慢性粒细胞白血病树突状细胞诱导及其抗肿瘤功能的体外研究

目的 探讨人慢性粒细胞白血病(CGL)来源的树突状细胞(DC)的免疫功能。方法 应用重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)联合重组人白介素(rhIL)-4在体外诱导培养CGL细胞,获得DC。应用流式细胞仪(FACS)检测诱导前、后的细胞表型,观察其诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)的体外抗肿瘤效应。采用酶联免疫吸附试验(ELIS)测定DC培养及DC与外周血单个核细胞(PBMNC)共同培养的上清液中IL-12及干扰素(IFN)-γ的量。结果 联合rhGM-CSF及rhIL-4可诱导CGL细胞分化为DC;CGL-DC体外激活的CTL对CGL细胞具有特异性细胞毒活性;分别从诱导DC培养上清液和DC PBMNC培养的上清液中检测出一定量IL-12及IFN-γ。结论 CGL-DC具有抗原提呈细胞的免疫功能,可望用于CGL的免疫治疗。     

抗坏血酸体外诱导皮质与中脑源神经干细胞向TH阳性细胞定向分化

目的探讨鼠胚脑皮质区与中脑区来源的神经干细胞向酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性细胞分化的差异。方法体外分别培养小鼠胚脑皮质区与中脑区来源的神经干细胞,传代并分组,以抗坏血酸(ascorbicacid,AA)作诱导剂,在有血清条件下分别予以10μmol、100μmol、200μmolAA诱导分化,并设空白组对照,DAPI标记细胞核,分化结果行免疫荧光细胞化学技术鉴定,并镜下计数阳性细胞比例。结果经诱导,中脑神经干细胞在AA作用下各组均可分化出TH阳性细胞,其中比例最高约9%;皮质神经干细胞各组均未见分化出TH阳性细胞。结论在本实验条件下,中脑神经干细胞在AA作用下可以明显分化出TH阳性细胞,而皮质神经干细胞不能,二者体外在向TH阳性细胞分化能力上有差异。     

肝细胞生长因子促进神经干细胞向神经元细胞方向的分化

目的观察肝细胞生长因子(HGF)对神经干细胞向神经元细胞方向分化的作用。方法取孕14~17d的胚胎大鼠,分离其脑组织,以无血清培养基培养,得到神经干细胞后,加入HGF诱导其定向分化,以免疫细胞化学和流式细胞术的方法来鉴定分化得到的神经元细胞及其比例。结果加入HGF和胎牛血清(FBS)的实验组镜下神经元细胞较仅加入胎牛血清的对照组多,流式细胞术计数分化成神经元细胞的比例为55·76%,而对照组阳性率为32·69%;镜下直接计数实验组NSE阳性神经元的比例为(53·34±2·81)%,而对照组仅(30·78±3·13)%(P<0·05)。结论HGF具有促进神经干细胞向神经元细胞方向分化的作用。