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1.
2.
目的分析一腓骨肌萎缩症家系的临床表现及不同基因检测方法的特点。方法收集一CMT家系8名成员临床资料,并应用等位基因特异性PCR-双酶切方法及多重连接依赖的探针扩增技术(MLPA)检测PMP22基因突变情况,同时选择60名性别、年龄无明显差异的健康人做为对照组。结果该家系中患病者以行走不稳、跨阈步态,伴有弓形足为主要临床表现。该家系中5名成员经等位基因特异性PCR-双酶切及MLPA方法均检测出PMP22基因重复序列,其中出现临床症状的有4名(Ⅱ3、Ⅱ9、Ⅱ11、Ⅲ7),未出现临床症状但基因检测结果示PMP22基因重复序列的为携带者有1名(Ⅲ5),家系中余3名成员及对照组60名均未见重复序列。结论基因检测在明确CMT诊断中起重要作用,且MLPA法筛查基因时操作更简便、灵敏度更高、特异性更好。 相似文献
3.
泪小管断离吻合术的新方法 总被引:1,自引:0,他引:1
我科自 1 995年元月以来 ,采用注射针头自制鱼钩形探针固定 ,对 5例泪小管断离行泪小管吻合术 ,取得较满意的效果 ,现介绍如下 ;1 一般情况 5例均为下泪小管断离 ,男性 ,年龄1 8~ 3 5岁 ,受伤原因 ,金属物击伤 2例 ,拳击伤 2例 ,摔伤 1例 ,创口组织边缘不整齐 ,手术时间均在伤后 2 4小时之内。2 材料与方法2 .1 鱼钩形探针的制作 ,用 5ml 1次性注射针头 ,尖端磨成钝园 ,弯曲成鱼钩形 ,酒精浸泡消毒备用。2 .2 2 %利多卡因作筛前神经阻滞及眶下神经阻滞麻醉 ,泪点扩张器扩张上泪点 ,鱼钩形探针自上泪点插入 ,顺着上泪小管到泪囊或… 相似文献
4.
目的建立非同位素标记的探针杂交测定外周血白细胞端粒DNA长度的方法,借此探讨无偿献血对献血者造血系统的影响。方法酚/氯仿提取基因组DNA,限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳,非同位素标记的探针Southern印迹杂交,化学发光X线片曝光显示杂交谱带,积分光密度扫描计算TRF值。结果所测样本获得了较好的低背景杂交谱带,测得35~40岁无偿献血组TRF值平均为11.73kb,相应无献血史对照组平均为11.78kb。结论建立了非同位素标记的探针检测端粒DNA的方法,用上述方法初步显示了固定的长期无偿献血并未对献血者的造血系统产生负面影响。 相似文献
5.
目的;探讨内毒素(LPS)诱导后家兔肺组织中诱生型一氧化氮合成酶的表达。方法:采用地高辛标记iNOS探针,并用Northern印迹杂交技术和比色法检测iNOS表达。结果:经内毒素导后iNOS在家兔肺组织中有表达,注射LPS5小时后表达量最大,24小时表达最减少。结论:地高辛标记iNOScDNA探针可较好地用于iNOS基因表达的研究。 相似文献
6.
目的:建立用地高辛(Digoxigenin,DIG)标记的寡核苷酸基因探针鉴定A群轮状病毒VP7G血清型的分子杂交技术,并应用该技术研究河南A群轮状病毒的G血清型分布。方法:根据轮状病毒编码糖蛋白VP7的基因核苷酸序列,选择该基因高保守区序列中与VP7G血清型高度相关的核苷酸片段,人工合成,并用DIG标记。在优选的杂交条件下进行杂交:结果:①G1、G2、G3和G4四种G血清型特异性寡核苷酸探针只与同血清型的轮状病毒参考毒株杂交,无交叉杂交现象。灵敏度和特异性达到放射性同位素32P标记的水平。②188份经PAGE确定的轮状病毒阳性标本中,79份(42.0%)、35份(18.6%)、15份(7.9%)分别与G1、G2或G3型探针杂交;未检出G4型;56份(29.8%)未能分型;3份分型特殊。结论:该G血清型分型技术具有高度特异性和灵敏度 相似文献
7.
8.
以聚合酶链反应(PCR)法在mRNA水平检测T淋巴细胞受体α链可变区基因表达为例,介绍用~(32)P标记的人工合成寡核苷酸探针对PCR产物特异性作阳性证实的方法。该法以干琼脂糖凝胶作为支持物、相对较为简便和省财。用Ca探针以干凝胶作支持物的杂交结果,证实29个Vα基因的PCR扩增中物均为特异性的,放射自显影的带型与位置和溴乙锭染色所示完全吻合。 相似文献
9.
以地高辛甙元随机引物法标记HBV-DNA探针,以此探针检测慢性乙型肝炎患者的血清、肝组织,同时以ELISA法检测血清HBeAg、HBcAb。结果:血清NBeAg阳性率27%(10/37),血清HBV-DNA检出率57.1%(20/35),两者有显著性差异。血清HBcAb阳性率78.4%(29/37),肝组织HBV-DNA检出率83.8%(31/37),两者无显著性差异。血清与肝组织HBV-DNA检出率有显著性差异。提示:血清HBV-DNA检测是较HBeAg更为准确客观反映血液带毒状况的指标。而准确反映肝脏带毒状况的指标是肝组织HBV-DNA检测。当HBeAg阴转,血清HBV-DNA阴性而肝组织HBV-DNA阳性时,需注意肝硬化及肝癌的发生。 相似文献
10.
应用地高辛标记探针检测以Vero传代细胞制备人用狂犬疫苗中残余细胞DNA含量 总被引:1,自引:0,他引:1
用地高辛标记正常Vero细胞DNA,制成特异探针,通过与制备人用狂犬疫苗的基质Vero细胞同源DNA杂交,检测人用狂犬疫苗中残余Vero细胞DNA含量,达到WHO规程中“以传代细胞制备生物制品中残余细胞DNA含量,每剂量DNA须低于100pg”的检测要求。检测灵敏度可达1pg,杂交反应特异性高,重复性好。测得以Vero细胞制备人用狂犬疫苗粗制原液中残余细胞DNA含量为100~1000pg/ml,超滤浓缩后为104~106pg/ml,纯化后低于10~100pg/ml。这对以传代细胞为基质的生物制品中残余细胞DNA的检测提供了一种常规可行的方法,因而具有重要的应用价值 相似文献