极速实时荧光聚合酶链反应与常规方法对新型布尼亚病毒检测的评价

目的探讨极速实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、实时荧光PCR、酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和胶体金免疫层析法(gold immunochromatography assay,GICA)4种方法检测新型布尼亚病毒的特异度和灵敏度,为发热伴血小板减少综合征的早期诊断提供依据。方法采集2017年6月1日至9月30日山东大学附属济南市传染病医院86例临床诊断为发热伴血小板减少综合征患者的血清样本,分别应用极速实时荧光PCR、实时荧光PCR、ELISA和GICA 4种方法进行检测。统计学分析采用χ^2检验。结果86份患者血清标本中,极速实时荧光PCR、实时荧光PCR、IgM-ELISA、IgG-ELISA、IgM-GICA、IgG-GICA的新型布尼亚病毒阳性分别为82份(95.34%)、79份(91.86%)、41份(47.67%)、8份(9.3%)、19份(22.09%)和3份(3.49%)。极速实时荧光PCR特异度为100%,灵敏度达到1×103拷贝/mL,3次重复扩增试验显示其Ct值变异系数均<2%。在发热伴血小板减少综合征进展的1期、2期、3期病程中,极速实时荧光PCR的阳性检出率为41份(97.62%)、34份(94.44%)、7份(87.50%),实时荧光PCR的阳性检出率为39份(92.86%)、33份(91.67%)、7份(87.50%),在1期和2期两个病程,极速实时荧光PCR阳性检出率略高;IgM-ELISA阳性检出率从1期(28.57%)到3期(87.50%)显著增高,2期、3期与1期相比,差异均有统计学意义(χ^2=8.347、7.561,均P<0.01);IgM-GICA的阳性检出率从1期(14.29%)到2期(33.33%)也有增高,差异有统计学意义(χ^2=3.962,P<0.05),但与其他方法相比,其检出率偏低。1期,实时荧光PCR阳性检出率显著高于ELISA(IgM和IgG)和GICA(IgM和IgG),差异均有统计学意义(χ^2=33.740、55.080、49.010、64.340,均P<0.01)。2期,实时荧光PCR的阳性检出率高于ELISA(IgM和IgG)和GICA(IgM和IgG),差异均有统计学意义(χ^2=7.700、46.720、23.700、50.630,均P<0.01)。3期,极速实时荧光PCR、实时荧光PCR和IgM-ELISA表现出同样高的阳性检出率,远高于IgG-ELISA和GICA(IgM和IgG)。实时荧光PCR阳性检出率和IgG-ELISA、IgM-GICA、IgG-GICA之间差异均有统计学意义(均χ^2=6.250,P<0.05)。结论极速实时荧光PCR在新型布尼亚病毒的早期检测中有更高的灵敏度和特异度,且重复性好、稳定度高,与传统实时荧光PCR相比大大缩短了扩增时间,对发热伴血小板减少综合征的早期快速诊断具有重要价值。     

小鼠腹腔巨噬细胞的conA受体分布及受体介导内吞

本实验利用辣根过氧化物酶(HRP)、胶体金标记法显示小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)表面膜刀豆素A(conA)受体的分布及conA受体介导的吞噬活动。结果显示,conA受体在Mφ膜表面呈均匀分布。随着conA凝集素与Mφ膜表面conA受体作用时间的延长,conA受体介导的内吞活性增强。     

纳米级金颗粒在基因芯片检测技术中的研究进展

纳米直径的金颗粒用于生命科学研究中的示踪技术已有较长的历史，由于其独特的物理、化学性质及生物相容性，近年来更是在芯片检测技术中得到了广泛的应用，特别是用不具备吸附能力离散的纳米金作为信号报告分子则被认为是芯片检测中的一个重要进展。     

GICA法检测乙肝病毒标志物“两对半”的结果分析

目的 用ELISA法作参照，对胶体金免疫层析测定(GICA)试纸条检测乙肝标志物表面抗原(HBsAg)、表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)俗称“两对半”的性能、结果等技术参数进行了分析比较，为GICA法的临床应用提供参考。方法 从ELISA法测定“两对半”的血清标本中选出40例不同反应模式的标本及卫生部临介值血清，用GICA试纸条进行测定，对其反应的特异性，敏感性，符合度及试纸的反应阳性强度进行观察比较分析。结果 与ELISA法比较，GICA法测定血清标本的总特异性为93．8％；总灵敏度为94．4％：总符合率为94％。用GIcA法对卫生部临介值血清HBsAg2ng／ml、HBsAb30mlu／ml、HBcAb2ncu／m检出结果均为弱阳性，HBeAg2ncu／ml为阳性，HBeAb4ncu／ml为阴性，HBsAglng／ml为阴性．而将五项的原有浓度稀释一倍时均为阴性。两种方法检测各种模式符合率为80％。结论 GICA法用于两对半检测其特异性、敏感度、及符合率均达到90％以上，但灵敏度总体低于ELISA法，对于献血员的筛选有漏检的可能。在检测下限的标本有假阴性和假阳性出现，其试剂质量还有待于进一步提高和规范。但GICA法具有快速、简便、特异、不需特殊设备、适用于急诊病人检测的要求及可以单份测定等优点，其应用前景十分广阔。     

体金快速法在艾滋病抗体检测中的假阴性现象与解决办法

2003年新的艾滋病检测规范中允许“在尚未建立艾滋病筛查实验室的偏远地区可由经过培训的技术人员在规定场所使用快速试剂进行筛查。新规范的颁布意味着今后用快速法检测HIV抗体的数量将迅速增多。与EusA法相比，胶体金快速法具有快速、安全、操作简单等优点。在实际使用过程中，胶体金快速法除了敏感性较差，假阳性与假阴性偏高等缺点外，还存在一种未被人们所注意的抗体过剩造成的后带现象。该现象所带来的严重性应引起相关单位的重视。     

HCG免疫胶体金试纸的临床应用评价

绒毛膜促性腺激素测定在正常妊娠、宫外孕、葡萄胎、绒癌等疾病的诊断和鉴别诊断中有非常重要的价值。ＨＣＧ免疫胶体金检测试纸操作简单、快速。我们对其进行了评价和临床应用探讨 ,现报告如下。1　材料与方法1.1　ＨＣＧ免疫胶体金定性检测试纸 (以下简称试条 )　由北京蓝十字生物技术有限公司提供。试条阳性程度判断方法 :①弱阳性 :红色反应线出现晚 ,并且色很浅 ;②阳性 :红色反应线出现时间与对照接近 ,色与对照相近 ;③强阳性 :红色反应线出现较快 ,且色与对照线相近或更深。1.2　β ＨＣＧ定量　用贝克曼库尔特公司Ａｃｃｅｓｓ微粒…     

胶体~(198)Au、~(32)P组织间质注射治疗不同类型血管瘤效果分析

1993年～1995年,我科共收治不同类型血管瘤患者60例,均为门诊病例。分别用胶体198Ａｕ和32Ｐ局部组织间注射治疗,对其局部聚集情况及疗效加以比较分析,现报告如下。资料与方法1.病例　根据临床体征将血管瘤分为限局性和弥漫性两种,各30例。前者特点是边界清楚,突出皮表,青紫色瘤体,大小1ｃｍ×1ｃｍ至7ｃｍ×8ｃｍ,分布于头颈、面颊、前额、背部。后者特点为无明显限局性隆起,大小与体位变化有关,分布于颞部、面颊、四肢等。2.方法　将60例患者分为两组,一组30例,包括限局性和弥漫性各15例,给予198Ａｕ胶体37ＭＢｑ/ｃｍ2,注射前后用Ｓｉｍ…     

抗dsDNA抗体两种检测方法的比较

比较抗双链ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）抗体的两种检测方法。用胶体金快速斑点渗滤技术（ＤＩＧＦＡ）及马疫锥虫间接荧光抗体染以法检测２７名正常儿童和４６例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）病人和非狼疮病人血清抗ｄｓＤＮＡ抗体，２７名正常儿童和１７例非狼疮病人血清抗ｄｓＤＮＡ抗体经两种方法检测均为阴性；２９例ＳＬＥ患者用两种方法检测出抗ｄｓＤＮＡ抗体的阳性符合率为９４．４４％（１７／１８）。说明两种方法具有一致的特异性和     

胶体金试纸条法粪便隐血试验的质量控制

目的:胶体金试纸条法潜血试验进行质量控制。方法:通过两种不同检验方法及不同采样量探讨对潜血试验结果影响的原因。结果:胶体金试纸条法潜血试验,不同采样量均会产生假阴性结果。结论:标本采样量是胶体金试纸条法潜血试验质量控制的关键。     

胶体金免疫层析法检测尿hCG的质量控制方法探讨

目的通过对胶体金免疫层析法（GICA）试纸条评价,建立该方法的检测尿hCG的室内质控.方法利用hCG不同浓度的标准品评价试纸条的敏感性、重复性、稳定性、检测范围,检测温度及时间对试纸条检测尿hCG结果的影响等.结果GICA的检测范围25-100万mlU/ml,最低检出限达25mIU/ml,大于200万mIU/ml时存在后带现象.试纸条反应5分钟后呈色均一,最佳检测温度为4-30℃.结论灵敏度检测可作为GICA室内质控的主要指标,它能保证检测结果的准确性.