缢蛏、织锦巴非蛤、二色裂江珧清除氧自由基作用研究

建立4个抗氧化模型测定了缢蛏（Sinonovacula constricta Lamarck)，织锦巴非蛤（Paphia textzle Gmelin)，二色裂江珧（Pinna bicolor Gmelin)对活性氧自由基的影响，比较这3种贝类的抑制效果，结果表明，对O2的清除作用为缢蛏（样I）＞织锦巴非蛤（样II）＞二色裂江珧（样Ⅲ）；清除．OH的作用为样Ⅲ＞样II＞样I，对过氧化氢的抑制作用为样Ⅲ＞样Ⅱ＞样I，对脂质过氧化的作用，样I，样Ⅱ抑制作用较小，而样Ⅲ则具有较高的抑制作用。     

缢蛏对60Co-γ辐照致小白鼠辐射损伤修复作用

缢蛏(Sinonovacula constricta)属于双壳纲异齿亚纲帘蛤目竹蛏科,又名蛏子,其肉味鲜美,性质甘温,能补阴,去邪热,治烦闷、冷痢、热痢、妇人产后虚损、虚热等症^[1].缢蛏特点是蛋白质含量丰富、低脂肪,富含灰分和总糖.缢蛏贝肉中含有丰富的钾、钠、磷、硫等常量元素,钙、镁、铁、锌、硒、锰、铜等也较为丰富^[2-3].国内外对缢蛏的研究,主要集中在缢蛏的养殖技术、缢蛏的组织结构和功能以及缢蛏的遗传特征方面,有关其抗辐射作用的研究较少^[4].本研究利用60Co-γ射线照射所致的小白鼠辐射损伤试验,旨在探讨缢蛏对辐射引起的辐射损伤修复作用.     

稀酸浸提直接进样测定缢蛏中的镉

目的 通过正交试验优选出较满意的稀酸浸提前处理方法测定缢蛏中的镉。方法 用稀酸浸泡提取缢蛏中的镉。对稀酸浸提前处理中的固液比、硝酸浓度、混旋时间、浸提温度、浸提时间、超声时间等因素进行二水平的正交试验,用石墨炉原子吸收法对处理过的样液进行测定。同时用湿法消解-石墨炉原子吸收法对上述试验结果进行验证。结果 约0.2 g的缢蛏用0.5%(V/V)硝酸30 ml经2 min混旋,40℃浸提1 h后超声15 min, 10 000 r/min离心5 min是较为满意的前处理方法。其测定结果与经湿法消解前处理的样本的测定结果基本一致。结论 稀酸浸提缢蛏中的镉,操作简便、试剂用量少、耗时短,是较理想的前处理方法,尤其适用于较大样本量缢蛏中镉的测定。     

缢蛏泛变应原原肌球蛋白的克隆表达、纯化及其免疫学特性研究

原肌球蛋白（tropomyosin）作为泛变应原广泛存在于无脊椎动物体内，本研究从缢蛏中克隆出一个原肌球蛋白基因。缢蛏（Sinonvacula constricta）购于深圳市水产品市场。9个缢蛏过敏病人的阳性血清来自深圳市人民医院和儿童医院（经Unit CAP 检测，2级以上）。缢蛏原肌球蛋白 cDNA片段转入表达载体（pET-28a），引物序列P5：5＇-GGACATATG-GAGGCCATCAGTTGGC-3；p3：5＇-CCGGAAT-TCTTAGCCAGTCAGTTKCGC-3＇。重组原肌球蛋白基因表达按常规方法进行。目标蛋白洗脱组分透析并保存。纯化缢蛏重组原肌球蛋白进行SDS-PAGE，电转到纤维素膜上，再经常规免疫学方法鉴定。重组原肌球蛋白分离后进行酶切，混合肽进行MALDI-TOF-MS质谱鉴定。     

缢蛏多肽诱导前列腺癌DU-145和PC-3细胞的早期凋亡的研究

目的 研究缢蛏抗肿瘤生物活性肽的制备工艺及其体外抗前列腺癌的活性功能.方法 选用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶等4种蛋白酶分别对缢蛏进行酶解,通过对DU-145细胞的增殖抑制作用来检测各酶解物的抗肿瘤活性,经G-25、反相高效液相色谱C18分离制备缢蛏酶解多肽.MTT检测缢蛏酶解多肽对DU-145和PC-3细胞的早期凋亡诱导作用;采用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测缢蛏酶解多肽对DU-145和PC-3细胞的早期凋亡情况.结果 木瓜蛋白酶酶解获得的缢蛏多肽对DU-145细胞的诱导早期凋亡作用最强.MTT法结果显示,不同浓度的缢蛏酶解多肽对DU-145和PC-3细胞均有增殖抑制作用,呈剂量和时间依赖性.Annexin V-FITC/ PI双染流式细胞术检测后发现,DU-145和PC-3细胞经缢蛏酶解多肽作用后,早期凋亡细胞随着作用时间和药物浓度的增加而增加.结论 缢蛏酶解多肽在体外有显著的抗肿瘤作用.     

缢蛏糖胺聚糖的提取分离及其体外抗肿瘤活性的初步研究

缢蛏肉经胰酶和枯草杆菌中性蛋白酶酶解提取．经过分离得粗糖胺聚糖SG1．再经初步纯化得到精制的糖胺聚糖SG3．结果表明．胰酶和枯草杆菌中性蛋白酶用量分别为贝肉重量的1．2％和0．8％．水解时间为3h效果最佳；SG1得率为1．5％；SG3的总糖含量从SG1的，19．7%提高到73．2％．总氮含量从8．3％降至2．7％；SG3的电泳行为表明可能含有2个以上的组分；仞步的体外抗肿瘤试验表明．SG1对HL-60细胞具有显著的抑制效果。     

缢蛏泄肠吸虫病病理学和组织化学研究

食蛏泄肠吸虫幼虫期对缢蛏的病理危害,与缢蛏受感染后的时间长短有关,因此表现在与缢蛏不同发育期有一定的相关性。对1年蛏生长期危害较轻,对1年蛏成熟期危害加重,对2年蛏生长期危害最重。同时发现,食蛏泄肠吸虫幼虫期对缢蛏的危害程度与不同的组织器官也有关,对缢蛏生殖腺、消化腺危害最重。可靠成生殖腺萎缩、破损,甚至造成整个生殖腺消失;对缢蛏消化腺造成消化腺盲囊变形、萎缩、破损。此外幼虫期还可对缢蛏的鳃组织、唇瓣、外套膜、肌肉、心室和晶杆囊等许多组织器官造成不同程度的危害。组织化学分析表明,食蛏泄肠吸虫幼虫期可造成缢蛏体内多种组化成分的损失,其中,糖原类物质和蛋白质的损失最严重     

缢蛏水解物的抗疲劳作用

目的研究缢蛏水解物(HSC)的抗疲劳作用及机制。方法采用不同浓度HSC溶液灌胃给药,30 d后测定小鼠负重游泳时间及血清尿素氮含量、血浆乳酸浓度、血清乳酸脱氢酶活性、血红蛋白浓度、肝糖原与肌糖原含量等生化指标。结果 HSC可明显延长小鼠负重游泳时间,显著降低运动后小鼠的血清尿素氮含量和血乳酸水平,提高了血红蛋白浓度、肝糖原与肌糖原水平及乳酸脱氢酶的活性。结论 HSC具有良好的抗疲劳作用。     

缢蛏水提物的体外抗氧化活性研究

目的:研究缢蛏水提物的体外抗氧化活性。方法:通过检测总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性来研究缢蛏水提物的体外抗氧化活性。结果:缢蛏水提物能显著提高T-AOC、SOD和GSH-PX活性。结论:缢蛏水提物具有体外抗氧化活性。     

缢蛏多糖的提取、分离和结构分析

目的从缢蛏中提取和分离纯化多糖,对其基本理化性质和结构组成进行分析。方法依次采用100℃热水提和碱提方法从缢蛏中提取粗多糖,采用Q Sepharose Fast Flow强阴离子交换柱层析和Sephacryl S-300凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化,并对其总糖、蛋白含量,相对分子质量和单糖组成进行分析。对多糖纯化组分采用甲基化、气质联用(GC-MS)、红外光谱(IR)和核磁共振波谱(NMR)进行化学结构解析。结果从缢蛏中经热水提粗多糖(YC-S)和碱提粗多糖(YC-J)均为葡聚糖,进一步分离纯化得到了4种水溶性多糖组分。对其中1种热水提多糖纯化组分YC-S2采用高效液相凝胶色谱法测得其相对分子质量为482kD,且色谱峰单一对称,表明其具有较高的纯度。结构分析表明,YC-S2是1种以α-(1→4)Glc为主链,含有少量的β-(1→3,4)和β-(1→4)分支的D-吡喃型葡聚糖。结论从缢蛏中提取分离得到了4种多糖组分,并初步确定了1种水溶性葡聚糖的结构,为缢蛏多糖结构和活性的深入研究提供了基础。