BaP通过AhR和Nrf2信号通路对HepG2细胞中GSTP1的影响

摘要：目的：探究苯并芘（benzo[a]pyrene,BaP）通过芳香烃受体（aryl hydrocarbon receptor,AhR）和核因子E2相关因子（subcellular localization of nuclear factor?E2-related factor 2,Nrf2）信号通路对HepG2细胞中谷胱甘肽-S-转移酶P1（glutathione S-transferase P1,GSTP1）的影响。方法：将体外培养HepG2细胞分为Control组、BaP（10μmol/L）组、BaP（10μmol/L）+AhR抑制剂（1μmol/L）组和BaP（10μmol/L）+Nrf2抑制剂（1μmol/L）组,BaP组给予10μmol/LBaP培养24小时,抑制剂组给予1μmol/L抑制剂半小时后,加入10μmol/L BaP培养24小时,Western Blot和qPCR实验方法检测各组AhR、Nrf2、细胞色素P450s（cytochrome P450s,CYPs）、血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）及GSTP1基因和蛋白的表达。结果：与Control组相比,BaP组中AhR、Nrf2、GSTP1、CYP1A1及HO-1的mRNA和蛋白表达均升高（P<0.05）;与BaP组相比,BaP+AhR抑制剂组中AhR、GSTP1和CYP1A1的mRNA和蛋白表达均降低（P<0.05）,BaP+Nrf2抑制剂组中Nrf2、GSTP1和HO-1的表达均降低（P<0.05）;与BaP+AhR抑制剂组相比,BaP+Nrf2抑制剂组GSTP1 mRNA和蛋白的表达降低（P<0.05）。结论：BaP通过AhR和Nrf2两条信号通路增加GSTP1的表达,以Nrf2信号通路为主导影响GSTP1的表达。     

抑制性消减杂交技术检测反式二羟环氧苯并芘转化细胞与正常细胞基因表达差异

目的　筛选 7,8 二羟 9,10 环氧苯并芘 (BPDE)转化细胞与正常细胞的基因表达差异。方法　以BPDE转化支气管上皮细胞 (16HBE)细胞为检测子 (tester) ,正常 16HBE细胞为驱动子 (driver) ,应用抑制性消减杂交方法构建cDNA消减文库 ,经 2次消减杂交和 2次PCR后 ,将巢式PCR产物插入TA载体克隆 ,随机挑选克隆进行鉴定和测序 ,并用斑点杂交法验证其同源性 ,将所得序列进行GenBank的BLAST分析。结果　发现了 7个在BPDE转化细胞中高表达的基因 ,为翻译延长因子 1α1、线粒体基因、溶解物载体家族 2 5、EphA2、酪氨酸 3 加单氧酶 色氨酸 - 5 -加单氧酶活化蛋白、乳酸脱氢酶A、TRIM2 8等 ,尚有一条在GenBank的已知基因中找不到对应序列 ,在EST序列中找到全长对应序列。结论　发现的高表达基因可能在BPDE的致癌机制中起作用 ,另外 ,可能有未知基因与BPDE的恶性转化作用有关。     

层粘连蛋白受体基因表达谱分析

目的 探讨层粘连蛋白受体（67LR1）基因相关的一组基因表达变化，为反式二羟环氧苯并芘致癌机制的研究提供依据。方法 构建67LR1转基因表达载体，转染人支气管上皮细胞（16HBE），获得转基因67LR1的瞬时表达的细胞株。用半定量RT-PCR方法分析转基因表达产物，应用含8064个基因点的微芯公司基因表达谱芯片CSC-GE-80与双荧光标记样品与芯片杂交和扫描、图像数据分析等一系列处理进行表达谱分析。结果 成功构建出瞬时表达67LR1的细胞株。基因表达谱分析，2组相比发生了显著性表达变化的基因有295个，其中表现为上调的基因有145个，下调表达的基因有150个。在发生了显著性表达改变的基因中，比较有明显功能分类特征的包括与信号转导相关的基因，与肿瘤相关的基因，与免疫反应相关的基因以及与蛋白质合成系统相关的基因等。结论 67LR1基因功能涉及到信号转导、肿瘤相关基因等方面，相关基因的表达变化具有复杂性。     

烧烤食物怎样吃才不致癌?

烧烤食物容易致癌，尤其是烤肉中含有两类致癌物质，一类是杂环胺。普遍存在于烧烤的鸡肉、鱼肉和其他肉类食品中，尤其在动物肝脏中含量最高，简单的加热就能产生此类物质；另一类是多环芳烃，在烤肉中产生的苯并芘、二苯丙蒽是其中最常见的化学致癌物。有研究表明。成年人每年从食物中摄人苯并芘类的有害物质达1～2毫克。     

牛磺酸对苯并芘体外诱导血小板聚集活化功能的影响

取健康志愿者外周静脉血并分离血小板,采用随机分组的方式将血小板分成6组。通过检测血小板最大聚集率、膜表面CD62P及PAC-1阳性表达率,探讨不同浓度的牛磺酸(Tau)对苯并芘(BAP)体外诱导血小板聚集活化功能的影响。结果表明,血小板最大聚集率在二磷酸腺苷( ADP)和胶原诱导下各浓度BAP-Tau组与溶剂对照组之间比较差异均有统计学意义(P<0．01)。血小板膜表面CD62P、PAC-1表达率BAP-Tau高浓度组与溶剂对照组比较差异有统计学意义(P<0．01)。不同浓度的Tau均可拮抗BAP致血小板功能损伤的作用,且呈浓度梯度性变化。     

4种小鼠腹主动脉瘤模型的比较

目的探讨和比较4种腹主动脉瘤小鼠模型特征,为腹主动脉瘤发病机制以及药物开发提供研究基础。方法 4种动物模型分别利用Apo E-/-基因敲除小鼠(n=8)皮下埋置血管紧张素Ⅱ微量渗透泵,持续28 d建立腹主动脉瘤模型;采用含0.01%苯并芘(Ba P)的高脂饲料喂养C57BL/6小鼠(n=10)同时皮下注射血管紧张素Ⅱ(Ba P模型)持续120 d,诱导腹主动脉瘤的形成;利用弹性蛋白酶(n=8)或氯化钙诱导C57BL/6小鼠(n=8)肾下主动脉瘤的发生,持续14 d,建立腹主动脉瘤模型。相同部位主动脉最大直径扩张1.5倍即判定主动脉瘤形成。结果与正常对照组比较,Apo E-/-模型小鼠腹主动脉直径明显增加(P<0.001),成瘤率为60%;Ba P模型小鼠腹主动脉直径增加,成瘤率为20%;弹性蛋白酶模型小鼠(P<0.001)、氯化钙模型小鼠(P<0.01)肾下腹主动脉直径增加,成瘤率分别为100%和75%。结论综合效果、时间、成本等因素,弹性蛋白酶诱导腹主动脉瘤的方法更加稳定可靠。     

二羟环氧苯并芘短期暴露对人支气管上皮细胞基因表达谱的影响

[背景]苯并[a]芘(BaP)可引起暴露人群呼吸系统损伤.既往研究表明,BaP及其活性代谢物染毒细胞24h,即可引发细胞能量代谢异常、氧化损伤,导致细胞生存率降低.[目的]观察BaP活性代谢物二羟环氧苯并芘(BPDE)短期暴露导致的入支气管上皮细胞(16HBE)基因表达谱的变化,为探讨BPDE急性毒性机制提供依据.[方...     

不吃早餐有六害

郊游,是人们休闲玩乐的好方式,烧烤常是必不可少的助兴节目,既可填饱肚子,又增添了乐趣。但是需注意,经常吃烧烤会影响身体健康,甚至有可能导致癌症的发生。许多医学研究表明,高温处理的食物与癌