Nestin-LacZ转基因小鼠脊髓损伤动物模型的建立及评价

[目的]建立标准的Nestin-LacZ转基因小鼠脊髓损伤动物模型及评价体系。[方法]采用NestinLac Z转基因小鼠18只,随机分为三组,实验组2个,对照组1个。2个实验组均采用自行研制的啮齿类动物脊髓损伤模型打击器,质量为10 g的打击棒,A实验组用接触直径为2.0 mm的打击棒杆头压迫,压迫时间为3 min(A组,6例);B实验组按照实验设定的高度10.0 mm实施打击(B组,6例);对照组仅行椎板切除,不打击(C组,6例)。分别于术前,术后第1、2、3、4、5、6周进行转基因小鼠BBB运动评分,取出脊髓组织后,行脊髓组织HE染色。[结果]Nestin-LacZ转基因小鼠不同的脊髓损伤模型在各个时间点上BBB评分差异有统计学意义(P0.05),A组在脊髓损伤造模术后2周,后肢功能开始恢复,而B组至术后6周均无后肢功能恢复,对照组无功能障碍。[结论]啮齿类动物脊髓损伤模型打击器采用持续慢性压迫脊髓可成功建立Nestin-Lac Z转基因小鼠稳定、理想的急性脊髓损伤模型。     

鼠巨细胞病毒感染C57BL/6小鼠急性肝炎动物模型的建立与鉴定

目的：建立鼠巨细胞病毒（MCMV）感染C57BL/6小鼠急性肝炎模型并对其感染特点进行分析及鉴定。方法：将24 只C57BL/6小鼠随机分为阴性对照组（n =12）及病毒感染组（n =12），病毒感染组腹腔注射1.0×106 PFU（200 μL）MCMV悬液，阴性对照组注射等体积小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）悬液。于感染后第3天和第7天取外周血分离血清检测谷丙转氨酶（ALT）及谷草转氨酶（AST）。同时进行肝组织病毒分离、组织病理学及MCMV IE和M55基因、细胞因子白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的检测。结果：病毒感染组肝组织匀浆病毒分离均为阳性，肝炎发生率为100%。在感染后第3天即发生肝炎病理改变，病毒感染组血清ALT及AST较阴性对照组明显升高（P ＜0.01）；病毒感染组肝脏HE染色第3天可见局灶性炎性细胞浸润及肝脏点灶状坏死，持续至第7天，Ishak评分较阴性对照组明显升高（P ＜0.01）；在感染后第3天病毒感染组肝组织内可检测到MCMV IE及M55基因，且在感染后第7天仍可测得IE基因；感染后第3天及第7天病毒感染组炎性细胞因子IL-6、TNF-α及IL-1β mRNA表达水平明显升高（P ＜0.05）。 结论：成功建立MCMV感染C57BL/6小鼠急性动物肝炎模型，其感染表现主要集中在急性感染前期。     

类风湿关节炎临床实验室血清标志物研究进展

类风湿关节炎(RA)是一种以关节滑膜炎为主要特征,临床表现以慢性多发性关节炎为主的最终可导致关节畸形的系统性自身免疫性疾病。类分湿因子及抗环瓜氨酸肽抗体在新的RA分类标准中被认为是鉴定RA时较好的血清学指标,而对于诊断RA,临床仍需特异性及敏感性更高的血清标志物。该文对近年来出现的各种RA诊断指标进行总结比对。     

基于美篇APP的理论与视频教学形式革新在基础护理操作教学中的应用及评价

[目的]探讨基于美篇应用程序(APP)的理论与视频教学形式革新在基础护理操作教学中的应用及评价。[方法]选取2017年3月在医院采用传统带教方法参加基础操作考核的护士作为对照组,选取2018年3月使用美篇APP教学方法后参加基础护理操作的护士作为观察组,比较两组的教学效果及满意度。[结果]观察组护士理论、操作成绩高于对照组(P0.05);观察组96.51%的教员护士认为美篇教学法有助于提高评判性思维能力,观察组96.51%的教员护士认为教学方法合适,观察组95.34%的教员护士认为操作技能掌握牢固,观察组中教员护士的满意度为100%。[结论]基于美篇APP的理论与视频教学形式革新取得了良好的效果。     

受控型蜕皮激素诱导表达截短型hIGF-Ⅰ转基因载体的构建及其在细胞水平上的有效性检测

目的：构建一种可以在哺乳动物细胞中蜕皮激素诱导表达截短型hIGF-Ⅰ的受控型转基因载体，为制备受控型蜕皮激素诱导表达截短型MGF-Ⅰ的转基因小鼠奠定基础。方法：利用分子克隆技术构建受控型蜕皮激素诱导表达截短型hIGF-Ⅰ的转基因载体；将其电转至AM1菌中，利用其中的Cre重组酶将载体上两个同向LoxP序更锚定的新霉素（neomycin）基因删除，解除其对蜕皮激素诱导表达系统的阻断作用，利用PCR、酶切和测序鉴定删除情况；将重组后的载体转染至COS7细胞中进行瞬间表达，蜕皮激素诱导后回收培养上清和细胞裂解物进行Western印迹分析，检测hIGF-Ⅰ的表达情况。结果和结论：成功构建大小为13．6kb的转基因载体pOE-IGF-Ⅰ；转化至AM1中后，PCR、酶切和测序的结果都证明其中的Cre酶能够将载体上neomycin基因删除；重组后的载体转染至COS7细胞中进行诱导表达，Western印迹实验证明截短型MGF-Ⅰ能够在COS7细胞中顺利表达。上述结果证明该蜕皮激素诱导表达截短型hIGF-Ⅰ的受控型转基因载体能够用于转基因小鼠的制备。     

锁骨下静脉置管异位6例分析及护理对策

ICU经常选择锁骨下静脉作为快速补液，金胃肠外营养（TPN）、CVP监测的主要途径，锁骨下静脉穿刺成功率高、并发症少，易于固定、不易污染税出或折断，床上发颈部活动影响小．但在临床应用中也会碰到各种问题及并发症，其中导管异位是常见问题之一．导管异位使导管并发症的风险发生率增加、并在临床观察中造成某些假象，现将我院综合ICU近两年来发生的锁骨下静脉穿刺置管异位6例分析报告如下     

膨化麦冬对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的:研究麦冬膨化处理后的药理作用变化。方法:将麦冬按常规炮制方法和膨化处理,分别制成麦冬常规煎剂和膨化品浸剂。用环磷酰胺造免疫抑制小鼠模型,分别用常规煎剂和膨化品浸剂灌胃,检测实验动物溶血素含量,WBC数目,巨噬细胞吞噬功能。结果:麦冬常规煎剂和膨化品浸剂均能升高环磷酰胺所致免抑制小鼠血清溶血素含量和WBC数目(P<0.01),提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能(P<0.01),但两组之间在统计学上无显著性差异(P>0.01)。结论:麦冬膨化后对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠免疫作用没有影响。     

体外转染SV40的鼠内皮细胞生长特性的研究

体外培养的内皮细胞具有血清和生长因子的依赖性，且具有异质性，用其进行体外研究血管生成结果难以分析。本实验拟用SV40转染鼠内皮细胞，为体外研究血管生成提供稳定内皮细胞株。