新生SD大鼠缺氧缺血性脑损伤早期线粒体内膜跨膜电势的变化

【目的】　了解缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)早期脑细胞△Ψm的变化。　【方法】　 7日龄新生大鼠随机分为正常对照组 (n =6) ,HIBD组 (n =3 6,分为HIBD后 0、1、2、3、4h时间点组 )。予以右颈总动脉分离结扎后再置8%O2 低氧舱 2 .5h ;断头处死后分离左右大脑半球制成单细胞悬液 ,加入终浓度为 1μmol的罗丹明 12 3于 3 7℃避光孵育 45min后 ,以流式细胞仪测定△Ψm并计算左右大脑半球△Ψm比值。　【结果】　正常P7SD大鼠左、右侧大脑半球脑细胞△Ψm分别为 ( 18.2 1± 1.2 6)MFL和 ( 18.93± 0 .74)MFL ,右∶左比值为 1.0 6。HIBD损伤使双侧大脑半球脑细胞△Ψm降低程度更明显 ,其中HIBD后 0h时△Ψm右∶左比值比正常时降低了 2 4.5 %(P <0 .0 5 )。HIBD后 1～ 3h时间内 ,△Ψm稍有回升。HIBD后 4h时HI损伤侧△Ψm值及右∶左比值均出现第二次降低现象 ,且程度更重 ,其中右 :左比值比正常时降低了 3 4%(P <0 .0 5 )。　【结论】　HIBD早期脑细胞△Ψm出现两次降低 (初次及二次降低 ) ,分别发生在HI损伤 0h和 4h时 ,提示有关改善线粒体功能的治疗尽量在△Ψm出现第二次降低前应用     

新生鼠脑损伤后松果体细胞的一氧化氮合酶与细胞凋亡关系的初步研究

为了探讨新生鼠发生缺氧缺血性脑损伤时松果体细胞的诱生型一氧化氮合酶 ( i NOS)表达与松果体细胞凋亡及形态学改变的关系 ,用 7日龄新生 Wistar大鼠 ,结扎左侧颈总动脉 ,术后 2 h吸入 8%浓度氧 2 h,建立新生儿缺氧缺血性脑病模型( HIBD)。分别于建模后 0 h、2 4h、48h处死动物 ,剥取松果体 ,观察松果体细胞的 i NOS表达及细胞凋亡 ,电镜观察松果体形态学改变。结果表明 :( 1)新生鼠脑损伤后松果体的 i NOS在 0 h、2 4h含量与对照组相比明显升高 ;( 2 )脑损伤后松果体凋亡细胞早期明显增多 ,尤以 0 h、2 4h为主 ;( 3)电镜观察 :脑损伤后松果体的形态学也以 0 h、2 4h改变为明显 ,出现线粒体明显肿胀、粗面内质网极度扩张、细胞变性。提示 :( 1)新生鼠缺氧缺血性脑损伤后 0 h、2 4h松果体细胞的 i NOS表达增加 ,以后逐渐下降 ,48h表达减少。 ( 2 ) TUNEL法原位检测细胞凋亡与 i NOS表达同步改变 ,i NOS表达对细胞凋亡有促进作用。 ( 3) i NOS表达和细胞凋亡参与了新生鼠缺氧缺血性脑损伤后松果体细胞形态学改变     

新生儿缺氧缺血性脑损伤血胃动素和促胃液素水平的相关性研究

目的 探讨新生儿缺氧缺血性脑损伤（HIBD）对胃肠激素分泌的影响及其相关性的意义。方法 应用放射免疫分析法（RIA）测定67例新生儿窒息患儿（包括45例HIBD患儿和22例非HIBD患儿），病程2d内，3d～5d，7d～10d，12d～15d血浆胃动素（MTL）和血清促胃液素（GAS）的含量。据临床表现，将HIBD组分为3个观察组，将血MTL和GAS水平的动态变化与其阴性对照组比较，并对其数据进行统计学处理。结果①HIBD患儿在整个病程中，血MTL和GAS升高明显（P＜0．05）。②非HIBD新生儿血MTL和GAS与对照组比较，差异无显著意义（P＞0．05）。③伴有惊厥、胃肠功能降低、持续的胃肠喂养困难，血MTL和GAS水平升高明显，并较其他组下降缓慢。结论 HIBD患儿存在血MTL和GAS分泌异常，血MTL和GAS水平与脑损伤的程度、胃肠功能及病情的恢复密切相关。     

Nerve protective effect of rhTPO and G-CSF on hypoxic ischemic brain damage in rats

Objective:To observe the protection effect of rhTPO and granulocyte colony stimulating factor(G-CSFi on brain nerve after hypoxic ischemic brain damage(HIBD)in neonatal rats,exploring new ways for the laboratory basis of treatment for hypoxic ischemic encephalopathy,and provide for possible.Methods:A total of 120 newborn SD rats aging 7 d were randomly divided into control group,model group,TPO group and G-CSF group,using the method of blockingleft carotid artery to establish HIBD model.The left carotid artery was only seperated rather than blocked in the control group;after modeling,saline injection,rhTPO treatment and G-CSF treatment were adopted in the model group,TPO group and C-CSF group respectively.Then 10rats of 4 groups were executed at Day 3,7,14 after modeling,brain tissue was extracted to observe the brain damage:Immunohistochemical method was used to observe the histopathological changes of brain tissue and changes of nest protein(nestin)expression.Results:Injured brain mass of model group,TPO group and G-CSF group were significantly higher than that of control group at corresponding time point(P0.05).Injured brain mass of TPO group and G-CSF group were significantly lower than that of model group(P0.05),and with the increase of age,more significant increasing trend.At Day 3 after modeling,the expression of nestin positive cells in cerebral cortex of model group,TPO group and G-CSF gnmp increased significantly than that of control group{P0.05);nestin positive cells of G-CSF group outnumbered TPO group significantly(P0.05).Conclusions:The early TPO,G-CSF treatment of HIBD rats can improve brain function after hypoxia ischemia by neural protection.G-CSF can promote the differentiation of neural cells proliferation,and reduee degeneration and necrosis of nerve cells.     

丰富环境干预后HIBD大鼠脑超微结构改变

目的研究丰富环境刺激对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠脑超微结构的影响.方法大鼠分为缺氧缺血组及丰富环境干预组,干预组予早期抚触和丰富环境刺激共28 d,利用透射电镜观察两组大鼠海马神经元超微结构、神经丝及突触情况.结果缺氧缺血组海马神经细胞固缩改变,线粒体肿胀,神经丝数量减少,排列稀疏,突触数量减少,突触间隙增宽,突触囊泡减少,突触后致密物变薄.干预组海马神经元和突触无明显异常.结论早期抚触及丰富环境刺激可以促进缺血缺氧的脑组织超微结构恢复,脑组织神经网络重建及脑的可塑性增加是其可能的机制之一.     

新生鼠缺氧缺血性脑损伤海马区内源性神经干细胞表达及雌激素对其影响的研究

目的 现察新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)海马区内源性神经干细胞的表达,研究雌激素对HIBD海马区内潦性神经干细胞表达的影响.方法 本研究将7日龄SD大鼠随机分组(n=8),取HIBD后12h、1、3、7d和14d为观察点,设立5个时间点的模型组和对照组(即假手术组).采用免疫荧光法检测各时间点海马区的巢蛋白(nestin)表达.雌激素干预实验设立对照组(C3组)、HIBD组(M3组)、空白溶剂组(N3组)及不同剂量17β-雌二醇组[10μg/(kg·d)(L3组)、100μg/(kg·d)(B3组)及1000μg/(kg·d)(H3组)].使用雌激素各组分别在大鼠HIBD造模后3d,每天颈部皮下注射17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)1次,连续3d,空白溶剂组(N3组)在HIBD后注射等量溶剂橄榄油.对所有实验动物腹腔注射5-溴脱氧尿苷嘧啶50mg/kg,2次/d,共3d.结果 HIBD后备组与对照组比较,海马区nestin表达在HIBD后1d开始升高,HIBD后3d达高峰,HIBD后7d仍高于对照组(P＜0.05).17β-E2干预各组(13、B3及H3组)海马区Brdu阳性细胞数较对照组(C3组)明显增加(P＜0.05).干预组随17β-E2剂量增加,海马区Brdu阳性细胞教增加(P＜0.05).结论 新生鼠HIBD后,海马区神经干细胞有激活反应,HIBD后3d最明显;雌激素可以促进HIBD后海马区神经干细胞的增殖.     

细胞凋亡与BCL-2在葛根素干预新生鼠缺血缺氧性脑损伤模型中的表达

目的探讨葛根素治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型的疗效.方法将28只7日龄SD大鼠随机分为四组.其中葛根素治疗组、生理盐水对照组、HIBD模型组各8只,均结扎右颈总动脉后吸入8%O22h,制成HIBD模型;假手术组4只.治疗组用葛根素1g/kg体重腹腔注射7d,对照组用生理盐水腹腔注射7d,HIBD模型组为空白对照.7d后处死,均采用原位末端标记(TUNEL)检测细胞凋亡和SP染色BCL-2.结果假手术组可见少量凋亡细胞;HIBD模型组与生理盐水对照组细胞凋亡数显著多于葛根素治疗组,P＜0.01;BCL-2的免疫强度低于葛根素治疗组,P＜0.05.结论葛根素对细胞凋亡有抑制作用,对BCL-2蛋白的免疫强度有增强作用,证实其可治疗新生鼠缺氧缺血性脑损伤.     

早期干预对宫内缺氧缺血大鼠脑电波及存活神经元数目的影响

目的探讨早期干预对促进宫内缺氧缺血（HIBD）大鼠脑损伤的修复作用。方法建立HIBD脑损伤大鼠动物模型，随机分为HIBD干预组、HIBD非干预组，以及正常干预组、正常非干预组。干预组采用早期视、触、听觉刺激和丰富环境的早期干预方法（术后24h至生后28d）。而后，采用脑电图检测大鼠脑功能。尼氏染色观察脑组织病理学变化。结果经过干预后，检测大鼠脑电图发现，HIBD干预组背景节律紊乱轻于HIBD非干预组，异常波形出现频率也较HIBD非干预组少见；尼氏染色结果显示，HIBD干预组海马存活神经元数目较HIBD非干预组多，正常干预组存活神经元数目较正常非干预组多。结论通过脑电波，以及存活神经元数目的比较结果表明，早期干预可能促进宫内HIBD大鼠脑损伤的修复。     

新生猪缺氧缺血性脑损伤时地塞米松对甲状腺功能的影响

目的 探讨新生猪缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damahe,ＨＩＢＤ）时地塞米松对甲状腺功能的影响。方法 在建立新生猪ＨＩＢＫ模型的基础上，对治疗组新生猪使用不同剂量地塞米松（５mg．kg＾－１和１mg．kg＾－１．d＾－１）共３天，分别于第２４小时，第４８小时及第７２小时采股静脉血收集血清，以放射免疫法（radioimmunoassay,ＲＩＡ）测定其游离Ｔ３（ＦＴ３）和游离Ｔ４（ＦＴ４）浓度。结果 ＨＩＢＤ新生猪     

缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马突触体素的表达及当归调控作用

目的探讨脑缺氧缺血对新生大鼠海马齿状回突触体素表达的影响及当归注射对其表达的调控作用。方法取7日龄健康SD新生大鼠33只,随机分为对照组、缺氧组和当归组各11只。缺氧组和当归组新生大鼠在无菌环境下结扎左侧颈总动脉,术后护理2 h后置于三气培养箱持续缺氧2 h,制作新生鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）模型,对照组仅行假手术,不结扎左侧颈总动脉、不缺氧。术后第8 d开始,缺氧组和对照组大鼠经腹腔注射生理盐水（8ml/kg）,连续7 d;当归组用等量当归注射液（250 g/L）代替生理盐水。于生后第22 d取大鼠脑组织,常规石蜡包埋、经海马切片,行突触体素（SY）免疫组化染色,图像分析海马齿状回SY阳性细胞的积分光密度（IOD）值。结果缺氧组大鼠海马齿状回SY阳性细胞的IOD值较对照组降低,而当归组SY阳性细胞的IOD值较缺氧组增高。结论脑缺氧缺血可降低新生大鼠海马齿状回SY的表达,而当归注射液对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠可能具有保护作用。