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1.
刘敏  孟显峰  宋扬  杨富国 《中国公共卫生》2014,30(10):1285-1288
目的 探讨植酸(IP6)如何通过线粒体途径诱导人肝癌HepG2细胞凋亡,为研究IP6的抗肿瘤作用提供理论依据。方法 应用Hoechst 33258荧光染色法和流式细胞仪Annexin-FITC/PI双染法观察不同浓度IP6作用HepG2细胞后的凋亡情况;流式细胞仪检测IP6作用HepG2细胞后线粒体膜电位(ΔΨm)的变化;RT-PCR法检测HepG2细胞内caspase-3mRNA的表达变化;Western blot法检测IP6作用HepG2细胞后Cyt-c的表达变化。结果 荧光显微镜下可观察到IP6作用后细胞出现明显的凋亡形态;与对照组相比,IP6可升高细胞凋亡率(F=342.15,q=2.9~28.53,P<0.05),且随着浓度增加,凋亡率逐渐升高(P<0.05);IP6可降低线粒体膜电位(F=14802.610,q=101.531~209.237,P<0.05),且随着浓度增加,膜电位逐渐降低(P<0.05);IP6可增加caspase-3 mRNA的表达(F=30.474,q=3.406~9.103,P<0.05),且随着浓度增加,表达逐渐增加(P<0.05);IP6可上调细胞色素C(Cyt-c)的表达(F=87.194,q=5.246~15.218,P<0.05),且随着浓度增加,表达逐渐上调(P<0.05)。结论 IP6可通过降低线粒体膜电位,上调细胞色素C水平,激活caspase-3途径,促进人肝癌HepG2细胞发生凋亡。  相似文献   
2.
《Toxicology in vitro》2014,28(2):319-326
Hexabromocyclododecane (HBCD), a type of brominated flame retardants (BFR), has become ubiquitous organic contaminants in recent years. However, studies on HBCD toxicity and the related molecular mechanisms are so far limited. The objective of the present study was to investigate the effects of oligomeric proanthocyanidins (OPCs) on cytotoxicity induced by HBCD and the underlying molecular mechanisms. HepG2 cells were treated with HBCD and/or OPCs at different concentrations, and cell viability, cell apoptosis, reactive oxygen species (ROS) production, cellular Ca2+ level, mitochondrial membrane potential (ΔΨ), cytochrome C (Cyt-c) release, and nuclear factor-erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) proteins expression were evaluated. Results showed that HBCD induced toxic effects in HepG2 cells in a concentration-dependent manner. HBCD at high concentrations (40 and 60 μM) caused a significant decrease of cell viability and led to elevated cell apoptosis ratio, intracellular Ca2+ level, cytoplasmic Cyt-c level, and ROS production, together with a loss of ΔΨ and mobilization of Nrf2. Pretreatment with OPCs effectively attenuated the cytotoxic effects and ROS production, as well as mitochondrial responses induced by HBCD. Thus, OPCs could alleviate cytotoxicity in HepG2 cells induced by HBCD through regulation on intracellular Ca2+ level and ROS formation in a mitochondrial pathway.  相似文献   
3.
目的观察大鼠脑出血后血肿周围神经元Cyt-c与活化Caspase-3的表达情况及不同中医治法的干预作用。方法用Ⅶ胶原酶脑内立体定位注射诱导大鼠脑出血模型,免疫组化检测血肿周围神经元Cyt-c的释放情况与活化Caspase-3的表达,同时用直尺测量不同时间点血肿的最大直径。结果大鼠脑出血后血肿周围神经元于6h即有Cyt-c释放;1d后阳性细胞表达最多;3d后阳性细胞数减少;5d后阳性细胞继续减少,与假手术组比较差异明显(P<0.01);血肿周围于6h出现Caspase-3阳性表达细胞,1d阳性细胞计数达高峰,3d出现轻度下降,5d明显下降,与假手术组比较差异明显(P<0.01);采取不同中医治法治疗后Cyt-c与Caspase-3均有所下降,与其他各组比较,平肝熄风汤组治疗后下降最明显(P<0.01)。结论脑出血后血肿周围神经元Cyt-c与活化Caspase-3表达明显上调,采取熄风、泻火、祛痰、化瘀以及风火痰瘀同治等治法均能抑制Cyt-c与Caspase-3的表达,阻止神经元的凋亡,以平肝熄风汤组最为明显。  相似文献   
4.
目的探讨细胞色素c(cytochrome c,Cyt-c)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂(second mitochondria-derived activator of caspase,Smac)在胎膜早破中的表达以及与胎膜早破的关系。方法胎膜早破孕妇40例,20例正常孕妇(无妊娠合并症、并发症)作为对照组,均取胎膜破口处组织(2cm×1.5cm×0.5cm),常规石蜡包埋切片,采用免疫组织化学方法测定细胞色素C、Smac在胎膜组织中的表达。结果①两组病例的胎膜组织均见Cyt-c、Smac的表达;③Cyt-c实验组平均光密度值为0.18±0.04,对照组为0.10±0.02,差异有显著性(〈0.05);Smac实验组平均光密度值为0.18±0.03,对照组为0.10±0.03,差异有显著性(〈0.05);③胎膜早破组Cyt-c、Smac的表达呈正相关(r=0.34,〈0.05)。结论胎膜早破中Cyt-c、Smac高表达,推测胎膜早破的发生与细胞凋亡有关。  相似文献   
5.
脑出血后血肿周围神经元Cyt-c与Caspase-3的表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的观察大鼠脑出血后血肿周围神经元线粒体内细胞色素C(Cyt-c)与活化Caspase-3的表达情况,以探讨脑出血后神经元损伤的机制。方法用Ⅶ型胶原酶脑内立体定位注射诱导大鼠脑出血模型,免疫组化检测神经元线粒体内Cyt-C的释放与血肿周围活化Caspase-3的表达情况。结果大鼠脑出血后血肿周围神经元于6 h即有Cyt-C释放,出现胞浆染色的阳性细胞;1 d阳性细胞表达最多;3 d阳性细胞数减少;5 d阳性细胞继续减少,与假手术组比较差异明显(P<0.01);血肿周围于6 h出现Caspase-3阳性表达细胞,1 d阳性细胞计数达高峰,3 d出现轻度下降,5 d明显下降。与假手术组比较差异明显(P<0.01)。结论脑出血后血肿周围神经元Cyt-c与活化Caspase-3表达明显上调,Cyt-c与Caspase-3在脑出血后神经细胞凋亡中起重要调控作用。  相似文献   
6.
目的:探讨糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)联合细胞色素C(Cytochromes c,Cyt-c)和O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)在卵巢癌患者血清中的表达情况及临床意义.方法:对53例卵巢癌患者(卵巢癌组)、40例卵巢良性病变患者(卵巢良性病变组)、50例同期体检健康女性(对照组)采用电化学发光法检测血清CA125水平,ELISA法检测Cyt-c水平,甲基化特异PCR法检测MGMT基因启动子甲基化,流式细胞仪检测细胞线粒体膜势能.结果:卵巢癌患者血清中CA125和Cyt-c表达水平明显高于卵巢良性肿瘤组和健康对照组(P<0.05),CA125表达水平在卵巢良性肿瘤组和健康对照组,差异无统计学意义(P>0.05),Cyt-c差异有统计学意义(P<0.05).MGMT基因启动子在卵巢癌组和卵巢良性肿瘤组中发生甲基化,甲基化率分别为75.3%和21.8%,健康对照组未发生甲基化.结论:联合检测血清CA125、Cyt-c和MGMT基因的表达水平有助于提高早期卵巢癌的诊断效能,对卵巢肿瘤的良恶性鉴别及对预后具有提示作用.  相似文献   
7.
目的:研究五味子乙素(Schisandrin B,Sch B)预防苯并芘(BaP)致人绒毛膜外滋养层细胞(HTR8-SVneo)损伤的作用机制。方法:通过新型四唑化合物(MTS)法观察和测定,最终选取0.5,1,2 μmol/L Sch B分别作用HTR8-SVneo细胞24 h后再给予20 μmol/L Bap染毒处理24 h,MTS检测各组细胞生长情况;JC-1荧光染色法观察各组线粒体膜电位荧光强度变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞内促凋亡蛋白(Bax)、细胞色素C(cytochromec,cyt-c)蛋白浓度;蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组的凋亡蛋白(Caspase-9)。结果:①BaP染毒组OD值为1.187±0.015,0.5,1,2 μmol/L Sch B预保护24 h后的OD值分别为1.483±0.022、1.489±0.048和1.531±0.240,差异有统计学意义(P<0.05)。②BaP染毒组线粒体荧光强度弱,0.5,1,2 μmol/L Sch B预保护24 h后的荧光强度较强,差异有统计学意义(P<0.05)。③BaP染毒组Bax、cyt-c蛋白浓度升高,0.5,1,2 μmol/L Sch B预保护24 h后细胞内Bax、cyt-c蛋白浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。④BaP染毒组细胞内caspase-9蛋白表达升高,0.5,1,2 μmol/L Sch B预保护24 h后细胞内caspase-9蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Sch B可以预防BaP致HTR8-SVneo细胞损伤,其作用机制可能与抗线粒体途径有关。  相似文献   
8.
硫芥对大鼠脾脏淋巴细胞线粒体的损伤作用   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的观察硫芥对大鼠脾脏淋巴细胞线粒体的损伤作用.方法用密度梯度离心法分离大鼠脾淋巴细胞,与硫芥共同进行体外培养.用琼脂糖DNA凝胶电泳观察细胞凋亡的发生;用Western blot观察Cyt-c释放.用MTT法检测线粒体功能状态,以罗丹明123标记的荧光探针检测线粒体跨膜电位.结果 100 μmol/L硫芥作用4 h线粒体功能就有降低,线粒体跨膜电位降低,二者间呈直线相关.硫芥中毒早期即可引起淋巴细胞线粒体细胞色素C释放和细胞凋亡(DNA ladder).结论硫芥可引起大鼠脾淋巴细胞线粒体明显损伤,线粒体参与了硫芥的细胞毒性作用过程.  相似文献   
9.
目的探讨凋亡相关因子Cyt-c、Bax、Bcl-2蛋白在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法及Image-ProPlus图像分析软件检测Cyt-c、Bax、Bcl-2蛋白在15例正常卵巢组织、15例卵巢上皮性良性肿瘤、15例卵巢上皮性交界性肿瘤及30例原发性上皮性卵巢癌中的表达情况。结果 Cyt-c、Bax、Bcl-2在恶性组中的阳性表达显著高于其它三组。Cyt-c蛋白表达与临床分期及淋巴结转移有关,Bax、Bcl-2蛋白表达与临床分期有关。Bax与Bcl-2在上皮性卵巢癌中的表达呈负相关。结论 Cyt-c、Bax、Bcl-2与上皮性卵巢癌的发生有关;Cyt-c、Bcl-2的高表达提示预后不良。  相似文献   
10.
目的:探讨针刺对大鼠脑缺血后神经元调亡的影响,揭示针刺脑保护机理。方法:选择sD大鼠,用线栓法复制右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,并进行头穴透刺,“百会”透“曲鬓”,测定缺血半暗带Cyt—c、Caspase-3表达变化。结果:头穴透刺“百会”透“曲鬓”能下调缺血半暗带脑组织Cyt—c、Caspase-3表达水平。结论:针刺脑保护作用与下调Cyt—c、Caspase-3表达有关。  相似文献   
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