新生儿脑病S-100蛋白监测与预后的研究进展

目的:通过监测新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿血清中S-100蛋白含量的动态变化,建立对HIE患儿的早期科学诊断及预后评估技术指标。并探讨S-100蛋白浓度变化与病情的严重程度及转归之间的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验、双抗体夹心法检测,对120例HIE有症状组患儿(HIE轻度症状组40例,HIE中度症状组40例,HIE重度症状组40例)和40例新生儿窒息组患儿与40例对照组健康新生儿血清S-100蛋白含量进行检测,并进行动态观察。结果:①HIE有症状组不同时期血清S-100蛋白含量均显著高于对照组(P<0.01);②新生儿窒息组不同时期的血清S-100蛋白含量也明显高于对照组(P<0.01);③HIE有症状组血清S-100蛋白含量明显高于新生儿窒息组(P<0.05)。结论:HIE有症状组患儿病情越重,其血清S-100蛋白含量则越高,提示血清S-100蛋白可作为判断HIE病情程度的客观依据和早期诊断以及预后评估HIE的主要指标。     

Early induction of neuronal lipocalin-type prostaglandin D synthase after hypoxic-ischemic injury in developing brains

Lipocalin-type prostaglandin (PG) D synthase (L-PGDS) is up-regulated in oligodendrocytes (OLs) in mouse models for genetic neurological disorders including globoid cell leukodystrophy (twitcher) and GM₁ and GM₂ gangliosidoses and in the brain of patients with multiple sclerosis. Since L-PGDS-deficient twitcher mice undergo extensive neuronal death, we concluded that L-PGDS functions protectively against neuronal degeneration. In this study, we investigated whether L-PGDS is also up-regulated in acute and massive brain injury resulting from neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE). Analysis of brains from human neonates who had died from HIE disclosed that the surviving neurons in the infarcted lesions expressed L-PGDS. Mouse models for neonatal HIE were made on postnatal day (PND) 7. Global infarction in the ipsilateral hemisphere was evident at 24 h after reoxygenation in this model. Intense L-PGDS immunoreactivity was already observed at 10 min after reoxygenation in apparently normal neurons in the cortex, and thereafter, in neurons adjacent to the infarcted area. Quantitative RT-PCR revealed that the L-PGDS mRNA level of the infarcted hemisphere was 33-fold higher than that of the sham-operated mouse brains at 1 h after reoxygenation and that it decreased to the normal level by 24 h thereafter. Furthermore, in both human and mouse brains, many of L-PGDS-positive cells were also immunoreactive for p53; and some of these expressed cleaved caspase-3. The expression of L-PGDS in degenerating neurons implies that L-PGDS functions as an early stress protein to protect against neuronal death in the HIE brain.     

神经系统特异性蛋白质在新生儿缺氧缺血性脑病中的诊断价值

目的 评价缺氧缺血性脑病（HIE）新生儿脑脊液（CSF）和血浆中神经元特异性稀醇化酶（NSE）、S-100蛋白（S-100protein,S-100)、髓鞘碱性蛋白（MBP）、肌酸磷酸激酶脑型同工酶（CK-BB）等党课 经系统特异性蛋白质与新生儿HIE程度及预后的关系。方法 新生儿HIE患儿55例,无中枢神经系统疾患的患儿16例作为对照,取CSF和血浆检测上述4种神经系统特异性蛋白质水平。NSE、S-100、MBP用放射免疫试剂盒检测,CK-BB用酶法及琼脂糖电泳法检测,存活出院的患儿定期随访。结果 CSF的NSE、S-100、MBP、CK-BB及血浆NSE、CK-BB均与HIE程度相关,但只有CSF的神经系统特异性蛋白质才能较准确地反映患儿的远期预后,其中敏感性、特异性最高的指标是NSE和S-100。结论 CSF的NSE和S-100是判断HIE患儿脑损伤程度、预测远期预后的可靠指标。     

镁与新生儿缺氧缺血性脑病:附55例临床分析

目的:探讨镁与新生儿缺氧缺血性脑病的关系。方法:随机选择HIE病例55例和对照组25例,将其入院后第一次血清镁测量值进行对比,结果进行u检验。结果:血清镁HIE组为(0.65±0.14)mmol/l,对照组为(0.80±0.09)mmol/l,P<0.01。结论:新生儿缺氧缺血性脑病有低镁倾向,且病情程度越重,血镁降低越明显。     

脑电图在诊断新生儿缺氧缺血性脑病中的作用

目的探讨EEG在诊断新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）中的作用。方法将围生期有窒息史的78例患儿按照临床表现分为两组：新生儿缺氧缺血性脑病组和无新生儿缺氧缺血性脑病组，并对每个病例做EEG检查后将结果进行比较分析。结果新生儿缺氧缺血性脑病组EEG全部异常，非新生儿缺氧缺血性脑病组仅2例异常；EEG诊断新生儿缺氧缺血性脑病的灵敏度为100％，特异度为95％，阳性预测值为95％，阴性预测值为100％。结论新生儿缺氧缺血性脑病时脑电图有异常．EEG对临床诊断新生儿缺氧缺血性脑病有重要意义。     

新生儿缺氧缺血性心脏损害早期诊疗的预后探讨

目的:研究新生儿缺氧缺血性心脏损害(HIM)早期诊断和及早微量多巴胺治疗对HIM预后的影响,探讨改善预后的措施。方法:对63例窒息新生儿48 h肌酸激酶同功酶(CK-MB)及心电图QT间期弥散度(QTcd)明显异常的HIM患儿及早微量多巴胺治疗,1-2周后再复查并与32例无窒息新生儿对照比较。结果:HIM组与对照组比较患儿发病48 h内CK-MB及QTcd均明显升高(P<0.001),经及早微量多巴胺治疗等措施1-2周后HIM患儿CK-MB及QTcd均显著下降,而产后缺氧组较胎儿期缺氧组下降更明显(P<0.005),且胎儿期缺氧组并发症多,预后差(P<0.005)。结论:CK-MB及QTcd相结合可作为HIM早期诊断指标,及早微量多巴胺治疗等措施,对改善预后意义重大。     

神经节苷脂GM1治疗新生儿缺氧缺血性脑病疗效观察

目的评价神经节苷脂GM1(GM1)治疗新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)对患儿急性期及远期神经发育的影响。方法将51例中度HIE患儿分为GM1治疗组(n=27)和对照组(选用1,6-二磷酸果糖或脑活素治疗,n=24)。新生儿期采用NBNA评分,随访期间每3个月采用Gesell量表法对其进行发育评价,对出现神经系统异常者给予相应的康复训练。结果治疗组中死亡1例,失访2例,随访的24例中神经系统发育异常者8例,包括适应性异常3例、大运动异常5例、精细运动异常4例、语言异常3例、个人-社交异常2例；对照组中死亡1例,失访4例,19例随访病人中神经系统发育异常者8例,包括适应性异常4例、大运动异常5例、精细运动异常5例、语言异常6例、个人-社交异常4例。两组Gesell在总均值和语言方面存在显著性差异(P＜0.05),且在9月龄随访时两组Gesell均值在语言方面也存在显著性差异(P＜0.05)。结论早期应用GM1治疗新生儿HIE可以减轻HIE所致的神经系统发育障碍。     

高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠不同时期的影响

目的观察不同时期高压氧(HBO)对大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型的治疗疗效,分析其机制。方法32只7日龄Wistar大鼠制成HIBD模型,随机分为HIBD组(n=12)、HBO早治组(n=12)、HBO晚治组(n=8),并设假手术组(n=12)。HBO早治组与晚治组分别于造模后4 h1、4 d应用HBO。各组动物(除HBO晚治组)于14日龄治疗结束后各处死6只,余同HBO晚治组喂养至28日龄,避暗法测试学习记忆能力后于30日龄处死。以脑组织海马CA1区形态学及学习记忆能力来判断干预效果。结果(1)HE染色:HIBD组各时间点左侧大脑海马CA1区锥体细胞排列紊乱、疏松,层次不清,与假手术组及HBO早治组差异明显;HBO晚治组与HIBD组相似,但神经元数目较之多。(2)微管相关蛋白(MAP-2)灰度值免疫组化定量:HIBD组不同时间点MAP-2阳性表达不同程度下降,与假手术组及HBO早治组差异显著(P<0.01);HBO晚治组也较假手术组及早治组下降(P<0.01),但较HIBD组表达多(P<0.05)。(3)学习记忆能力测试:HIBD组较假手术组明显下降(P<0.05),而HBO早治组与晚治组均高于HIBD组。结论不论早期或晚期应用HBO治疗均能不同程度地减轻HIBD所致的海马CA1区组织学损伤,改善由HIBD引起的学习记忆能力下降,但早期治疗明显优于晚期治疗。     

脐血间充质干细胞静脉移植治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的时效性研究

目的探讨脐血间充质干细胞(MSCs)静脉移植治疗新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的可行性及其时效性。方法脐血MSCs移植使用前以4′,6-二脒基-2-苯吲哚盐酸(DAPI)体外标记。实验选用7日龄SD大鼠38只制备HIBD模型,死亡3只,余35只共分3组:空白对照组(n=11);移植1组(n=12),在HIBD后第2天经鼠尾静脉注入脐血MSCs;移植2组(n=12),在HIBD后1周开始移植。两组均于移植后第2天以及HIBD后2周分别随机将鼠处死、取脑,用于脑组织病理形态学观察,并取海马回区相同部位的缺血脑组织切片,荧光显微镜下观察DAPI阳性细胞数。结果移植2组,1周后缺血脑组织细胞外间隙缩小,细胞数明显增加,脑组织水肿已明显减轻,在大鼠病灶侧脑内,可见大量的DAPI阳性细胞向病灶区及周围迁移和扩散,没有明显的界限。而移植1组于移植后病灶侧脑内很少见到DAPI阳性脐血MSCs分布,其脑组织水肿程度及细胞外间隙的改善和细胞数目的增加也不明显。结论脐血MSCs移植治疗新生大鼠HIBD,能有效透过血脑屏障,在病灶脑组织周围迁移、扩散、整合;移植时间选择HIBD后1周时有良好疗效。移植治疗过程中未见植入反应和其他不良反应。     

不同褪黑素治疗方案对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞增殖的影响

目的 探讨不同褪黑素治疗方案对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠脑内源性神经干细胞（NSCs）增殖及远期组织学的影响,以寻求褪黑素治疗的较优方案。方法 将96只7日龄Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、缺氧缺血性脑损伤（HIBD）组、单剂量即刻褪黑素治疗（SDIT）组及7日连续褪黑素治疗（7DCT）组（n=24）。HIBD大鼠模型采用分离并电凝大鼠右侧颈总动脉,低氧舱（氧气浓度为8%±0.01%）内缺氧2 h的方法建立。造模后7 d,采用增殖细胞核抗原（PCNA）/巢蛋白（Nestin）免疫荧光双标法检测各组大鼠侧脑室室管膜下区（SVZ）及海马齿状回（DG）区内源性NSCs的增殖情况（n=8）;采用Western blot法检测各组大鼠脑Nestin蛋白的表达水平（n=8）。造模后28 d,采用苏木精-伊红染色（HE）和尼氏染色法观察海马CA1区的组织病理学及锥体细胞数的变化（n=8）。结果 免疫荧光染色结果显示：SDIT组和7DCT组PCNA⁺Nestin⁺DAPI⁺细胞数均较HIBD组增加,且7DCT组显著多于SDIT组（P < 0.01）;Western blot结果显示：SDIT组与7DCT组Nestin蛋白的表达水平均显著高于HIBD组,且7DCT组显著高于SDIT组（P < 0.05）;HE染色结果显示：SDIT组及7DCT组细胞损伤减轻;尼氏染色结果显示：SDIT组和7DCT组锥体细胞数均较HIBD组增加,且7DCT组显著高于SDIT组（P < 0.01）。结论 SDIT和7DCT均可促进HIBD新生大鼠脑内源性NSCs的增殖,减轻远期组织学损伤,且7DCT疗效优于SDIT。