瓜蒌果瓤化学成分研究

目的研究瓜蒌(栝楼Trichosantheskirilowii果实)果瓤的化学成分。方法综合运用硅胶、ODS及HPLC等色谱方法对进行分离纯化,采用NMR和MS数据进行化合物的结构鉴定。结果从瓜蒌瓤95%乙醇回流提取物的醋酸乙酯萃取层得到26个化合物,分别为6个有机酸酯类:月桂酸乙酯(1)、邻苯二甲酸丁酯(2)、乙二酸二乙酯(3)、苹果酸二丁酯(4)、6,10,14,18-tetramethyl-2-ethyl-7-ene-3-hydroxyl--ninecanol-1-butyl ester(5)、drechslerol-B(6);9个有机酸及酚酸类:羟基苯甲醛(7)、水杨酸(8)、香草酸(9)、异香草酸(10)、原儿茶酸(11)、反式肉桂酸(12)、对羟基肉桂酸(13)、反式阿魏酸(14)、月桂酸(15);8个黄酮类:香叶木素(16)、芹菜素(17)、柯伊利素(18)、木犀草素(19)、4′-羟基黄芩素(20)、槲皮素(21)、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖苷(22)、柯伊利素-7-O-β-D-葡萄糖苷(23);2个糠醛类:5-乙酰氧甲基糠醛(24)、5-羟甲基糠醛(25)和1个环阿尔廷醇化合物cyclotucanol 3-palmitate(26)。结论除化合物10外,其他化合物均为首次从栝楼属植物中分离得到。     

苦马豆素对胶质瘤细胞U87凋亡及HSP90/AKT通路的影响

目的探究苦马豆素(Swainsonine,SW)对胶质瘤细胞U87凋亡的影响及相关机制。方法用不同浓度苦马豆素(0、4、8、12μg/mL)培养U87细胞系,依次命名为对照组、苦马豆素低剂量组、苦马豆素中剂量组、苦马豆素高剂量组,培养48 h后,采用细胞染色观察其形态的变化,应用流式细胞术检测U87细胞的凋亡率,使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(WB)检测caspase 3、HSP90和AKT的表达情况。结果对照组U87细胞形态多样,大小不一,胞体上有突起向周围延伸,染色质均匀分布;苦马豆素中剂量组和苦马豆素高剂量组细胞数目明显减少,细胞和细胞核体积明显缩小,细胞质浓缩,细胞内染色质固缩,有的细胞出现凋亡小体。苦马豆素中剂量组和苦马豆素高剂量组细胞凋亡率显著高于对照组,呈现剂量依赖性(P<0.05);苦马豆素中剂量组和苦马豆素高剂量组caspase 3的表达水平显著高于对照组,呈现剂量依赖性(P<0.05);苦马豆素中剂量组和苦马豆素高剂量组HSP90、AKT的表达水平显著低于对照组,呈现剂量依赖性(P<0.05)。结论苦马豆素能够抑制HSP90/AKT信号通路中HSP90和AKT蛋白的表达、促进胶质瘤细胞U87凋亡,推测苦马豆素是通过抑制HSP90/AKT信号通路的活性促进胶质瘤细胞U87凋亡。     

早孕蜕膜组织血管内皮细胞的分离与培养

我们成功地建立了应用荆豆素-Ⅰ标记的磁珠(UEA-I-Dynabeads)分离纯化早孕蜕膜组织血管内皮细胞的新技术。荆豆素-Ⅰ型可特异性地与血管内皮细胞膜表面糖蛋白上的岩藻糖基结合,用胶原酶和胰蛋白酶消化蜕膜组织成单细胞悬液,其内皮细胞阳性率在2%左右,经UEA-I-Dynabeads 纯化后,内皮细胞纯度可达90%以上并试培养成功。实验证明此项细胞分离新技术简单、快速且有效,为进一步研究血管内皮细胞的功能与作用打下了良好的基础。     

曲克芦丁香豆素片在骨科的应用观察

肢体外伤后造成的单纯软组织损伤、闭合性骨折以及肢体手术后均可引起不同程度的肢体肿胀，虽然有些肿胀可以通过抬高患肢逐渐消退，但需时较长，而且有一些肿胀可能逐渐加重，甚至形成骨筋膜综合征，严重的可以造成肢体坏死的后果。对于一些肢体手术后引起的肿胀，一部分是创伤反应所致，而相当一部分是由于深静脉炎形成血栓造成静脉回流不畅所致，如何能使肿胀尽快消退，直接影响着肢体的功能恢复，     

异香豆素对老年痴呆小鼠β淀粉样蛋白的影响

目的 建立老年痴呆(AD)小鼠模型,探讨异香豆素对AD小鼠的治疗作用及其机制.方法 将50只昆明小鼠分为:对照组、模型对照组、低剂量异香豆素治疗组、中剂量异香豆素治疗组和高剂量异香豆素治疗组,每组各10只;水迷宫实验检测各组小鼠的逃避潜伏时间和平台跨越次数;放射免疫法测定细胞培养上清Aβ含量.结果 老年痴呆小鼠模型组与对照组对照比较,逃避潜伏时间出现显著性的延长(P<0.01),平台跨越次数显著性的减少(P<0.01).异香豆素治疗后老年痴呆小鼠的逃避潜伏时间和平台跨越次数得到显著性的改善(P<0.05).对照组、模型对照组、低剂量异香豆素治疗组、中剂量异香豆素治疗组、高剂量异香豆素治疗组脑组织Aβ的表达水平分别为(1.01±0.44)pg/ml、(12.89±3.21)pg/ml、(10.45±2.06)pg/ml、(7.18±1.92)pg/ml、(4.07±1.24)pg/ml,各组之间具有统计学差异(P<0.01).结论 异香豆素具有抗AD小鼠痴呆的活性,减少AD小鼠脑组织Aβ的生成是其主要的作用机制.     

药物拮抗单核细胞粘附及迁移于肿瘤坏死因子处理的脑血管内皮细胞单层

研究肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）影响单核细胞与体外培养的牛脑微血管内皮细胞（ＢＣＭＥＣ）粘附，迁移的动力学过程及药物的保护作用．利用培养在胶原层上的单层内皮细胞，通过对粘附于内皮细胞单层上的单核细胞及胶原层中的单核细胞计数，测定单核细胞粘附及迁移．ＴＮＦ（１００ｋＵ·Ｌ－１）可促进单核细胞与ＢＣＭＥＣ的粘附及迁移，其促粘附与迁移作用具明显的时效关系．ＴＮＦ促粘附达最大效应时间为２ｈ，较对照提高１２０．７％；ＴＮＦ促迁移作用１ｈ达到坪值，提高９１．９％．药物戊烯氧呋豆素（ｉｍ－ｐｅｒａｔｏｒｉｎ，ＩＭＰ），己酮可可碱（ｐｅｎｔｏｘｉｆｙｌｉｎｅ，ＰＴＸ）抑制由ＴＮＦ引起的单核细胞与ＢＣＭＥＣ的粘附及迁移，在浓度为１，１０及１００μｍｏｌ·Ｌ－１时，其粘附抑制率分别为７３．１％，８７．７％，９３．３％和７３．６％，８７．２％，８９．０％；迁移抑制率分别为１７．４％，４３．４％，６８．１％和３７．７％，４９．３％，６２．３％．ＩＭＰ和ＰＴＸ能抑制单核细胞与ＴＮＦ诱导的ＢＣＭＥＣ的粘附及迁移．     

石杉碱类似物异香兰石杉碱甲对胆碱酯酶的抑制作用和东莨菪碱导致的记忆障碍的影响(英文)

目的:研究石杉碱类似物异香兰石杉碱甲(IVHA)对胆碱酯酶的抑制作用和东莨菪碱导致的记忆障碍的影响.方法:乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶活力用Ellman比色法测定.抑制常数K_i值抑制机制用Lineweaver和Burk的双倒数作图法测定.行为测试用八臂迷宫装置.结果:IVHA的抗AChE作用稍弱于Hup-A.它对红细胞膜AChE的IC_(50)为0.11 μmol·L~(-1).作用强于Phys和Gal.属混合型抑制剂,K_i值为32 nmol·L~(-1).不同于异氟磷,与AChE为可逆性结合.ip给与IVHA0.2 mg·kg~(-1)翻转东莨菪碱导致的八臂迷宫记忆障碍.结论:IVHA是一个新的强效可逆胆减酯酶抑制剂,值得进一步研究.     

罗布泊来源胀果甘草根际枯草芽孢杆菌GA21次生代谢产物结构与活性初步研究

目的分离鉴定枯草芽孢杆菌GA21发酵液中次生代谢产物并对其活性进行初步研究。方法采用TLC、HPLC等分离手段对次生代谢产物进行分离;通过HR-ESI质谱、1D-NMR和2D-NMR对其结构进行鉴定;以琼脂平板法检测其次生代谢产物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、稻瘟菌、白色念珠菌的拮抗活性。结果分离得到两个异香豆素类次生代谢产物:GA21-20和GA21-26;其中GA21-20的化学结构与Amicoumacin B一致,但无抗细菌及真菌活性;GA21-26有抗真菌活性,但无抗细菌活性,分子量为435.20890,分子式为C21H29O7N3,是一新的3,4-二氢异香豆素类抗生素。GA21-26在2.5μg/纸片对白色念珠菌即可显示抑制活性,在80μg/纸片对水稻稻瘟菌显示抑制活性,表明GA21-26在拮抗医学条件致病真菌方面有潜在用途。结论枯草芽孢杆菌GA21能产生一系列3,4-二氢异香豆素类抗生素,其次级代谢产物值得进一步研究。     

东方荚果蕨的化学成分研究

目的 研究东方荚果蕨Matteuccia orientalis干燥根茎60%乙醇提取物的化学成分。方法 采用大孔树脂Diaion HP-20柱色谱、反相ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、高效液相色谱等多种色谱学方法对东方荚果蕨干燥根茎60%乙醇提取物中的化学成分进行分离,利用光谱学方法鉴定化合物的结构。结果 从该植物中分离得到11个化合物,分别鉴定为(±)-thunberginol C（1）,(2S)-5, 7, 3', 5'-四羟基-二氢黄酮（2）,柚皮素（3）,strobopinin（4）,杜鹃素（5）,leptorumol（6）,顺-3, 5-二羟基二苯乙烯（7）,dihydropinosylvin（8）,丹皮酚（9）,3, 4-dihydroxy-benzalacetone（10）,咖啡酸甲酯（11）。结论 化合物1～11均为首次从该属植物中分离得到。