扶正化瘀胶囊对心肌梗死后心肌纤维化大鼠微小RNA-29家族表达的影响

目的通过观察扶正化瘀胶囊对心肌梗死后心肌纤维化大鼠微小RNA-29家族(microRNA-29,miR-29)的表达影响,探讨其抗心肌纤维化的可能作用机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎术制备大鼠急性心肌梗死模型,随机分为模型组、扶正化瘀组和卡托普利组,假手术组只穿线不结扎,每组6只,连续8周灌胃给予相应药物或去离子水。采用HE染色、心脏指数评分、Masson染色的方法评价心脏整体形态结构、重构程度及纤维化程度,并运用实时荧光定量PCR法检测miR-29家族表达水平。结果 (1)与假手术组相比,模型组大鼠心脏指数比值、胶原容积分数升高(P0.01);与模型组相比,扶正化瘀组、卡托普利组大鼠心脏指数比值、胶原容积分数均降低(P0.01)。(2)与假手术组相比,模型组大鼠心肌梗死边缘区组织中miR-29a-3p、miR-29b-3p、miR-29c-3p、miR-29b-5p、miR-29c-5p表达显著下调(P0.05)。与模型组比较,扶正化瘀组miR-29b-3p、miR-29a-5p、miR-29b-5p、miR-29c-5p表达上调(P0.05);卡托普利组miR-29a-5p、miR-29b-5p、miR-29c-5p表达水平显著升高(P0.01),miR-29a-3p、miR-29b-3p、miR-29c-3p表达水平进一步下调(P0.01)。结论扶正化瘀胶囊可改善大鼠心肌梗死后心肌纤维化,其作用机制可能与上调部分miR-29家族成员的表达有关。     

妊娠期肝内胆汁淤积症患者胎盘ERp29、PRDX6表达及临床意义

目的探究已确诊为妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)的孕妇胎盘组织内ERp29、PRDX6的表达量及其相应的临床意义。方法选取2014年5月-2015年9月该院产科住院的产妇,通过免疫组织化学法对45例ICP患者及45例正常对照组孕妇胎盘组织ERp29、PRDX6表达量及其定位进行相关检测。结果 ERp29及PRDX6在ICP患者胎盘组织内较正常对照组显著升高(P0.05)。结论 ERp29、PRDX6的表达与ICP的发生发展相关,可能成为ICP的预防和治疗的新分子靶点。     

热休克对肝癌细胞HSP70、gp96表达的影响及与细胞周期关系

与肿瘤免疫密切相关的热休克蛋白（HSPs）主要有HSP70和gp96。因可诱导特异性抗肿瘤反应成为近期热点，不断有临床治疗试验报道。目前HSPs作用精确分子机制还不明确；特别是gp96，除发现其“管家”作用。还发现它在先天和获得性免疫中发挥重要调节作用。我们在不同条件下对BeL-7402肝癌细胞株的HSP70、gp96进行单项及共同表达的研究，结合细胞周期进行分析，对于HSP70、gp96表达，两者表达关联性，及其表达与细胞周期的关系进行了探讨。     

溴氰菊酯对白纹伊蚊（Aedesalbopictus）C6／36细胞株的细胞遗传学效应

本研究选择１０μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、４０μｇ／ｍｌ浓度的溴氰菊酯处理白纹伊蚊Ｃ６／３６细胞，以ＭＭＣ作为阳性对照物，观察溴氰菊酯处理２４ｈ后对Ｃ６／３６细胞染色体畸变率和姐妹染色单体互换（ＳＣＥ）频率的影响。结果显示，三个浓度的溴氰菊酯对Ｃ６／３６细胞染色体畸变率均没有显著影响（Ｐ＜０．０５）；溴氰菊酯浓度在４０μｇ／ｍｌ时可诱导Ｃ６／３６细胞ＳＣＥ频率轻度增高（Ｐ＞０．０５），而溴氰菊酯浓度在１０μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ时，对Ｃ６／３６细胞ＳＣＥ频率没有诱导作用。表明溴氰菊酯对Ｃ６／３６细胞的遗传学效应较弱     

沙立度胺对ECV304细胞增生的抑制作用研究

目的在体外探讨沙立度胺(thalidomide,反应停)抗血管新生的作用机制.方法MTT法检测反应停对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞增殖的抑制率;RT-PCR检测血管新生相关基因的表达;凝胶电泳迁移率实验(EMSA)检测反应停对NF-κB活化的影响.结果反应停对ECV304细胞增殖的抑制效应与药物浓度呈正相关(r=0.999,P＜0.001),当50μg/ml反应停处理72小时,其抑制率为34%;25μg/ml反应停处理24小时,ECV304细胞VEGF mRNA相对表达量明显低于对照组(0.48±0.14vs0.98±0.18,P=0.005);与对照组相比,IL-8 mRNA相对表达量无明显减少(5.77±0.44vs 5.99±0.52,P＞0.05);αv整合素亚基mRNA相对表达量明显低于对照组(0.47±0.13vs0.82±0.18,P=0.029),而β5整合素亚基mRNA相对表达量与对照组相比,差异无显著性(1.5±0.52vs 1.37±0.81,P＞0.05).当药物浓度为50μg/ml时,NF-κB转录因子活性明显降低,且其对NF-κB活化的抑制与药物浓度有关.结论反应停抑制血管新生可能与其通过直接抑制内皮细胞增殖、下调VEGF和αv整合素亚基表达以及抑制NF-κB的活化等多个环节有关.     

维甲酸调变早幼粒白血病细胞株NB4中G-CSF及其受体表达

目的：进一步研究G－CSF在维甲酸致高白细胞症中的作用。方法：用RT－PCR、Northernblotting方法检测NB4细胞经全反式维甲酸（ATRA）作用后G－CSF mRNA表达的变化，同时用ELISA方法检测细胞培养上清液中G－CSF蛋白水平的变化；采用流式细胞技术检测NB4细胞经ATRA作用后G－CSF受体蛋白表达的变化。结果：ATRA可从基因水平上调NB4细胞中G－CSF表达，并可增加NB4细胞表面G－CSF受体的表达，G－CSF受体表达增加出现的时间虽然稍晚于G－CSF表达增加出现的时间，但仍然在较早期阶段，此时，细胞形态学和NBT实验均证实BN4细胞处于部分分化阶段。结论：在ATRA治疗APL过程中，G－CSF及其受体表达增加可能协同参与了高白细胞症的发生。     

外源性脆性组氨酸三联体基因对胃癌细胞株治疗敏感性的影响

脆性组氨酸三联体（FHIT）基因是近年发现的抑癌基因之一，有研究表明胃癌中存在较高频率的FHIT基因转录异常和（或）FHIT基因表达降低或缺失，提示FHIT基因异常表达可能与人类胃癌的发生、发展有关。本研究通过脂质体转染技术，将FHIT基因转染到有FHIT基因表达缺失的MGC-803胃癌细胞株，观察FHIT表达对肿瘤细胞生长和化学治疗敏感性。     

大肠侧向发育型肿瘤细胞株双向电泳技术成功建立

目的:建立侧向发育型肿瘤细胞(LST)株双向电泳技术.方法:提取LST细胞株总蛋白质,采用不同pH范围IPG胶条进行LST细胞株总蛋白质双向电泳,并对实验步骤进行一系列的调整优化.结果:获得了较为清晰的LST细胞株双向电泳图谱,采用pH 3～10线性IPG胶条分离出1356±43个蛋白质斑点;pH 4～7 IPG胶条两种上样量(250μg和150μg)分别分离出了1285±51和989个蛋白质斑点.结论:通过相关条件的调整优化,成功建立了双向电泳技术,为研究LST特殊性生物学行为相关蛋白质奠定了坚实的基础.     

雷公藤内酯对人胃癌细胞株FGC_(85)杀伤作用的光镜和电镜观察

本文应用核苷掺入技术及电镜观察首次证实雷公藤内酯对人胃癌细胞株 FGC_(85)的杀伤作用。用药早期,细胞数,分裂指数及 DNA,RNA 合成无明显变化,但出现核仁脱粒及核仁破碎等变化;晚期,电镜观察发现细胞以凋落方式死亡,药物主要作用于间期细胞,其杀伤机构的始动环节可能与核酸代谢障碍无关。     

幽门螺杆菌粘附作用的体外研究

置幽门螺杆菌(HP)悬液于含人喉癌上皮细胞(Hep-2)或人胃癌上皮细胞(MKN-28)的培养瓶内,经2h或3.5h培养后观察HP对细胞的粘附情况。结果发现HP能成丛地粘附在上皮细胞表面,少数侵入胞浆内。HP对MKN-28粘附率明显高于对Hep-2细胞者。随菌龄的延长或菌株的变异,HP的粘附作用明显减弱。1%D-甘露糖对HP的粘附性有部分阻抑作用。