多序岩黄芪化学成分研究（Ⅳ）

目的研究多序岩黄芪(Hedysarum polybotrysHand.-M azz.)的化学成分。方法用柱色谱分离,用理化性质及波谱方法鉴定结构。结果从多序岩黄芪中分离鉴定了3个化合物:(1)白桦脂酸,(2)二十六碳酸,(3)蔗糖。结论化合物1和2为首次从该植物中分离得到。     

含灯盏花中成药DNA提取及其分子鉴定

目的:优选适用于含灯盏花中成药的DNA提取方法和聚合酶链式反应(PCR)扩增引物,并通过测序和系统发育分析实现对其原料灯盏花的分子鉴定。方法:采用4种十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)改良方法对3种含灯盏花的中成药进行DNA提取,测定DNA的纯度和浓度。采用内转录间隔区(ITS)、matK、psbA-trnH、rbcL位点通用引物对提取的中成药DNA进行PCR扩增,并对PCR扩增最佳位点进行测序,通过构建系统发育树进行分子鉴定。结果:4种CTAB改良方法均能获得含灯盏花中成药DNA,其中CTAB改良方法一提取的DNA质量浓度显著高于其他改良方法;PCR扩增中以matK位点2对引物(matKXF/matK5R或matK3F/matK1R)最佳,可通过1次PCR成功获得具有单一条带且浓度较高的PCR产物,序列与灯盏花对照药材同源性为100%,系统发育树显示可与同属其他植物区分。结论:通过CTAB改良方法一可以有效提取含灯盏花中成药样品的DNA,采用matK位点引物matKXF/matK5R或matK3F/matK1R进行1次PCR扩增并对产物进行测序,通过序列比对可完成其原料灯盏花的鉴定。     

灰毡毛忍冬的生药学研究

目的：为灰毡毛忍冬的鉴别，开发利用提供依据。方法：采用来源、性状、显微、理化对其鉴别。结果：首次系统阐明了灰毡毛忍冬的生药学理论。结论：为制订灰毡毛忍冬质量标准提供依据。     

窄叶鲜卑花的化学成分

目的：研究窄叶鲜卑花（Sibiraea angustata）的化学成分。方法：采用柱色谱进行分离纯化．通过理化方法和光谱分析鉴定化合物结构。结果：从窄叶鲜卑花中分离得到6个化合物，经鉴定为十八酸（octadecanoic acid）（Ⅰ），lanosta-8，24-dien-3-acetyloxy-26-oic acid（Ⅱ），胡萝卜甾醇（daucosteml）（Ⅲ），异阿魏酸（isoferulic acid）（Ⅳ），咖啡酸（caffeic acid）（Ⅴ），咖啡酸山梨醇酯（caffeic acid glucitd ester）（Ⅵ）。结论：以上化合物均为从窄叶鲜卑花中首次分得，其中化合物Ⅵ为新化合物。     

氮、磷和钾肥对灯盏花生长和有效成分积累的影响

目的 探讨N、P和K肥在植物生物量和黄酮类次生代谢产物积累中的影响作用,揭示药用植物生物量积累与次生代谢有效成分积累的关系,为建立合理的施用技术提供理论基础.方法 以尿素、磷酸和氯化钾3种N、P和K肥按正交设计组成3因素3水平的9个处理组合.用盆栽法比较灯盏花开花植株的生物量、总咖啡酸酯和灯盏乙素的量.结果 生物量适宜高N、P和K施肥量组合,有效成分量则偏向低施肥量组合.3肥素中,N作用最强,对生物量积累具有显著的促进作用,对有效成分积累有显著的抑制作用,对有效成分产量的作用不显著.P对有效成分量的作用高于K,但对生物量的影响低于K.K对有效成分产量的作用最大.结论 N、P和K施肥提高灯盏花药材生物产量时将会导致黄酮等次生代谢有效成分量下降,但可提高其产量.     

重楼提取物抗骨肉瘤作用及机制研究

目的探讨重楼提取物(PPEE)抗骨肉瘤作用及其机制。方法不同质量浓度的PPEE处理骨肉瘤细胞,采用MTT法、Hoechst 33342染色、流式细胞术、Matrigel培养、免疫印迹法分别检测细胞增殖抑制率、细胞凋亡、细胞周期、血管生成拟态(VM)形成及相关蛋白表达情况。裸鼠移植瘤模型观察PPEE的体内抑瘤效果。结果 PPEE对骨肉瘤细胞半数抑制浓度(IC50)为10～60μg/m L,对成骨细胞增殖影响较小。PPEE可浓度依赖性地将骨肉瘤143B细胞阻滞在G2/M期,上调细胞周期相关蛋白p-CDK1、p-Cdc25C、p-Chk2表达,下调cyclinB1表达;促进细胞凋亡,上调cleavedCaspase-3、8、9和PARP表达,上调Bax/Bcl-2;抑制细胞体外VM形成,下调FAK、Mig-7、MMP-2和MMP-9表达。体内实验显示PPEE能明显抑制骨肉瘤生长和体内VM形成,延长荷瘤裸鼠生存期。结论 PPEE在体内外均具有良好的抗骨肉瘤活性,其作用机制可能与诱导骨肉瘤细胞凋亡、阻滞细胞周期及破坏骨肉瘤VM形成有关。     

不同品种灰毡毛忍冬ACS3基因克隆、表达及生物信息学分析

目的分别克隆灰毡毛忍冬野生型与湘蕾型ACS3基因,并进行生物信息学和表达模式分析。方法筛选灰毡毛忍冬转录组数据库中与ACS蛋白同源性较高的Unigene序列,设计引物,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及RACE技术对该Unigene进行全长克隆;用生物信息学软件分析蛋白的理化性质、结构域和同源性等特性;借助qRT-PCR检测1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶(ACS3)基因在不同品种、不同花期灰毡毛忍冬中表达模式。结果从灰毡毛忍冬野生品种及湘蕾品种中分别克隆得Lm-ACS3(GenBank:MH724196)及Lm-XL-ACS3(GenBank:MH724197),开放阅读框长度均为1452bp,编码483个氨基酸,包含保守的Aminotran_1_2结构域,与其他植物的ACC合酶具较高相似度;qRT-PCR结果显示,野生型ACS3基因不同花期间表达差异显著,从花期3开始呈整体明显上升趋势,湘蕾型中花期间表达差异相对较小。结论分别克隆得到灰毡毛忍冬野生型和湘蕾型ACS3基因,该基因在2品种中具不同表达模式;推测ACS3基因或为导致灰毡毛忍冬不同品种间差异表型的可能功能基因之一,为进一步验证该基因在调控蕾期长短及花表型的生物学功能提供实验基础。     

灰毡毛忍冬花蕾中的化学成分

目的：对灰毡毛忍冬花蕾的化学成分进行研究，方法：应用溶剂萃取及枉层析方法进行化学成分分离、纯化，并利用各种光谱技术分析鉴定结构、结果：从灰毡毛忍冬花蕾中分离得到11个化合物，其中3个绿原酸类成分、4个黄酮类成分、4个其他成分，分别为：1—O-咖啡酰基奎宁酸（Ⅰ），4-O-咖啡酰基奎宁酸（Ⅱ），5-O-咖啡酰基奎宁酸丁酯（Ⅲ），槲皮素（Ⅳ），苜蓿素-7-O—β-D-葡萄糖苷（Ⅴ），槲皮素-3-O—β-D-葡萄糖苷（Ⅵ），木犀草素-7-O—β-D-半乳糖苷（Ⅶ），肌醇（Ⅷ），Ⅶ-谷甾醇（Ⅸ），正十九烷醇（Ⅹ），葡萄糖（Ⅺ）．结论：化合物Ⅰ、Ⅱ为首次从忍冬属植物中分离得到，化合物Ⅲ～Ⅺ为首次从该种植物中分离得到．     

灯盏花栽培技术和原药配伍相关专利信息分析

通过国家知识产权局专利数据库,对我国中药灯盏花的栽培技术及原药配伍方面的专利申请情况进行了检索,并对其有效数据进行了全面分析,包括申请量发展趋势、处理技术分类、申请人IPC分类及法律状态等。     

基于红外光谱法的云南重楼及其近缘种的亲缘关系研究

目的傅里叶变换红外光谱(fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)结合化学计量学方法分析云南重楼Paris polyphylla var.yunnanensis及其近缘种的亲缘关系,为重楼属药用植物资源的开发利用提供理论依据。方法采集云南重楼、白花重楼Paris polyphylla var.alba、毛重楼Paris mairei、南重楼Paris vietnamensis、五指莲Paris axialis var.axialis共50份样品的红外光谱信息,对光谱数据进行自动基线校正、自动平滑、纵坐标归一化、多元散射校正、二阶求导等预处理,采用主成分分析(principal component analysis,PCA)、偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)及系统聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)分析光谱数据。结果原始红外光谱中,1 653、1 156、1 082、1 021、925、851、759、572、524 cm~(-1)等为重楼属植物的共有峰,主要归属为黄酮、淀粉和糖苷类成分的吸收峰;毛重楼和五指莲分别在1 535和1 369 cm~(-1)附近有特征吸收峰,可与另外3种重楼属植物相区分。以全波段光谱数据进行PLS-DA和PCA,PLS-DA对重楼属植物分类效果优于PCA,能够准确区分5种野生重楼属植物。系统聚类分析(HCA)及向量夹角余弦相关性分析能够反映5个重楼属植物的亲缘关系,云南重楼与白花重楼和南重楼的亲缘关系较近,与毛重楼和五指莲的关系较远。结论 FTIR结合化学计量学方法,能够快速区分不同种类重楼属植物,明确云南重楼及其近缘种之间的亲缘关系,为重楼属植物亲缘关系研究提供一种快速、有效的方法,同时为重楼种质资源开发和利用提供理论基础。