马钱子与甘草配伍前后士的宁和马钱子碱的HPLC分析

目的:研究马钱子配伍甘草对马钱子中主要生物碱的影响。方法:采用高效液相色谱法分别对马钱子配伍甘草前后主要生物碱成分士的宁和马钱子碱的含量进行测定。结果:马钱子配伍甘草后其主要生物碱士的宁和马钱子碱的含量均有不同程度的降低。结论:马钱子配伍甘草可降低毒性,为进一步阐明马钱子合理配伍用药提供了科学实验依据。     

马钱子粉和马钱子微粉溶出度比较

目的:研究马钱子粉和马钱子微粉溶出的差异,为马钱子的科学应用提供理论依据。方法:以马钱子碱和士的宁为指标,用HPLC测定马钱子粉和马钱子微粉在不同时间马钱子碱和士的宁溶出的量,计算累积释放率。结果:用桨法测定体外溶出度时,马钱子微粉中马钱子碱和士的宁累积释放度高于马钱子粉中马钱子碱和士的宁累积释放度。结论:马钱子制成微粉后,能改善其有效成分的溶出。     

马钱子碱对兔软骨细胞增殖的影响

目的：观察马钱子碱对体外培养兔软骨细胞增殖的影响。方法：分离、培养兔的软件细胞,采用四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞增殖。结果：马钱子碱高、中、低剂量组细胞增殖率均高于空白对照组(P＜0．05),一氧化氮(NO)能抑制软骨细胞的增殖,马钱子碱能拮抗NO对软骨细胞增殖的抑制作用。结论：马钱子碱能有效促进软骨细胞增殖。     

反相高效液相色谱法测定马钱子不同炮制品中士的宁与马钱子碱的含量

目的用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法对马钱子生品及炮制品中士的宁和马钱子碱含量进行测定,探讨醋制马钱子炮制原理。方法Hypersil BDS C18(4.6 mm×200 mm,5μm),流动相为乙腈-水-二乙胺(34∶100∶1),检测波长260nm。结果江西改良炮制法炮制品中士的宁和马钱子碱的含量较低。结论该法精确、简便、重现性好。     

HPLC测定伸筋活络丸中士的宁和马钱子碱的含量

伸筋活络丸是一种中药丸剂,主要成分是马钱子（制）、当归、川牛膝等九味中药。其中马钱子中含有剧毒成分士的宁,故检测药物中士的宁的含量是控制其质量的重要环节。关于药物中士的宁的含量测定,虽有文献报道,如文献［１３］等,但有关伸筋活络丸中士的宁含量的测定,尚未见报道。本文用ＨＰＬＣ法测定伸筋活络丸中士的宁的含量,方法简便、迅速、准确,是生产控制和产品质量检验的较好方法。１　实验部分１－１　仪器与试药美国Ｂｅｃｋｍａｎ公司产：３４４Ｍ型高效液相色谱仪（４２１型控制器,１１４型泵,１６５型检测器,４２７…     

HPLC法测定伸筋片中士的宁与马钱子碱的含量

目的采用高效液相色谱法测定伸筋片中士的宁与马钱子碱的含量。方法 C18色谱柱,流动相为乙腈-0.01 mol.L-1庚烷磺酸钠与0.02 mol.L-1磷酸二氢钾等量混合溶液(用10%磷酸调节pH值2.8)(21∶79),检测波长为260 nm。结果士的宁进样量在0.064~0.320μg范围内呈良好的线性关系(r=0.998 8),平均加样回收率99.31%,RSD=0.57%(n=6),马钱子碱进样量在0.056~0.280μg范围内呈良好的线性关系(r=0.997 3),平均加样回收率99.35%,RSD=0.42%(n=6)。结论本方法简便、准确、重复性好,为建立样品含量限度提供依据。     

HPLC测定风湿马钱片中士的宁和马钱子碱含量

报道了ＨＰＬＣ法同时测定风湿马钱片中士的宁和马钱子碱的含量。色谱条件：色谱柱：ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅＴＭ－ｃｙａｎｏ（５μｍ，１５０ｍｍ×４．６ｍｍ）；流动相：由Ａ、Ｂ两泵输送，Ａ泵－甲醇，Ｂ泵－乙酸３０ｍｌ，三乙胺１５ｍｌ加水至２００ｍｌ，两泵输出体积比为：Ａ：Ｂ＝９５：５，ｐＨ６．７；ＵＶ检测器；检测波长：２５４ｎｍ。在２～１０μｇ／ｍｌ浓度范围内，士的宁标准曲线的相关系数ｒ＝０．９９９８，回收率为９９．６％，在１～８μｇ／ｍｌ浓度范围内，马钱子碱标准曲线的相关系数ｒ＝０．９９７６，回收率为９８．６％。     

马钱子碱抗肝细胞癌作用的实验研究

目的 探讨马钱子碱抗肝细胞癌的作用及其机制.方法 体外培养人肝癌SMMC-7721细胞,加入不同浓度的马钱子碱(2.5～400μg/ml),细胞培养72 h,MTT法测定细胞生长抑制率.Western blotting和荧光定量RT-PCR技术分别测定培养24、48、72 h肝癌细胞PCNA、Cyclin D1、FAS基因mRNA和蛋白表达.结果 随着马钱子碱用量逐渐增加,对人肝癌细胞SMMC-7721生长抑制作用增强,马钱子碱用量为320 μg/ml时对肝癌细胞生长抑制率接近100%.马钱子碱作用肝癌细胞24 h与作用48 h相比,Fas蛋白和mRNA表达差异无统计学意义(分别F=2.547,1.582,均P＞0.05),作用72 h时差异有统计学意义(分别F=1.036,1.137,均P＜0.05);PCNA和Cyclin D1的mRNA和蛋白表达各时间点差异无统计学意义(PCNA分别F=3.612,2.174,3.029;Cyclin D1分别F=2.361,2.915,1.976,均P＞0.05).结论 马钱子碱抑制肝癌细胞生长,可能通过肝癌细胞FAS基因和蛋白表达增加,诱导肝癌细胞凋亡发挥抑制作用,而与PCNA和Cyclin D1作用无关.

Abstract：

Objective To study the effect of brucine on the growth of a hepatocellular carcinoma cell line in vitro. Methods Brucine was added into a liver cancer cell line of SMMC-7721 in vitro, at drug concentration of brucine from 2. 5 μg/ml to 400 μg/ml. The inhibition rate of cell growth was measured by MTT technique after the cells were cultured for 72 hours. The protein and mRNA expression of PCNA,cyclin D1 and FAS were respectively assayed with Western blotting and fluorescent quantitation RT-PCR techniques at 24, 48, 72 h. Results The inhibition rate of liver cancer cell was near 100% when the brucine concentration was at 320 μg/ml. The protein and mRNA expression of FAS were of no significant difference at 24 h vs 48 h ( seperately F = 2. 547,1. 582, all P ＞ 0. 05 ), and significant difference existed at 24 h vs 72 h( seperately F = 1. 036, 1. 137, all P ＜ 0. 05 ). The protein and mRNA expression of PCNA,Cyclin D1 were of no significant difference between various time period( seperately PCNA F = 3.612,2. 174,3.029;Cyclin D1 F=2.361,2.915,1.976,all P＞0.05). Conclusions Brucine inhibits the growth of liver cancer cells, by inducing increased apoptosis of the cells probably through FAS overexpression.     

马钱子碱脂质体制备工艺研究

目的优化制备马钱子碱脂质体的处方.方法采用乙醇注入式硫酸铵梯度法制备马钱子碱脂质体;并以马钱子碱脂质体的包封率为主要评价指标,采用正交设计法优化马钱子碱脂质体的配方.结果获得了马钱子碱脂质体的工艺处方:卵磷脂与胆固醇的重量比为6∶1,马钱子碱和卵磷脂的重量比为1∶30,当硫酸铵浓度达到0.15 mol·L-1,卵磷脂的重量与硫酸铵溶液的体积比为12∶1.按该处方工艺制备3批马钱子碱脂质体,包封率平均值为92.17%.结论按照优化处方,可制得包封率稳定,粒径较小且分布较窄的马钱子碱脂质体.     

砂烫法与烘烤法对马钱子中抗炎镇痛成分影响

目的：建立马钱子士的宁和马钱子碱的含量测定方法,评价砂烫法与烘烤法对二者含量的影响。方法：分别制备砂烫马钱子和烘烤马钱子,采用高效液相色谱法测定士的宁和马钱子碱含量,以C18柱为固定相,乙腈（A）：水-乙酸-三L,乙胺（230：2．4：0．4）（B）=11：89为流动相,检测波长为254nm。结果：以200~C烘烤马钱子30分钟,士的宁和马钱子含量水平与砂烫马钱子水平相当。结论：砂烫马钱予炮制过程温度、时间对生物碱含量影响较大,而烘烤马钱子工艺可控性更强,用来控制马钱子质量优势显著。