文多灵碱键合人血清白蛋白位点的表征

本文利用荧光增敏光谱法及紫外吸收光谱法结合计算机模拟技术研究了模拟生理条件下文多灵碱的光谱特征及它与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)的键合作用。同步荧光及紫外光谱图的信息表明文多灵碱对蛋白微环境有影响。荧光光谱表明文多灵碱对HSA有较强的荧光增敏作用,根据荧光滴定的数据求得不同温度下(303、310和317K)药物与蛋白相互作用的结合常数及结合位点数。分子模拟的结果显示了文多灵碱与HSA的键合模式和键合机制,表明药物与蛋白有较强的键合作用,维持药物与蛋白的相互作用力主要是疏水作用,兼有4个氢键(位于氨基酸残基Arg218、Lys195、Arg222和Ala291位)。位点竞争实验显示文多灵碱键合在HSA的siteII区。通过计算得到的热力学参数(依据范德霍夫公式计算得ΔH0与ΔS0的值分别为-10.30kJ·mol-1和79.98J·mol-1·K-1)确定了药物与蛋白的相互作用力类型主要为疏水兼静电作用。     

土壤条件对长春花生物碱含量的影响

目的:研究不同土壤条件对长春花体内3种生物碱含量的影响。方法:采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定不同土壤下长春花中长春碱、长春质碱、文多灵含量。结果:沙质壤土中长春碱、长春质碱、文多灵含量最高,分别为0.0058、0.0317、0.0823mg/mL。结论:以沙质壤土种植长春花可提高其植株体内长春碱、长春质碱、文多灵的含量。     

反相高效液相色谱法测定长春花组织培养物中吲哚生物碱含量

目的:定量测定长春花组织培养物中的吲哚生物碱含量。方法:用反相高效液相色谱法和紫外检测器测定了长春花组织培养物中吲哚生物碱的含量。分析柱:Nucleosil5C18柱,流动相:甲醇—乙腈—0.025mol·L^-1乙酸铵—三乙胺(15∶40∶45∶0.1),检测波长:280nm,流速:1mL·min^-1。结果:色胺、蛇根碱、阿吗碱、文多灵和长春质碱的回收率分别是94.5%,95.9%,96.0%,97.0%和98.2%;平均日内精密度RSD均小于2%,日间精密度RSD均小于3%。结论:此法可有效分离和测定长春花组织培养物中吲哚生物碱含量,为进行细胞工程生产长春花生物碱提供了准确、灵敏、可靠的分析方法。     

酒石酸长春瑞滨的合成

长春质碱经间氯过氧苯甲酸氧化、三氟乙酐处理后,再与文多灵反应得到关键中间体脱水长春碱,其9'-位经1氯代苯并三唑氯代、四氟硼酸银处理缩环后,与酒石酸成盐,制得抗肿瘤药酒石酸长春瑞滨,总收率约12%.     

中山产长春花不同部位中文多灵生物碱的分布

目的探讨长春花药材不同部位中文多灵生物碱的含量,为长春花药材的产业化生产提供依据。方法以C18柱（4.6 mm×250 mm,10μm）为分析柱 甲醇-水（60∶40,以二乙胺和磷酸调节pH=8~9）为流动相,流速：1.0 mL.min-1 检测波长：220 nm,建立文多灵生物碱的HPLC测定法。结果利用建立的HPLC分析方法,成功测定了长春花药材不同部位中文多灵生物碱的含量。结论文多灵生物碱在长春花药材不同部位中均有分布,在叶中的分布显著高于在其他部位中的分布。     

不同来源长春花药材中文多灵的含量比较

目的建立长春花中文多灵的含量分析方法,比较不同来源长春花药材中文多灵的含量。方法采用高效液相色谱法,以依利特C18柱为分析柱,甲醇：水（体积比64：36,以二乙胺和磷酸调pHI1）为流动相,流速为1mL／min;220nm为检测波长。结果红色长春花、白色长春花以及恩平、阳江、广州紫色长春花样品中文多灵含量分别是1．561、0．390、0．982、0．622、0．587mg／g。结论不同来源的长春花中文多灵的含量差异较大。     

文多灵和长春质碱的分离工艺研究

目的:对长春花生物碱中的文多灵和长春质碱的分离工艺进行研究。方法:以薄层色谱法（TLC）为检测手段,对分离文多灵和长春质碱的展开系统、大孔吸附树脂型号、洗脱液浓度、上样液浓度、吸附洗脱性能参数进行了考察,重量法对产物文多灵和长春质碱进行定量。结果:展开系统为氯仿-乙酸乙酯-甲醇（5:3:1）最好;NKA-9型大孔吸附树脂分离效果最佳;分别用30%和55%乙醇溶液富集得到长春质碱和文多灵;上样液浓度为200 mg·ml^-1时,总碱的回收率最高。结论:采用NKA-9型大孔吸附树脂一步柱层析,分离长春花生物碱废渣中长春质碱和文多灵,相对于原生物碱样品重量富集率分别为11.2%和14.5%,分离快速、简便。     

不同长春花中3种生物碱的含量测定

目的:建立快速准确的长春花内生物碱含量测定方法,为寻找高含量品种提供方法和依据。方法:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),对收集到的10个长春花品种中的文多灵、长春质碱、长春碱含量进行了测定,色谱柱:Dikma Diamonsil-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相为A∶0.7%二乙胺(磷酸调整p H至7.2);B:乙腈:甲醇=25:40。A∶B=35∶65;流速1ml/min。柱温35℃。检测波长:280nm。结果:文多灵:Y=2.00×106X+5.46×104,r=0.9999,线性范围:0.2~4μg;长春质碱:Y=2.28×106X+8.31×104,r=0.9999,线性范围:0.2~4μg;长春碱:Y=1.76×106X-7.17×104,r=0.9999,线性范围:0.2~4μg。文多灵含量最高的是1号品种,长春质碱含量最高的是3号品种,长春碱含量最高的是2号品种,三种生物碱总和最高的是3号品种。结论:该方法简便、快速,分析准确,适合对长春花内主要生物碱做高通量的筛选。综合考虑总碱的含量和最重要的长春碱的含量,1号品种适合作为代谢调控的本体。     

广州产长春花中文多灵生物碱的年内变化

目的探讨广州长春花中文多灵生物碱在一年内的变化规律,为长春花GAP种植提供依据。方法采用Yilite C18柱(250 mm×4.6 mm,10μm),流动相为甲醇-水(62∶38,二乙胺调pH11),流速1 mL.min-1,检测波长254 nm。结果采用HPLC测定了广州长春花不同样品中文多灵生物碱的含量。结论一年的生长时期中,广州长春花中文多灵生物碱的含量差异较大。茎中文多灵的含量在10～2月处于上升阶段,2～9月总体处于下降阶段。叶中文多灵的含量则在10～3月与4～9月,分别呈现上升与下降的趋势。花与果中文多灵生物碱的含量动态变化与茎、叶相比,较为复杂。茎、叶、花、果中文多灵的含量分别在2月、3月、6月及4月达到最大值。