经鼻给予抗ICAM-1抗体对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨经鼻腔给予抗细胞间黏附分子-1(ICAM-1)单克隆抗体(单抗)对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法 将30只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组及脑缺血再灌注+经鼻给予高、中、低剂量抗ICAM-1单抗干预组.采用插线法制作局灶脑缺血再灌注模型.各干预组于缺血1 h经鼻给予抗ICAM-1单抗,再灌24 h后取脑行冠状切片.采用TTC、HE及免疫组化染色法测定脑梗死体积及免疫组化阳性区占总面积比.结果 缺血再灌注组脑标本均可见缺血侧的脑膜充血,脑组织肿胀;单纯脑缺血再灌注组及低、中、高抗ICAM-1单抗干预组脑梗死体积(以像素值表示)分别为57 042±12 483、32 871±4 325、25 932±3 103和15 325±3 356,免疫组化阳性区面积占总面积比分别为(6.64±0.476)%、(5.15±0.987)%、(4.36±0.682)%和(3.42±0.537)%,各组间差异均有统计学意义.结论 (1)脑缺血再灌注可使脑组织ICAM-1表达显著增高;(2)经鼻腔给予抗ICAM-1单抗可有效降低脑组织ICAM-1的表达,缩小脑梗死体积;(3)经鼻腔给予抗ICAM-1单抗的剂量同脑梗死体积呈负相关;(4)脑缺血再灌注时ICAM-1免疫组化阳性区面积比与脑梗死体积呈正相关.     

B细胞杂交瘤技术制备抗同种特异T细胞膜抗原单克隆抗体

目的：为进一步分析ＴＣＶ免疫诱导同种免疫反应低下的机制。方法：采用Ｂ细胞杂交瘤技术获得分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞。结果：两次的细胞融合中共得到１２株稳定分泌单抗的杂交瘤细胞，为分析抗体在ＴＣＶ中的作用提供条件。结论：ＴＣＶ免疫可引起抗ＴＣＶ细胞抗体的产生，以同系免疫的方法得到的活化Ｂ细胞用于Ｂ细胞杂交生产单抗是可行的。     

不同碳源对掌叶大黄毛状根生物量和蒽醌产量的影响

目的研究不同碳源对掌叶大黄毛状根生物量和蒽醌产量的影响。方法选取3个克隆的掌叶大黄毛状根和非转化根,采用统计分析方法,对7种糖作为培养基碳源时对大黄根生物量的积累和5种蒽醌类化合物的产量的影响进行了研究。结果不同糖作为碳源对大黄根生物量积累和蒽醌产量有极显著影响。大黄根类型与糖种类互作分析显示,DH 7a与麦芽糖对于蒽醌产量来说是优势组合,而DH 5a和DH 5c在蔗糖和果糖差异不显著,非转化根在蔗糖作碳源的培养基中蒽醌产量极显著地高于其他6种糖。结论果糖作为碳源最利于大黄根培养的生物量的积累,蔗糖作为碳源时大黄根蒽醌产量最高。     

不同培养基对掌叶大黄毛状根克隆系质量的影响

目的研究培养基优化和毛状根克隆系对掌叶大黄毛状根生物量和蒽醌产量的影响。方法选取4个单克隆掌叶大黄毛状根和4种基本培养基,采用统计分析方法,研究影响大黄毛状根生物量积累和5种蒽醌类化合物的产量的因素。结果不同克隆间大黄毛状根生物量积累存在显著差异,以单克隆毛状根DH 7a最高;培养基种类对毛状根生物量的影响存在极显著差异,以W P培养基中毛状根生物量最高;大黄毛状根中的5种游离蒽醌中以大黄酚和大黄素甲醚为主;不同克隆间5种游离蒽醌总产量存在显著差异,以DH 7a最高,并且DH 7a与B 5培养基的组合,5种蒽醌产量最高;克隆和培养基之间互作分析显示克隆DH 5a、DH 5d与W P培养基,克隆DH 7a与B 5培养基对于游离蒽醌产量来说是优势组合,而克隆DH 5c在4种培养基上5种游离蒽醌产量差异不显著。结论本研究为利用掌叶大黄毛状根培养系统大规模生产蒽醌类化合物提供依据。     

柴胡剂对单克隆抗体5—1—6引起蛋白尿的实验研究

静脉一次性注射单克隆抗体5-1-6可引起实验大鼠大量的、一过性的蛋白尿。抗体注射后第1、3、5、8天,柴胡剂治疗组与PBS对照组比较有显著性差异。免疫荧光所见,柴胡剂治疗组中沿肾小球毛细血管壁颗粒样沉积明显减少。口腔灌药柴苓汤对蛋白尿的作用未能得到证实。此实验提示柴胡剂可能通过某种途径改变了大鼠肾小球毛细血管壁的通透性。     

急性白血病患者淋巴细胞亚群及电泳观察

目的 探讨急性白血病患者T淋巴细胞亚群与淋巴细胞电泳间的关系。方法 T淋巴细胞亚群采用单克隆抗体致敏的红细胞花环直接法。淋巴细胞电泳采用单个核淋巴细胞电泳法。结果 急性白血病患者其快峰淋巴细胞数量增加，电泳率增加，其T3、T4淋巴细胞较正常减低，T4/T8比值较正常减低。结论 急性白血病患者细胞免疫功能减低。     

血清癌胚抗原酶标免疫测定的临床价值(单克隆抗体包被小珠法)

作者采用多个单克隆抗体反应,将一个具有快速动力学特征的单克隆抗体包被聚苯乙烯小珠的方法检测了乌鲁木齐市200例正常汉、维吾尔(维)、哈萨克(哈)等族和362例不同类型的癌肿患者血清癌胚抗原(简称CEA)含量。还对正常吸烟者和不吸烟者及各类癌肿患者血清CEA水平进行了比较和动态观察。结果表明:吸烟者CEA水平明显高于不吸烟者;恶性肿瘤病人血清中CEA高于正常范围的频度明显增加。     

增强CD16分子表达对CIK细胞杀伤胃癌细胞能力影响的研究

目的 初步验证增强表达CD16分子的CIK细胞联合EGFR单克隆抗体在体外对胃癌细胞的杀伤作用.探讨其治疗胃癌的临床应用前景.方法 将CD16基因插入载体pcDNA3.1构建PC-CD16真核表达载体,脂质体瞬时转染CIK细胞增强其CD16表达建立CD16高表达的CIK-CD16细胞系.该细胞系联合EGFR单克隆抗体进行51Cr杀伤实验检测其与胃癌SGC7901细胞结合及杀伤能力并与普通CIK细胞比较.使用流式细胞仪法检测治疗后肿瘤细胞周期与凋亡情况变化.结果 51Cr细胞杀伤实验结果提示:CIK-CD16细胞联合EGFR单克隆抗体对胃癌细胞株SGC7901杀伤率显著高于各对照组(P＜0.05).CIK-CD16细胞联合EGFR单克隆抗体处理后肿瘤细胞凋亡率上升.结论 初步的体外实验显示,增强CD16表达的CIK细胞联合EGFR单克隆抗体可有效增强免疫效应细胞对胃癌的杀伤作用,具有潜在的临床应用价值.     

抗血管内皮生长因子单克隆抗体Ranibizumab治疗湿性年龄相关性黄斑变性方案的探索

目的　观察渗出性年龄相关性黄斑变性经玻璃体内注射Ｒａｎｉｂｉｚｕｍａｂ治疗前后的变化情况。方法　对２０１２年１０月至２０１４年３月在我院经眼科相关检查确诊为湿性年龄相关性黄斑变性的患者３２例３４眼,均接受Ｒａｎｉｂｉｚｕｍａｂ（１０ｍｇ?ｍＬ－１） ０．０５ｍＬ玻璃体内注射,２２眼采用１＋ＰＲＮ方案,另１２只较为严重眼行３＋ＰＲＮ方案注射,使用国际标准糖尿病早期治疗研究（ＥＤＴＲＳ）视力表检查,术前查最佳矫正视力、眼压、ＯＣＴ以及眼底荧光血管造影或吲哚青绿血管造影,随访３～１１个月,分别于术后１周、２周、１个月、以后每个月观察黄斑ＯＣＴ、视力、眼压,必要时查ＦＦＡ、ＩＣＧＡ等相关指标并进行统计学分析。结果　所有患眼注射（２．１７±１．０５）次,随访３个月、６个月时ＥＴＤＲＳ视力分别为（３４．３７±１２．７５）个字母、（３８．０６±１１．３８）个字母,较治疗前分别提高（５．６３±３．１７）个字母、（９．２７±５．０１）个字母,差异有统计学意义（均为Ｐ＝０．００）。治疗后１个月,黄斑区脉络膜新生血管基底部宽度、高度分别为（２００１．８３±９０．７１）μｍ、（３４７．２３±６３．７３）μｍ,与治疗前（３８５．６３±９２．５７）μｍ差异均有统计学意义（均为Ｐ＝０．００）。治疗后１个月黄斑中心视网膜厚度为（３３６．９０±８２．１１）,与治疗前差异有统计学意义（Ｐ＝０．００）。随访期间未发现全身及眼部严重不良反应。结论　湿性年龄相关性黄斑变性的玻璃体内注射Ｒａｎｉｂｉｚｕｍａｂ治疗能明显缩小病灶,消退黄斑水肿,相应改善视功能,ＯＣＴ检查测量ＣＮＶ生物学参数具有无创、安全可靠、简单易行的优点,是一种重要的观察方法。     

以双质粒逆病毒载体系统快速建立梯度过表达hMTA1稳转单克隆细胞系的方法

目的利用逆病毒表达载体快速构建梯度过表达人MTA1稳转单克隆细胞系。方法利用噬菌斑原位杂交筛选人肺噬菌体文库,以阳性克隆为模板,RT-PCR获得人MTA1完整CDS序列。以逆病毒表达载体pMX为基础,经过多次酶切连接,构建逆病毒表达载体pMX-MTA1-flag-IRES-EGFP。将构建好的逆病毒载体系统,转染293-gag/pol细胞,包装出含该表达载体的逆病毒颗粒。以含病毒上清多次感染HCT116细胞,获得稳定转染MTA1的HCT116多克隆细胞系。将该多克隆细胞系按合适比例稀释后接种至10cm大皿,获得大量单克隆细胞系,以GFP为筛选标志,筛选不同荧光强度的单细胞克隆进行扩增并分析MTA1与GFP表达水平的线性关系。结果测序结果显示成功克隆出人MTA1表达序列。免疫荧光、Western Blot结果证实成功构建出梯度过表达MTA1的稳转细胞系。相关性验证结果显示构建的非融合载体MTA1与GFP的表达呈明显的线性相关,相关系数r=0.932,P<0.01。结论利用逆病毒表达系统,快速成功构建并筛选出MTA1与GFP非融合梯度过表达稳转单克隆细胞系,为MTA1基因功能研究提供了良好模型。该逆转录病毒平台可用于快速建立其他基因的稳转单克隆细胞系。