樟树化学型形成关键萜类合酶的系统鉴定

樟树Cinnamomum camphora为我国重要的经济树种。根据叶片挥发油中主要成分的种类和含量,樟树通常被分为龙脑型、樟脑型、芳樟醇型、桉叶油型和橙花叔醇型5种化学型,萜类合酶(terpene synthase, TPS)是形成这些化合物的关键酶。虽然多个关键酶基因已得到鉴定,但最具经济价值的(+)-龙脑的生物合成途径未见报道。该研究通过对4种化学型叶片的转录组分析,克隆了9个萜类合酶基因CcTPS1～CcTPS9。经过大肠杆菌诱导表达重组蛋白后分别以香叶基焦磷酸(GPP)和法尼基焦磷酸(FPP)为底物进行酶促反应,结果CcTPS1和CcTPS9均可催化GPP生成冰片基焦磷酸,并在磷酸水解酶的作用下得到(+)-龙脑,产物占比分别为0.4%、89.3%。CcTPS3和CcTPS6均可催化GPP生成单一产物芳樟醇,CcTPS6还可与FPP反应生成橙花叔醇。CcTPS8与GPP反应生成1,8-桉叶油(30.71%)。9个萜类合酶共计产生9个单萜和6个倍半萜类化合物。该研究首次确定樟树中负责(+)-龙脑生物合成的关键酶基因,为进一步阐明化学型形成的分子机制及利用生物工程技术培育高产龙脑新...     

龙脑消痔露的制备工艺及体外抑菌实验研究

目的：制备龙脑消痔露及观察其体外抑菌作用。方法：按标准工艺制取龙脑消痔露。采用平板打洞法及试管法观察其体外抑菌作用。结果：龙脑消痔露制剂成功。其对标准菌株和临床分离菌株金黄色葡萄球菌与大肠杆菌均有一定的抑菌作用。结论：龙脑消痔露制备工艺简便易行；有一定的体外抑菌作用；该作用为该药治疗痔疮肿痛提供了药理依据。     

GC测定痛瘀消散贴中冰片和樟脑的含量

目的:采用GC测定痛瘀消散贴中冰片和樟脑的含量.方法:石英毛细管色谱柱(30m×0.28mm,0.32μm,聚甲基硅油,HP-5),FID检测器,检测温度250℃,进样口温度200℃,分流比10.0:1.结果:冰片以龙脑计,龙脑在0.0897～0.5384μg范围内,龙脑与内标物的峰面积比值呈良好线性关系(r=0.9999,n=6),平均回收率为96.47%;樟脑在0.0950～0.5702μg范围内,樟脑与内标物的峰面积比值呈良好线性关系(r=0.9999,n=6),平均回收率为1 00.02%.结论:该方法简单、快速、准确,可用于该制剂的质量控制.     

气相色谱法测定马应龙麝香痔疮膏中龙脑的含量

目的:建立马应龙麝香痔疮膏中龙脑的含量测定方法.方法:气相色谱法,2 m×3 mm不锈钢柱,15%丁二酸二乙二醇聚酯(DEGS)Chromsorb W-AW(80～100目),柱温105℃,进样口温度250℃,FD检测器,载气为氮气.结果:平均回收率为99.92%(n=6),RSD为0.65%.结论:本法简便高效,结果准确可靠,可用于本品的质量控制.     

羌活祛风通络贴的稳定性考察与葛根素和龙脑的检测方法研究

目的 考察羌活祛风通络贴的稳定性。方法 通过测定葛根素和龙脑的含量，测定贴剂中的粘附性，对3批样品在加速试验（40℃、75±5％RH）6个月中的变化进行了跟踪监测,检测贴剂内在质量的变化。葛根素的测定采用HPLC的方法，龙脑的测定采用气相色谱法。结果 葛根素测定方法的线性方程为Y=2.1958×10-5X-0.3741，r=0.9999，在20～100ng范围内具有良好的线性关系，回收率98.31％，RSD 1.19％。龙脑测定方法的线性方程为Y=4.058X＋0.1726，r=0.9999粘附性，在130～720ng范围内具有良好的线性关系,回收率为98.13％。葛根素的含量下降5％，龙脑含量下降15％，粘附性良好。结论 贴剂样品在包装完整的情况下可放置2年。     

艾纳香石油醚部位化学成分的研究

目的:对黔产艾纳香石油醚部位的化学成分进行研究.方法:采用硅胶、凝胶等柱色谱技术对艾纳香石油醚部位的化学成分进行分离、纯化,再结合核磁共振技术鉴定其化学结构.结果:分离并鉴定了5个化合物,分别为花椒油素(1)、豆甾醇(2)、三十一烷(3)、龙脑(4)、4,22-二烯-3-酮豆甾烷(5).结论:5个化合物均首次从艾纳香石油醚部位分离得到.     

气相色谱法同时检测附桂风湿膏中薄荷脑、冰片和水杨酸甲酯的含量

目的建立附桂风湿膏中薄荷脑、冰片、水杨酸甲酯的GC检测方法。方法采用毛细管气相色谱法,色谱柱为EC-WAX毛细管柱(30 m×0.53 mm×0.15μm);柱温(程序升温):初始温度为80℃,保持5 min,10℃·min-1,升至180℃后保持10 min,进样口温度为180℃,检测器温度为230℃;载气为氮气,分流比为10:1,流量:7.5 mL·min-1。结果本法线性关系良好,各精密度RSD均<1.2%,薄荷脑、冰片、水杨酸甲酯的平均加样回收率分别为99.1%、98.8%、101.6%,RSD分别为2.2%、2.9%、2.1%。结论该方法操作简便快速,灵敏度高,准确度好,可作为附桂风湿膏质量控制方法。