干细胞因子与FLT3配基协同促巨核细胞生成因子对脐血单个核细胞的扩增及造血重建功能的影响

脐血移植后常常伴随着造血延迟和感染等危险因素的增加。而细胞因子介导的体外扩增有望能解决这一问题，但体外扩增时要想能达到有效的扩增脐血造血细胞，又能使扩增后的脐血造血细胞维持或增加植入潜能，和扩增培养起始细胞的选择及细胞因子的组合密切相关。本实验探讨了不同细胞因子组合对脐血单个核细胞扩增的效果并利用非肥胖性糖尿病／重症联合免疫缺陷（nonobese diabetic-severe combined immunodeficient，NOD／SCID）小鼠评估扩增后的脐血细胞的植入和造血重建功能。     

维拉帕米增强猴肾上皮细胞低密度脂蛋白受体活性

本文用放射配体法观察了维拉帕米(Ver)对恒河猴肾上皮细胞LDL受体活性的影响,发现Ver以浓度和时间依赖的方式明显增强受体介导的结合和内移过程,对降解的影响不显著。Ver作用浓度为44 mmol·L~(-1)效应最明显。     

富含CpG的脱氧核苷酸片段对破骨细胞形成的调节作用

目的:研究富含CpG的脱氧核苷酸片段(ODN)调节破骨细胞(OC)的形成. 方法:分离小白鼠骨髓单核细胞,单纯骨髓单核细胞或骨髓单核细胞分别与30 μg/L-CSF;30 μg/L-CSF, 20 μg/L RANKL;30 μg/L M-CSF以及不同浓度ODN共同培养1～4 d. 结果:ODN可以诱导骨髓单核细胞分化为TRAP阳性的破骨细胞,这些细胞表达降钙素受体. Northern blot显示:随着ODN浓度由5 nmol/L增加至100 nmol/L,细胞TNF-α mRNA表达量也随之增加;骨髓单核细胞与30 μg/L M-CSF,20 nmol/L ODN-1826共同培养1,2,3和4 d,同样显示随着时间延长,细胞TNF-α表达也逐渐增加. 结论:ODN可以刺激破骨细胞的转化,为临床骨疾病的治疗开辟了一个新途径.     

OPG/RANK/RANKL系统在溶骨性骨肿瘤中的应用

溶骨性骨肿瘤是骨科的常见病,有转移、复发、恶性变、治疗棘手等特点,一直是大家关注的焦点、研究的重点和难点。近几年来,研究发现护骨素(O steoprotegerin,OPG)细胞核因子κB受体活化因子(receptor activator of NFκ-B,RANK)/细胞核因子κB受体活化因子配基(receptor activa     

＋Gz对鼠肺肾上腺素能受体和心血肾素系统的影响

笔者对大鼠在 Gz负荷下肺细胞膜肾上隙素能α、β受体和心血肾素和血管紧张素作了观察，采用放射性配基结合法(RBA)检测鼠肺α、β受体及放免法测心血肾素和血管紧张素。11只大鼠承受 Gz负荷( Gz组)，10只大鼠承受 Gz前预防性使用心得安(心得安加 Gx组)；10只为对照组。结果显示， Gz组鼠肺α受体增多，卢受体减少，心血肾素和血管紧强素上升；心得安加 Gx组则α与β卢受体变化不大，接近对照组，心血肾素和血管紧张素水平下降，说明心得安对 Gx负荷有一定保护作用。     

人肝细胞生成素受体的确定及特性

目的　研究人重组肝细胞生成素 (rhHPO)特异性刺激肝细胞增殖的信号转导是否通过特异性受体结合介导。方法　通过受体结合和特异性竞争抑制实验及Scatchard分析原代培养大鼠肝细胞、人胎肝细胞和肝癌细胞的特性。结果　原代培养大鼠肝细胞、人胎肝细胞和肝癌细胞存在HPO受体 ,受体数量分别为 10 0 0 0个 /细胞、2 0 0 0 0个 /细胞和 5 5 0 0 0个 /细胞 ,平衡解离常数(Kd)分别为 2、1.4及 0 .7pmol,HPO与受体结合的复合物分子量约为 90× 10 3 ,推算出HPO与该受体结合具有饱合性和特异性 ,此结合不能被EGF、TGF α和胰岛素所竞争抑制。通过交联反应在SDS PAGE电泳上显示此受体分子量约 75× 10 3 。结论　HPO促肝细胞增殖作用是通过肝细胞表面这种特异性膜受体介导的。     

知母皂甙元对大鼠脑内总M及M1受体的影响

目的观察知母皂甙元对青年和老年大鼠脑M及M1受体的不同影响.方法以对M1受体有相对选择性的哌仑西平为非标记竞争剂,3H-QNB为非选择性标记配基,建立M和M1受体的放射配基竞争结合分析方法,观察知母皂甙元对青年大鼠和老年大鼠脑M和M1受体的影响.结果与青年大鼠相比,老年大鼠脑M及M1受体减少,知母皂甙元能上调M和M1受体;对正常青年大鼠脑M及M1受体的密度,知母皂甙元没有影响.结论知母皂甙元对下降的M及M1受体密度有明显的上调作用,但不超过正常值,对正常水平的M及M1受体密度,知母皂甙元不会造成密度过高.     

炎症因子白介素-6对骨细胞表达RANKL的影响

目的 :通过研究炎症因子白介素-6对骨细胞表达核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)的影响,为更好地理解炎症因子在骨细胞参与骨重塑中的作用,提供理论基础。方法:体外培养MLO-Y4细胞系细胞,并应用不同浓度的人工合成白介素-6(IL-6)和白介素-6受体(IL-6R),共同作用刺激骨细胞24 h后,采用实时荧光定量PCR、免疫印迹试验、免疫荧光等方法,检测RANKL以及酪氨酸激酶2(JAK2)的磷酸化蛋白的表达变化。结果:应用不同浓度人工合成的IL-6和IL-6R,共同作用刺激骨细胞后,RANKL的表达水平随着IL-6的浓度增加而增加,并且IL-6通路中的JAK2蛋白磷酸化亦增加,提示IL-6及其受体可以促进骨细胞表达RANKL,并且与JAK2的活化密切相关。结论 :炎症因子IL-6可以通过增加JAK2蛋白的磷酸化,来促进骨细胞表达RANKL。     

HPLC法测定蒡芩慢咽滴丸中酯蟾毒配基及华蟾酥毒基的含量

目的:建立用HPLC测定蒡芩慢咽滴丸中蟾酥内酯含量的方法。方法:采用十八烷基键合硅胶色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-0.5%磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH值为3.2)(32∶68)为流动相,检测波长为296nm,柱温40℃。结果:酯蟾毒配基及华蟾酥毒基的线性范围分别为0.2～1.0μg(r=0.9997)及0.224～1.12μg(r=0.9996),平均回收率(n=6)分别为99.91%(RSD=0.7960%)和99.84%(RSD=1.0023%)。结论:该方法简单可靠。