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作者应用氧化葡聚糖T_(10)作为交联剂,将抗B淋巴细胞白血病单抗B_(159)分别与抗癌药物表阿霉素(EPI)和阿霉素(ADR)连接,制成免疫导向药物B_(159)-Dex-EPI和B_(159)-Dex-ADR,B_(159)与EPI或ADR的克分子比均为1:12~14。经活细胞免疫荧光法和细胞ELISA法测定,免疫导向药物保持了抗体活性。MTT试验证实,两种免疫导向药物均具有明显的选择性杀伤作用,对非靶细胞毒性小;两种免疫导向药物对靶细胞的杀伤作用明显强于游离药物和正常鼠抗体结合物;B_(159)-Dex-EPI的靶细胞毒性作用强于B_(159)-Dex-ADR。 相似文献
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单克隆抗体—表阿霉素免疫偶合物的制备和体外活性 总被引:14,自引:0,他引:14
用双功能试剂己二酰肼制备腙键连接的聚谷氨酸—表阿霉素,通过控制交联条件,所得产物克服了大分子自身交联的缺点,交联率较高。聚谷氨酸的载药量与分子量呈正比,平均每8~11个谷氨酸单体连接1分子表阿霉素。分子量为14300的聚谷氨酸做载体其载药量为1:11,与单抗交联所得的偶合物McAb:PGA:PAR为1:2:22。偶合物较好地保留了抗体活性,体外细胞毒性较游离药物略有下降,但表现出单抗介导的靶细胞选择性杀伤作用。本研究用腙键交联法成功地制备了药/抗比高且体外有效的免疫偶合物,为进一步制备细胞靶向的肿瘤化疗制剂奠定了基础。 相似文献
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单克隆抗体博来霉素A6偶联物对白血病细胞特异性结合与内化 总被引:2,自引:0,他引:2
抗CCT2单克隆抗体博来霉素A6偶联物可吸附胶体金颗粒(McAb-A6-Au)。电镜观察表明,在4℃,1h,表面有McAb-A6-Au颗粒的CEM细胞最高达78%;在37℃,4h,内化McAb-A6-Au颗粒的CEM细胞高达72%。而抗原性无关的U937细胞仅为14%。并且McAb-A6-Au颗粒能直接穿过细胞膜、核膜进入细胞浆和细胞核。37℃,1h已有10~18%的CEM细胞核内有McAb-A 6-Au颗粒。实验结果提示了单抗与博来霉素A6的偶联物与选择性地结合靶细胞,而且进入细胞速度快、穿透力强,有可能成为治疗白血病药物。 相似文献
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belantamab mafodotin( BLENREP) 是由GlaxoSmithKline公司研发的靶向抗肿瘤药物,可选择性作用于恶性浆细胞表面的B细胞成熟抗原。该药于2020年8月5日获美国食品药品监督管理局(FDA)批准上市,用于治疗成人复发或难治性多发性骨髓瘤。临床试验表明,belantamab mafodotin具有较好的临床疗效,常见不良反应包括角膜病变、血小板减少症及贫血。本文主要对belantamab mafodotin的作用机制、用法用量、药动学、临床研究及不良反应等方面进行介绍,以期为临床用药提供一定的参考。 相似文献
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目的:构建含hFⅦ-LC+hIgG1-Fc cDNA的重组真核表达载体,并转染中国仓鼠卵巢细胞亚株CHO-K1获得以组织因子(TF)为靶点的免疫治疗结合物用于肿瘤的靶向治疗。方法:用分子生物学方法从汉族人肝组织和淋巴细胞中分别获得hFⅦ-LC和hIgG1-Fc DNA片段并用连接酶正向克隆入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中。以脂质体法转染阳性质粒入CHO-K1细胞,G418加压筛选获得阳性单克隆细胞;Excel 301无血清培养液扩大培养,培养液Ni-NTA亲和层析纯化和制备hFⅧ-LC+hIgG1-Fc融合蛋白,ELISA法检测该融合蛋白与TF的靶向作用,免疫激活物与结肠癌细胞HT-29及NK细胞混合培养检测结合物激活NK细胞的能力。结果:以汉族人肝组织和淋巴细胞为模板扩增的hFⅦ-LC和hIgG1-Fc DNA片段经测序证实与基因库报道的系列完全一致;经酶切分析、测序证实构建的hFⅦ-LC+hIgG1-Fc融合基因片段完整地落在真核表达质粒pcDNA3.1(+)的阅读框架中;LipofectamineTM2000转染试剂能获得含pcDNA3.1(+)-hFⅦ-LC+hIgG1-Fc阳性的CHO-K1细胞,经1g/L G418加压筛选可以获得分泌hFⅦ-LC+hIgG1-Fc融合蛋白的单克隆细胞株;ILExcel301无血清培养液用Ni-NTA亲和层析纯化可以制备1.3 mg hFⅦ-LC+hIgG1-Fc融合蛋白,经ELISA法鉴定与TF具有高亲和力,免疫激活物与结肠癌细胞HT-29及NK细胞混合培养表现出明显的激活NK细胞的能力。结论:成功构建了hFⅦ-LC+hIgG1-Fc融合蛋白的真核表达载体并获得了分泌hFⅦ-LC+hIgG1-Fc融合蛋白的CHO-K1单克隆细胞株,为制备以TF为靶点的肿瘤免疫治疗结合物奠定了基础。 相似文献
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本文报道了肝癌单克隆抗体A24-表阿霉素结合物的制备及其对肝癌细胞SMMC-7721的体外杀伤作用。先用高碘酸钠把葡聚糖氧化成多醛基葡聚糖,再以此为中介体连接单抗与表阿霉素。结合物中抗体与药物摩尔比为1:40。单抗活性保存良好。该结合物对肝癌细胞的毒性显著高于游离药物及无关抗体结合物,而对非靶细胞的毒性则明显低于游离药物。说明结合物对肝癌细胞有较强的选择性杀伤作用,有可能用于肝癌导向治疗。 相似文献
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目的:探讨抗CD4单克隆抗体免疫结合物对T源性淋巴瘤细胞的特异性杀伤效应。方法:采用低分子右旋糖苷(DextranTl0)作联接桥,将表阿霉素分子偶联到抗CD4单抗上,制备成抗CD4单抗免疫结合物,在体外和体内,经补体非依赖性细胞毒试验、免疫组化试验、CFU-GM集落形成试验.^125I-单抗结合物裸鼠体内示踪等方法测定抗CD4免疫结合物对T-源性淋巴瘤细胞的亲合力和特异性杀伤效应。结果:抗CD4-表阿霉素免疫结合物对T源性淋巴瘤细胞(CEM)有较强亲合力和特异性杀伤力(79%),ECT扫描发现^125I-抗CD4结合物主要富集在含CEM细胞的实体瘤内。结论:^125I-抗CD4单抗标志物和抗CD4-表阿霉素结合物可用于诊断和治疗T-源性淋巴瘤。 相似文献
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外周血细胞的分离及其在免疫偶合物研究中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨分离外周血细胞的方法及该方法在免疫偶合物制备过程中的应用价值。方法:应用Ficoll/Hypaque分离液经密度梯度离心得到单个核细胞、红细胞及混有红细胞的粒细胞;用0.83%氯化铵溶解混杂的红细胞得到粒细胞;利用单核细胞粘附玻璃的特性除去淋巴细胞中的单核细胞;用AET-E玫瑰花试验分离T淋巴细胞及B淋巴细胞。将分到的各血细胞与单克隆抗体及免疫偶合物反应,活细胞免疫荧光法测定。结果:分到的各种血细胞2h活性达96%以上,细胞得量较高。所测定的单抗特异性高,活性保持良好。结论:该法是一种简单易行、经济方便的方法,可用于免疫偶合物的制备研究中。 相似文献
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抗癌抗生素C1027与单克隆抗体Fab片段偶联物的抗肝癌作用 总被引:7,自引:0,他引:7
抗人肝癌单克隆抗体(单抗)3A5用木瓜蛋白酶消化得到Fab片段。单抗3A5和Fab片段分别与抗癌抗生素C1027偶联,偶联物经克隆生成法测定对肝癌细胞有很强的杀伤作用,C1027,Fab-C1027和3;3A5-C1027的IC50分别为6.5×10-16,8.6×10-16和4.2×10-14mol·L-1;Fab-C1027偶联物对非靶细胞(KB)的IC50值为1.4×10-13mol·L-1,与靶细胞(BEL-7402)的IC50值相比,两者相差160倍。说明Fab-C1027的杀伤活性强于3A5-C1027,并对靶细胞呈选择性杀伤作用。给皮下移植人肝癌的裸鼠iv剂量0.1 mg·kg-1,结果C1027和Fab-C1027的抑瘤率分别为59和85%,说明Fab片段与C1027偶联物比游离C1027的疗效更高。 相似文献