双波长等吸收紫外分光法测定玻璃体内苏拉明浓度

[目的]设计并论证检测玻璃体内苏拉明质量浓度的双波长等吸收紫外分光法.[方法]25只白兔摘除眼球冷冻后获取玻璃体,经过匀浆、沉淀、稀释等系列预处理后首先检验正常兔眼玻璃体个体差异性及紫外分光法测定玻璃体内苏拉明浓度的方法学特异性.接着建立标准曲线方程,考察检测方法的精密度和准确度,确立最低检测定量限,最后检测苏拉明在玻璃体内的样品稳定性.[结果]选取261 nm和269 nm两波长,全部6个个体及混合玻璃体的吸光值差△A(A261-A269)介于±0.002之间;外加高、低浓度苏拉明的曲线以及实际注药的高、低浓度苏拉明曲线与空白玻璃体的曲线走势一致且位于其上,各曲线的波峰波谷位置未见偏移;标准曲线方程为y=4 234 x 2,r=0.999 1;次低、中浓度、次高标准浓度点的日内相对标准差(RSD)分别为13.16%、9\67%、10.35%,日间RSD分别为17.59%、10.09%、11.11%,相对回收率分别为:(95.89±0.08)%、(96.69±0.07)%、(97.43±0.01)%;设计标准曲线的最低质量浓度45μg/mL;其日内、日间相对标准差分别为14.14%、15.94%,检验回收率为(94.92±0.01)%;常温组样品,8 h及以内稳定性尚好,之后不稳定.低温组及3次冻融组稳定性良好.[结论]在给定条件下,白兔玻璃体的个体差异可以忽略,双波长等吸收紫外分光法检测玻璃体内苏拉明浓度的方法学特异性好,精确度、准确度、灵敏度和样品稳定性符合规定要求,因此用该方法测定的玻璃体内药物浓度结果可靠.     

苏拉明对黄病毒类NS3蛋白质合成的影响

寻找有效的抗黄病毒类药物,为临床应用提供理论依据.在病毒吸附培养细胞HepG2后加入不同浓度的苏拉明,48 h后采取培养上清液及感染细胞,运用病毒滴度测算(plaque法)、Western blot法及RT-PCR法,检测其对病毒增殖的影响.结果显示用苏拉明50 μg/m1处理后产生的病毒量是对照组的51.8%,同时显示病毒NS3蛋白质合成量减少,而对病毒RNA无任何影响.提示苏拉明抑制病毒复制作用主要是阻碍了病毒NS3蛋白质的合成.     

苏拉明对肺癌血管生成的抑制作用

目的　研究苏拉明对肺癌血管生成的抑制作用及其机制。方法　采用细胞培养和免疫组织化学的方法离体研究肺癌A5 49细胞、人血管内皮ECV 30 4细胞VEGF及其受体 (Flt、KDR)的表达及苏拉明的影响。结果　苏拉明对肺癌细胞产生和分泌VEGF无影响 ;ECV 30 4细胞KDR、Flt的蛋白表达在苏拉明浓度为 0 .2 5ng/ml和 2 .5ng/ml时 ,受到显著抑制 ;而苏拉明浓度为 0 .2 5ng/ml和 2 5ng/ml时Flt的表达 ,以及苏拉明浓度为 2 .5ng/ml和 2 5ng/ml时KDR的表达则无明显变化 (与对照组比较 ,P >0 .0 5 ) ;苏拉明对A5 49、ECV 30 4细胞增生无影响。结论　苏拉明抑制肺癌血管生成的作用机制可能是通过抑制血管内皮细胞上的VEGF受体表达 ,减少VEGF与其受体结合所致。     

苏拉明对体外培养视网膜色素上皮细胞增殖的影响

目的　研究苏拉明 (suramin)对培养人视网膜色素上皮细胞 (retinal pigm ent epithelium,RPE)增殖的影响 .方法　将不同质量浓度的苏拉明 (1.5 ,15和 15 0 mg· L- 1 )加入RPE细胞培养液 ,采用四甲基偶氮唑盐 (tetrazolium,MTT)比色法 ,细胞分裂指数计数和核仁组成区嗜银染色(Ag NORs)检测苏拉明对 RPE增殖活力的影响 .结果　含有10 0 m L· L- 1小牛血清的培养液可以显著刺激 RPE的增殖(P<0 .0 1) ,无血清组 A值为 0 .19± 0 .0 1、含血清组 A值为0 .30± 0 .0 1;苏拉明抑制了 10 0 m L· L- 1血清条件下 RPE的增殖 ,呈剂量依赖性 ,最大抑制率达 5 1% ,3种浓度组 A值分别为 0 .2 9± 0 .0 1,0 .2 4± 0 .0 1和 0 .14± 0 .0 1,对细胞的形态无明显影响 .结论　苏拉明对血清刺激 RPE增殖有显著非毒性抑制作用     

苏拉明对RPE移行和增殖抑制作用的对照研究

目的:进一步研究苏拉明(suramin)对体外培养的人视网膜色素上皮细胞(RPE)移行和增殖的抑制作用。方法:(1)在RPE损伤愈合模型中观察150mg/L suramin对RPE移行的抑制作用。(2)采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定体外培养的人RPE在150mg/L suramin作用下的增殖活性的抑制。结果:(1)移行实验发现:150mg/L的suramin在24h对RPE的移行抑制率为48%;(2)增殖实验发现,150mg/L的suramin在3d时对RPE的增殖抑制率为51%。结论:suramin可以显著抑制细胞的移行和增殖,对细胞移行能力的抑制发生在抑制增殖作用之前,提示苏拉明对RPE的抑制可能是先抑制细胞的移行,尔后抑制细胞的增殖,为苏拉明的临床应用提供进一步相关依据。     

苏拉明对脑膜瘤细胞增殖及周期的影响

目的:观察苏拉明对脑膜瘤细胞增殖及周期的影响。方法:在无血清、10~(-8) MIGF-Ⅰ或含20％小牛血清条件下,递增浓度的苏拉明加入培养体系中,进行细胞计数和~3H-TdR摄取率测定,用流式细胞仪分析苏拉明对细胞周期的影响。结果:在不同情况下,10~(-4)M苏拉明显著抑制~3H-TdR掺合入DNA中(P<0.01),10~(-3)M苏拉明几乎完全阻断细胞的DNA合成;10~(-4)M苏拉明使细胞增殖下降47％～60％,并使S期和G_2/M期细胞比例显著增加(P<0.05和P<0.01)。结论:苏拉明在体外能有效抑制脑膜瘤细胞增殖,并使脑膜瘤细胞S期和G_2/M期延长或停滞。     

苏拉明在肝纤维化大鼠肝星状细胞增殖和凋亡中的作用(英文)

本研究旨在探究苏拉明在肝星状细胞（HSCs）增殖、凋亡中的作用。将HSCs株分别在不同浓度的苏拉明和无苏拉明的培养基中体外培养。应用MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术测定细胞周期和增殖指数;TUNEL法检测细胞凋亡率;显微镜下观察细胞形态学变化。结果显示苏拉明干预后,与对照组比较HSCs增殖率均显著减低;苏拉明(1.4×10^-5mol/L)干预72小时,HSCs增殖率降低最明显,且呈时间和剂量依赖性;苏拉明(1.4×10^-5mol/L)干预24小时,G₁期HSCs百分比显著升高,增殖指数显著降低,而HSCs凋亡率无显著变化。苏拉明对HSCs形态无显著影响。我们认为在实验剂量范围内,苏拉明可抑制HSCs增殖,而对HSCs凋亡无影响。     

人参皂苷Rg3联合苏拉明对小鼠肺癌生长影响及其机制的探讨

目的:探讨人参皂苷Rg3联合苏拉明对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑瘤作用及机制.方法:建立Lewis肺癌小鼠模型后,分为对照组、顺铂组、人参皂苷Rg3组、苏拉明组、人参皂苷Rg3+苏拉明联合组,药物干预16 d后,剥离移植瘤,称瘤质量,计算抑瘤率;免疫组化法测定各组移植瘤CD34的表达即肿瘤微血管密度(MVD)测定;逆转录PCR法测移植瘤MEK1/2和ERK1/2的mRNA;蛋白质印迹法测MEK1/2、ERK1/2及p-ERK1/2(磷酸化ERK1/2)蛋白的表达.结果:顺铂组、人参皂苷Rg3组、苏拉明组和人参皂苷Rg3+苏拉明联合组抑瘤率分别为19.7％、35.4％、35.9％和49.4％;对照组和药物干预组MVD计数分别为24.06±2.40、19.41±1.98、13.06±1.92、12.09士1.49和6.16±1.17,各药物干预组MVD较对照组低,差异有统计学意义,P＜0.01.备组ERK1/2mRNA相对量分别为(71.93±13.47)％、(56.43±11.01)％、(45.27±8.82)％、(43.29±7.48)％和(28.75±5.41)％,ERK1/2蛋白相对量分别为(104.18±9.78)％、(84.61±7.66)％、(76.71±7.25)％、(74.01±7.41)％和(51.69±5.29)％,p-ERK1/2蛋白相对量分别为(112.96±9.49)％、(87.86士6.77)％、(61.26±8.48)％、(38.60±10.66)％和(9.57±3.42)％,ERK1/2、p-ERK1/2在各药物干预组的mRNA及蛋白的表达均低于对照组,且联合组降低明显,差异有统计学意义,P＜0.01.结论:人参皂苷Rg3、苏拉明具有抑制小鼠Lewis肺癌生长的作用,且两药联用作用更明显,其机制可能与抑制细胞外信号激酶通路及血管生成有关.