The miR-143/145 Cluster,a Novel Diagnostic Biomarker in Chondrosarcoma,Acts as a Tumor Suppressor and Directly Inhibits Fascin-1

Chondrosarcoma is the second most frequent bone sarcoma. Due to the inherent chemotherapy and radiotherapy resistance and absence of known therapeutic targets, clinical management is limited to surgical resection. Consequently, patients with advanced disease face a poor prognosis. Hence, elucidating regulatory networks governing chondrosarcoma pathogenesis is vital for development of effective therapeutic strategies. Here, miRNA and mRNA next generation sequencing of different subtypes of human chondrogenic tumors in combination with in silico bioinformatics tools were performed with the aim to identify key molecular factors. We identified miR-143/145 cluster levels to inversely correlate with tumor grade. This deregulation was echoed in the miRNA plasma levels of patients and we provided the first evidence that circulating miR-145 is a potential noninvasive diagnostic biomarker and can be valuable as an indicator to improve the currently challenging diagnosis of cartilaginous bone tumors. Additionally, artificial upregulation of both miRNAs impelled a potent tumor suppressor effect in vitro and in vivo in an orthotopic xenograft mouse model. A combined in silico/sequencing approach revealed FSCN1 as a direct target of miR-143/145, and its depletion phenotypically resembled miR-143/145 upregulation in vitro. Last, FSCN1 is a malignancy-promoting factor associated with aggressive chondrosarcoma progression. Our findings underscore miR-143/145/FSCN1 as important players in chondrosarcoma and may potentially open new avenues for specific therapeutic intervention options. © 2020 American Society for Bone and Mineral Research.     

胃癌癌前病变中医证候与凋亡相关癌基因mRNA表达的关系

【目的】 探讨胃癌癌前病变(PLGC)中医证候与bcl-2癌基因和p53抑癌基因mRNA表达的关系。【方法】经胃镜及病理证实为PLGC病例共40例,其中中度异型增生24例,重度异型增生9例,不完全性结肠化生7例;兼气滞证10例,兼胃热证12例,兼血瘀证18例。采用原位分子杂交的方法检测胃粘膜活检标本bcl-2癌基因和p53抑癌基因mRNA表达。【结果】本组PLGC中,bcl-2癌基因和p53抑癌基因在转录水平均有过度表达,并随病变的进展而表达逐渐增高。在不同的兼证中,bcl-2癌基因和p53抑癌基因mRNA的表达强度依次为兼气滞证<兼胃热证<兼血瘀证。【结论】bcl-2癌基因和p53抑癌基因在PLGC中有异常表达,其表达与不同兼证有关且可能有一定的证候特异性。     

外源性p27KIP1基因对人胃癌细胞SGC7901的生物学效应

目的　研究外源性p2 7KIP1 基因对人胃癌细胞SGC790 1的生物学效应。方法　采用脂质体转染法将p2 7KIP1 全长cDNA转入胃癌细胞系SGC790 1中 ,通过免疫印迹分析以及RNA斑点杂交方法检测 p2 7KIP1 基因在蛋白质和mRNA水平的表达 ;用细胞活力实验显示转染 p2 7KIP1 基因对细胞增殖的作用 ;用裸鼠成瘤实验观察外源性 p2 7KIP1 基因对人胃癌细胞SGC790 1的体外生物学效应。结果　转染p2 7KIP1 的SGC790 1细胞在mRNA和蛋白质水平均有高水平p2 7KIP1 的表达。细胞活力检测显示在外加Zn2 +48h后细胞生长被抑制 42 % ;转染p2 7KIP1 的SGC790 1细胞在裸鼠体内的成瘤能力明显下降 (P <0 .0 1 )。结论　外源性p2 7KIP1 基因能抑制人胃癌细胞SGC790 1的生长及成瘤能力。     

习惯性流产史孕妇的T抑制细胞活性的分析

运用短寿命T抑制细胞(TS)活性测定的方法分别检测了9例流产史孕妇和8例正常孕妇的TS细胞活性;同时在反应体系中分别加入流产史孕妇血浆和正常孕妇血浆,以观察其对TS活性的影响。结果发现流产史孕妇和正常孕妇的TS细胞本身的活性并无差别;同时发现流产史孕妇血浆有降低孕妇TS细胞活性的作用,推测流产史孕妇血浆中可能存在能降低孕妇TS细胞活性的特异和/或非特异的“抑制因子”,而作为对照的正常孕妇血浆有提高孕妇TS细胞功能的效应,推测正常孕妇血浆中可能存在能使孕妇TS细胞活性提高的特异和/或非特异的“刺激因子”。这提示,在其自身血浆的作用下,流产史孕妇的TS细胞活性降低可能是导致习惯性流产的原因之一。因本文例数尚少,以上结论有待进一步研究。     

胆管癌中PTEN和p16抑癌基因蛋白的表达及其临床意义

目的　探讨抑癌基因PTEN和p16蛋白表达与胆管癌生物学行为的关系。方法　应用免疫组化方法检测 43例胆管癌组织和 10例慢性胆管炎胆管壁组织的PTEN和p16基因蛋白的表达 ,并综合分析它们与胆管癌临床病理因素间的关系。结果　在胆管癌组织中 ,PTEN和p16表达阳性率分别为3 9 .5 %和 44 .2 %。PTEN和p16表达与胆管癌的TNM分期、分化程度和转移密切相关 (P <0 .0 5 )。PTEN表达与p16表达呈正相关 (r =0 .62 ,P <0 .0 0 5 )。结论　检测PTEN和p16抑癌基因表达可作为评估胆管癌生物学行为和预后的参考指标。     

p15,血管内皮生长因子在胃癌中的表达及意义

目的 探讨Ｐ１５,血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）与胃癌临床病理因素的关系。方法 应用免疫组织化学（Ｓ－Ｐ）方法测定胃癌及胃良性病变中Ｐ１５,ＶＥＧＦ表达。结果 胃癌中Ｐ１５阳性率（４３．７５％）低于胃良性病变（６９．２３％）（Ｐ〈０．０５）。Ｐ１５表达与临床病理因素无关,ＢＥＧＦ阳必有癌组为７５．００％,胃良必 变组为７．６９％（Ｐ〈０．００１）,胃癌中浸润深主东超过 上层组为４２．８６％,浸润肌层     

肿瘤转移抑制基因nm23-H1蛋白在肺癌中的表达

为了解ｎｍ２３－Ｈ１基因在肺癌中的表达及与肺癌淋巴转移的关系,探讨其对肺癌淋巴结转移的抑制作用,对７８例肺癌存档石蜡块进行重新切片,采用ｎｍ２３－Ｈ１单克隆抗体进行免疫组化染色（ＳＰ法）。结果：ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达与肺癌组织类型和淋巴结转移无关（Ｐ＞０．０５）,而与肺癌细胞分化及发生有关（Ｐ＜０．０１）。结果提示ｎｍ２３－Ｈ１基因对肺癌的形成有重要作用,在肺癌中ｎｍ２３－Ｈ１基因不具有肿瘤转移抑制功能。     

逆转录病毒载体介导HSV1-tk/GCV肿瘤自杀基因治疗系统的构建

【目的】 探讨自杀基因抗肿瘤系统构建的方法。【方法】 用DNA重组技术将单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV1-tk)定向克隆入逆转录病毒载体pLXSN,并用限制性内切酶进行酶切及测序鉴定;用PolyFect Transfection试剂介导重组逆转录病毒转染入包装细胞系PT67,通过G418筛选建立稳定产病毒的细胞株,将病毒感染人胃癌细胞,检测HSV1-tk自杀基因治疗系统在体外的抗肿瘤效应。【结果】 经酶切鉴定和DNA序列测定,证明HSV1-tk基因成功定向插入到pLXSN载体中;重组病毒DNA转染包装细胞,筛选出对G418具稳定抗性的克隆PT67/tk,扩大培养,获取病毒滴度为4×10~4 cfu/mL的重组逆转录病毒培养液;感染胃癌细胞SGC-7901后再筛选出G418抗性克隆株SGC-7901/tk。丙氧鸟苷(GCV)对SGC-7901/tk有明显杀伤作用,对SGC-7901无明显毒性,证明该病毒表达HSV1-tk基因,表达产物具有生物活性。【结论】 将HSV1-tk定向克隆入逆转录病毒载体的方法可成功获取表达HSV1-tk(基因的逆转录病毒,成功建立了肿瘤自杀基因治疗系统,这将为进一步研究中医药对自杀基因抗肿瘤的增效作用奠定基础。