指标之一.     

RhoC反义基因转染对人胆管癌QBC939细胞生长的抑制作用

目的　构建人 Rho C基因反义真核表达载体 ,研究 Rho C基因对胆管癌 QBC939细胞株增殖的影响。　方法　应用分子克隆技术 ,将含 Rho C基因全长开放阅读框目的片段克隆到真核载体 pc DNA 3.1/ Hyg(+)上 ,构建反义 Rho C c DNA真核表达载体 ,以脂质体转染人胆管癌 QBC939细胞。检测细胞生长曲线 ,RT- PCR检测Cyclin D1 在 QBC939细胞、转染空载体的 QBC939细胞 (QBC939- V)和转染反义 Rho C重组载体的 QBC939细胞(QBC939- AS)的 m RNA相对表达量。　结果　与 QBC939细胞及 QBC939- V细胞相比 ,QBC939- AS细胞体外生长较慢。 QBC939- AS细胞、QBC939- V细胞和 QBC939细胞的 Cyclin D1 的表达量分别为 0 .15 1± 0 .0 76 ,0 .2 96±0 .0 2 6和 0 .2 87± 0 .0 5 7;QBC939- AS细胞的 Cyclin D1 的表达量与 QBC939- V细胞及 QBC939细胞的差异有显著性 (P<0 .0 5 )。　结论　 Rho C可能通过调节 Cyclin D1 来抑制 QBC939细胞的增殖能力。