利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中高效表达人胰岛素样生长因子—2（IGF—2）

目的；研制有生物活性的可溶性分泌型重组人胰岛素样生长因子－2（rhIGF-2)。方法：将14kD hIGF-2前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒（BmNPV)转移载体pBakPAK8中，经与野生型病毒DNA共转染家蚕细胞后，通过体内同源重组的方式获得重组病毒BmNPV/IGF-2。以BmNPV/IGF-2感染5龄家蚕幼虫，分别在蚕染后24，48，72，96，108，120h提取家蚕血淋巴液，以ELISA法测定不同时家蚕血中IGF－2浓度，采用Westernblot分析鉴定IGF－2免疫学活性，MTT法观察其对NIH3T3细胞增殖的影响。结果：ELISA测定显示，BmNPV/IGF-2感染家蚕幼虫96h后IGF－2表达率最高，每毫升血淋巴中约含IGF－2 14μg，Western-blot分析发现表达产物在蚕体内被加工成7.0kD成熟hIGF-2，并对NIH3T3细胞具有良好促增殖效应，其促细胞生长能力明显优于来源于E.coli的IGF－2标准品。结论；本研究实现具有免疫学活性及生物学活性的rhIGF-2在家蚕杆状病毒表达系统的高效表达。     

抗衰老药物家蚕寿命测定法的研究

本实验表明，多种中药材，如香附子、花粉、党参、菟丝子、蛇床子等的提取液涂在桑叶上喂蚕，能显著延长蚕蛾寿命，但对家蚕幼虫龄期无明显影响。这种实验方法重演性好，如能进一步完善试验方法，将可用于筛选抗衰老药物的研究。     

家蚕的抗氟性及其与数量性状的相关研究

测定家蚕幼虫抗氟中毒的抵抗能力,4龄>3龄>2龄。强抗原种杂变组成的杂种一代,抗性介于两亲之间,弱抗原种杂交组成的杂种一代,其抗性表现出超亲的遗传现象,不同浓度的氟素对品种间的生长发育影响有着显著的差异,说明了品种间的抗氟能力存在着差别;抗氟性与DNV抗性有着显著的相关性;与茧质性状表现为不显著的正相关,抗氟性与蚕血中Ca~(2+)、Mg~(2+)含量无明显的相关关系。     

HCV CE2融合蛋白在家蚕杆状病毒表达系统中的表达

HCV的E2蛋白能刺激机体产生具有中和活性的抗体，其C蛋白序列在不同的型和株间具有高度保守性，是细胞免疫的主要识别位点。本研究利用家蚕杆状病毒为载体，在家蚕培养细胞和幼虫中高效表达了具有生物活性的HCV CE2融合蛋白，为今后该蛋白免疫学特性及疫苗的研究、临床诊断试剂的开发提供了参考资料。     

决明子“轻身延年”作用对家蚕整体能量特征的影响

目的:在前期研究结果决明子有延长家蚕寿命的基础上,进一步探讨决明子对家蚕整体能量特征的影响及饥饿应激状态的耐受能力变化,以深究决明子"轻身延年"的作用及其机理。方法:取龄期相同生长整齐的三眠蚕随机分为5组,即空白对照组,决明子水煎液0.65g/ml剂量组、0.33g/ml剂量组、0.16g/ml剂量组,维生素E 0.0015g/ml剂量组,每组400头。使用涂抹法将不同浓度药液涂抹于新鲜桑叶上,4龄期内喂食5次,5龄期内喂食6次,在四龄期末休眠后进行耐饥饿处理,收集四龄、五龄末家蚕蚕体及蚕砂测定能值,五龄期第三天,每组各取15头家蚕取血淋巴,测Na+-K+-ATP酶活性。结果:决明子各给药组家蚕耐饥饿时长显著降低,且体水含量越多,耐饥饿时长越久,二者成正相关关系。在四龄期,决明子给药组食桑量、蚕体能值显著降低,蚕砂重量、蚕砂能值及蚕砂总能量支出有明显增加,且随给药剂量的增加而减少;在五龄期,决明子给药组的食桑量、蚕砂重量与蚕砂总能量支出均有明显增加(P0.05),但随给药剂量增加而增加,与蚕体能值变化趋势相反,但家蚕蚕砂能值变化不大。同时,各给药组血淋巴与肠管组织中Na+-K+-ATP酶活性有显著降低。结论:决明子影响了家蚕整体能量特征,泻下作用使蚕砂能值及蚕砂总能量支出增加,使食物摄入减少,可能与其"轻身延年"的作用相关,但导致了家蚕对饥饿应激的耐受能力降低,本实验为决明子的合理开发和临床应用提供了新的视角和观点。     

新疆家蚕抗菌肽诱导人胃癌细胞AGS凋亡的研究

目的探讨新疆家蚕抗菌肽(cecropin XJ)是否通过诱导人胃癌细胞AGS凋亡产生抗肿瘤的作用。方法选择0.01~1 000 mg·L-1浓度范围内的cecropin XJ与人胃癌细胞AGS和人正常胃上皮细胞GES-1共培养24 h,采用MTT法检测cecropin XJ对AGS细胞和GES-1细胞增殖的影响;透射电镜观察细胞超微结构变化;Hoechst染色观察细胞凋亡情况;流式细胞术检测细胞内活性氧和线粒体膜电位的变化;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测Bax、Bcl-2、caspase-3以及细胞色素C mRNA和蛋白水平的表达变化。结果 Cecropin XJ在体外能明显抑制胃癌AGS细胞的增殖(P<0.05),并具有浓度依赖性,IC50值为61.19 mg·L-1,但对GES-1细胞无明显的抑制增殖作用。经cecropin XJ处理24 h后,AGS细胞核固缩,呈现典型细胞凋亡特征,同时细胞内活性氧增加,线粒体膜电位下降。qRT-PCR和Western blot结果表明,cecropin XJ能够引起Bcl-2表达下调,Bax表达上调,促进细胞色素C的释放并活化caspase-3。Cecropin XJ促进caspase-3活性呈剂量依赖,经caspase-3和caspase-9特异性抑制剂处理后可降低cecropin XJ介导的AGS细胞死亡率。结论 Cecropin XJ可通过下调Bcl-2表达,上调Bax表达和活化caspase-3诱导AGS细胞凋亡,是其抗肿瘤机制之一。     

50%氯硝柳胺乙醇胺盐粉剂对家蚕的毒性观察

目的 观察50%氯硝柳胺乙醇胺盐粉剂 （WPN） 对家蚕的毒性。方法 将桑叶在1、 2、 4、 6、 8 g/L WPN中浸泡10 s 和3 min, 然后喂养家蚕, 观察家蚕死亡情况。并设清水对照组。结果 将桑叶在WPN中浸泡10 s后喂养家蚕21 d, 家蚕死亡率为22.5%~85.0%, 高于对照组的14.0%; 浸泡3 min后喂养家蚕24 d, 家蚕死亡率为56.0%~100%, 高于对照组的 8.5%。结论 WPN对家蚕有毒性, 须妥善处理灭螺与家蚕养殖的关系。     

传统中药蝉花的活体家蚕人工培养

目的:为实现蝉花的家蚕活体人工培养,为蝉花的培养开辟一条新的思路.方法:采集分离自我国8个自然保护区及韩国济洲岛的共20株蝉拟青霉菌株,采用浸渍法感染家蚕五龄期幼虫及蚕蛹,观察它们对家蚕的感染及产生孢梗束的情况.结果与结论:20株蝉拟青霉对家蚕幼虫和蚕蛹都有不同程度的感染,感染后期部分菌株能产生孢梗束.从感染率和产生孢梗束情况来看,蚕蛹效果比幼虫更好.     

春蚕丝尽身未死 全身是药惠万民

“春蚕到死丝方尽”，这是人们喜欢吟咏的一句唐诗，千百年来无人提出异议。只要稍加分析，其说有障科学常理。我国蚕有两种，即柞蚕及家蚕，两者生活史基本相同。以家蚕为例，它就是人们所说的“桑蚕”，为蚕蛾科、家蚕属，完全变态昆虫。