用ELISA检测肺癌患者血清中Endostatin的变化

目的建立快速敏感的ELISA方法检测肺癌患者血清内皮抑素(Endostatin)。方法对41例肺癌患者及22例良性肺病患者进行血清Endostatin测定并与20例正常人进行比较。结果肺癌患者体内Endostatin水平高于良性肺病患者和正常人。结论快捷的ELISA检测法可以成为人们在临床及基础研究Endostatin的新方法。     

口服转内皮抑素基因双歧杆菌制剂对肺癌的疗效

目的：探讨转人内皮抑素基因双歧杆菌口服制剂对肺癌的治疗效果。方法：选择肺癌患者118例,比较服用转内皮抑素基因双歧杆菌口服制剂前后患者症状和体征,影像学检查（X线、CT,MRI）,细胞学检查,纤维支气管镜检查及病理活检、免疫学检查（CEA）和生活质量等方面的变化。结果：服用转内皮抑素基因双歧杆菌口服制剂后患者症状和体征及生活质量等较服用前均有好转或明显好转,肺癌细胞生长被明显抑制。结论：转内皮抑素基因双歧杆菌口服制剂对肺癌有较好的治疗效果。     

重组人内皮抑素腺病毒抗肿瘤实验研究

目的肿瘤生长具有血管依赖性。内皮抑素为胶原X羧基末端裂解片段,是重要的内源性血管抑制因子。实验中利用重组人内皮抑素腺病毒(recombinanthumanendostatinadenorirus,Ad-hEndo)在肿瘤局部给药以探索其抗血管基因治疗的可行性。方法以Ad-hEndo感染体外培养肿瘤细胞,观察重组蛋白表达及其对培养的血管内皮细胞的抑制效应;在裸鼠A549肺癌模型中瘤内注射重组病毒,观察肿瘤抑制效应、剂量依从效应和毒副反应。结果不同感染复数的Ad-hEndo感染肿瘤细胞均表达重组内皮抑素蛋白,并能抑制血管内皮细胞的生长。动物实验中Ad-hEndo治疗组肿瘤体积及肺转移结节数明显低于对照组,且转移数与治疗剂量负相关。结论以腺病毒为载体的肿瘤局部血管基因治疗能抑制肿瘤新生血管形成进而有效抑制肿瘤生长和转移,其效应具有剂量依从性。     

小鼠内皮抑素基因真核表达载体的构建和表达

目的 构建小鼠内皮抑素（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）ｃＤＮＡ的真核表达载体并将其在体外培养的脑胶质瘤细胞内表达。方法 将带有分泌信号的小鼠ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎｃＤＮＡ克隆入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３,构建ＣＭＶ启动子控制的载体ｐｃＤＮＡ－ｓＥｎｄｏ,并将上述载体转染体外培养的脑胶质瘤细胞（ＳＨＧ４４）,采用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ鉴定其表达,应艇牛微血管内皮细胞抑制实验检测其活性,结果 成功地构建了真核表达     

转内皮抑制素基因治疗大鼠角膜新生血管

目的:探讨转染内皮抑制素(Endostatin)基因对酸烧伤引起的大鼠角膜新生血管的基因治疗。方法:通过限制性内切酶酶切反应、聚合酶链式反应、DNA测序及用NCBIBLAST软件与基因库序列比较的方法进行鉴定,鉴定后在大肠杆菌中扩增,用质粒纯化试剂盒抽提纯化;用750g/L硝酸银和250g/L硝酸钾混合烧灼液制作大鼠角膜新生血管模型,用结膜下注射脂质体包裹的质粒pBlast- hEndostatin来进行体内基因治疗。结果:实验证实质粒pBlast-hEndostatin含有人endostatin基因。结膜下注射脂质体包裹的质粒Tel押029-82245172Email押IJO.2000@163.compBlast-hEndostatin对酸烧伤引起的炎症性角膜新生血管有明显抑制作用,术后6,10,15d对角膜新生血管面积的抑制率分别为37%,40%,43%;对角膜新生血管密度也有明显的抑制作用,抑制率达40%。对角膜新生血管长度和角膜炎症细胞没有明显抑制作用。角膜新生血管面积与角膜水肿、角膜混浊呈正相关。结论:用结膜下注射脂质体包裹的内皮抑制素基因可以部分抑制酸烧伤引起的大鼠角膜新生血管。其作用机制是转基因产生的内皮抑制素蛋白直接抑制角膜新生血管的形成,而不是通过抑制炎症反应来抑制角膜新生血管的形成。     

Polymorphism in endostatin,an angiogenesis inhibitor,and prostate cancer risk and survival: A prospective study

Endostatin inhibits endothelial cell proliferation and migration, prerequisites of angiogenesis. A functional missense mutation (D104N) in endostatin was associated with an increased prostate cancer risk in a small study. We undertook a larger, prospective study within the Physicians' Health Study to examine D104N and prostate cancer risk and progression among 544 incident prostate cancer cases (1982–1995) and 678 matched controls. The association between endostatin genotype and cancer risk was estimated using logistic regression models. Among cases, Cox models were used to assess D104N and lethal prostate cancer. Given the role of endostatin in neovascularization of adipose tissue, we cross classified individuals on D104N genotype and body mass index (BMI). The genotype frequency was 1.3% homozygous (NN), 14.5% heterozygous (DN) and 84.2% wildtype homozygous (DD). There was no overall association between carriage of the N allele and prostate cancer risk (RR = 1.2, 95% CI: 0.9–1.6) or cancer‐specific mortality (HR = 1.2, 0.7–1.8). Cases with the polymorphic allele were less likely to be overweight (BMI 25 kg/m² or greater, 26%) compared to men wildtype homozygous (48%), p < 0.0001. Being overweight was associated with a 60% greater prostate cancer risk among those who were wildtype homozygous. In contrast, being overweight was associated with a 50% lower risk of cancer among those with the N allele. We did not confirm an earlier observation between the D104N polymorphism and prostate cancer. However, our data indicate that prostate cancer cases who carry the variant N allele are more likely to be overweight, and may be more susceptible to the angiogenic influences of obesity in prostate cancer pathogenesis. © 2009 UICC     

内皮抑素基因治疗对小鼠肿瘤组织内新生血管形成抑制作用的实验研究

目的:研究腺病毒介导的内皮抑素基因治疗对小鼠肺肿瘤组织内部血管的抑制作用。方法:皮下注射2×106LLC细胞至C57BL/6小鼠背部建立小鼠肺癌种植瘤模型,2周后瘤内注射2×109pfu内皮抑素腺病毒载体治疗。免疫组化检测内皮抑素在肿瘤组织的原位表达,观察治疗对肿瘤生长的影响。免疫组化标记计数肿瘤内部血管密度,观察治疗对肿瘤血管的影响。结果:Admendostatin治疗从第2周起就可明显减缓肿瘤生长速度,P<0.05。免疫组化显示治疗组肿瘤组织内皮抑素蛋白强阳性表达,对照组阴性或痕量表达。Admendostatin治疗组、空载体对照组和阴性对照组肿瘤血管密度用CD31和CD105抗原标记分别为37.5±4.6、65.2±5.8、68.5±4.5和10.5±3.2、39.7±5.6、42.4±4.8。治疗组与两对照组相比差异有统计学意义,P<0.05;空载体对照与阴性对照相比差异无统计学意义,P>0.05。结论:腺病毒介导的内皮抑素基因治疗可抑制小鼠皮下种植瘤的生长,其作用机制是抑制肿瘤内部新生血管的生成,应用CD105抗原标记可准确反映新生血管的变化。     

重组人血管内皮抑素联合顺铂治疗鼠B16恶性黑色素瘤移植模型的实验研究

目的 探讨重组人内皮抑素(恩度)联合顺铂化疗对恶性黑色素瘤的作用.方法 建立B16恶性黑色素瘤的裸鼠移植模型20只,随机分为恩度组、顺铂组、恩度联合顺铂组(联合组)和对照组.治疗后处死裸鼠,计算肿瘤体积抑瘤率,用免疫组化法测微血管密度(MVD)及瘤体血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果 恩度组、顺铂组和恩度联合顺铂组(联合组)的肿瘤抑制率分别为17.52%、45.72%和59.40%,联合组的肿瘤生长明显受到抑制(P＜0.05).免疫组化结果显示,联合组MVD低于其他组(P＜0.05);恩度组、顺铂组和联合组的VEGF表达均明显低于对照组(P＜0.05).结论 恩度联合顺铂有协同抗肿瘤作用,能有效抑制恶性黑色素瘤的生长.     

恩度微量泵入与腹腔注射联合表阿霉素治疗小鼠乳腺癌的疗效对比观察

目的 比较恩度微量泵入或腹腔注射联合表阿霉素对小鼠乳腺癌的疗效。方法 建立乳腺癌4T1细胞的BALB/c小鼠移植瘤模型,随机分为空白对照组（0.9%NaCl, ip）、标准对照组（EPI, ip）及4个实验组：（1）rhES（ip）+EPI（ip）;（2）rhES（pump）+EPI（ip）;（3）rhES（ip）;（4）rhES（pump）。监测肿瘤大小和小鼠体重,治疗第10天行小动物活体成像,治疗结束后采用免疫组织化学法测定瘤内血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）的表达。结果 恩度单药持续微量泵入（7 mg/（kg.d））疗效显著优于腹腔注射（P=0.01）;恩度持续微量泵入联合表阿霉素与双药联合腹腔注射疗效相当（P>0.05）,但前者不良反应略低。结论 恩度微量泵入联合表阿霉素治疗小鼠乳腺癌疗效与传统静脉滴注相当,为开展乳腺癌患者携泵回家治疗的可能性提供了实验依据,但还需要进一步的临床试验加以证实。     

重组人血管内皮抑素与薄芝糖肽联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究

目的：探讨重组人血管内皮抑素与薄芝糖肽联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的近期临床效果和安全性。方法选取2012年1月~2014年4月来本院就诊的102例经病理证实的晚期非小细胞肺癌患者,根据治疗方法,将患者分为两组。对照组48例单纯给予奥沙利铂(L-OHP)+培美曲塞(PEM)化疗方案;实验组54例在对照组基础上给予重组人血管内皮抑素和薄芝糖肽治疗。比较两组患者的临床疗效、生活质量KPS评分、药物毒性反应发生率以及外周血免疫功能变化情况。结果治疗后,实验组患者的近期临床疗效、生活质量KPS评分优于对照组(P<0.05)。两组患者治疗后的CD4+、CD8+均较治疗前降低,对照组降低更明显,两组治疗后的CD4+、CD8+差异有统计学意义(P<0.05)。结论重组人血管内皮抑素与薄芝糖肽联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌具有较好的近期效果,能提高患者在化疗过程中的生活质量,改善其免疫功能。