蓖麻毒素对小鼠血清谷胱甘肽转硫酶活性的影响

蓖麻毒素(RT)是一种强细胞毒性糖蛋白,它主要损伤肝脏,而血清谷胱甘肽转硫酶(GST)是一种肝损伤的敏感指标.因此测定小鼠RT中毒后血清GST活性,有可能从生化角度反映RT对肝脏的损伤.     

战争与恐怖的微生物学、生物学和化学武器的识别与防治

微生物学、生物学和化学武器早已用于战争与恐怖袭击。当前最主要的问题是公共卫生工作者必须掌握各种毒剂所致弛缓性瘫痪，葡萄球菌肠毒素B能引起胃肠道症状、肺损伤和中毒性休克综合征，产气荚膜杆菌可产生急性肺损伤，蓖麻毒素易诱发消化道坏死出血和急性肺损伤及肌注导致局部严重坏死，神经毒剂能引起胆碱能神经亢进综合征；氨、氯、氯乙烯、光气、硫芥、氮芥、催泪瓦斯和氯化锌则主要损伤呼吸系统，氰化物则造成严重组织缺氧而使呼吸衰竭。公共卫生工作人员和临床医生应当熟悉各种毒剂所致疾病的病理生理，临床表现和急救措施。     

抗蓖麻毒素A链人源化单域抗体的设计、原核表达及生物活性检测

目的 运用计算机辅助蛋白质分子设计的方法设计针对蓖麻毒素A链(RTA)的拮抗肽,实现在大肠杆菌B121中的可溶性表达,并对其生物学活性进行评价.方法 根据RTA的晶体结构、RTA-rRNA相互作用复合物模型,在CVFF(consistent-valence force field)、Amber力场下,对RTA的空间构象进行理论模拟,初步确定其生物活性功能域;然后针对该功能域设计小分子拮抗肽,并借助人抗体重链町变区骨架,在CDR3区对拮抗肽进行展示,用重叠延伸PCR全基因合成人源化的单域抗体并克隆至载体pET-32a(+);双酶切和DNA测序技术对构建的载体进行鉴定;IPrG诱导人源化的单域抗体表达,用镍离子亲和层析纯化,竞争ELISA和MTT法分别进行结合和中和活性检测.结果 从头搭建并设计合成了人源化的单域抗体,实现了其原核表达,并进行了牛物活性检测;建立了基于人源化的单域抗体的RTA和蓖麻毒素检测方法.结论 研究结果为新型蓖麻毒素小分子拮抗剂的研制奠定了理论和实验基础.     

新型抗癌药物：免疫毒素[英]／Lam L…∥Drug Future．-2004，29（6）．-609～612

靶向肿瘤细胞表面抗原的免疫毒素，可释放特异毒素到肿瘤细胞，而不伤害正常细胞。一旦毒素进入细胞，则通过其抑制蛋白合成或改变信号传递途径而杀死肿瘤细胞。血液系统恶性肿瘤是免疫毒素的最佳治疗对象，通常此种肿瘤表面标记呈高表达，且易于与药物结合。最早的免疫毒素之一，抗B4阻滞的蓖麻毒素，     

蓖麻毒素A链与底物作用的结构基础及其解毒剂的研究进展

蓖麻毒素是从植物蓖麻籽中分离得到的一种Ⅱ型核糖体失活蛋白,其A链（RTA）为效应链,具有N-糖苷酶活性,通过催化28S rRNA在S/R结构域第4 324位脱去一个保守的腺嘌呤,使核糖体60S亚基失活,从而阻断蛋白质合成途径,引起细胞死亡。RTA因其高细胞毒性,常常用于制备免疫毒素药物,尤其在恶性肿瘤的生物治疗上具有诱人的应用前景;或可能被用作恐怖袭击的生物战剂。本文对RTA与底物相互作用的结构信息及其解毒剂进行综述。     

重组蓖麻毒素B链蛋白疫苗的免疫原性及对接种小鼠的保护作用

正蓖麻毒素(ricin toxin,RT)来源于植物蓖麻籽(Ricinuscommunis),属于Ⅱ型核糖体失活蛋白(ribosome-inactivating proteins,RIP),由RTA和RTB两条多肽链组成,其中RTA是RNA N-糖苷酶,为毒性链;RTB是半乳糖结合型蛋白,为结合链,通过介导A链进入细胞内而发挥作用[1-2]。RT的毒性非常     

四种重要生物恐怖毒素液相芯片多重检测方法的建立

目的建立包括蓖麻毒素B(Ricin toxion B,RTB)、肉毒梭菌毒素A(Clostri botulinum toxin A,CBTA)、金黄色葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)及产气荚膜毒素ε(Clostridium perfringens toxinε,CPTε)在内的4种重要生物恐怖因子的多重液相芯片检测方法。方法采用双抗夹心法原理和液相芯片技术平台,通过优化偶联抗体浓度和检测抗体浓度以及抗原抗体最佳孵育时间,建立4种生物恐怖因子液相芯片多重检测方法。结果反应条件优化实验结果表明,RTB、CBTA、SEA和CPTε偶联抗体的最佳用量分别为20μg、40μg、80μg、80μg;RTB、CBTA、SEA和CPTε检测抗体的最佳稀释比分别为1∶5000、1∶1000、1∶2000、1∶4000;4种毒素抗原抗体最佳孵育时间为60min。多重检测结果表明,本研究建立的毒素液相芯片多重检测方法可有效检测上述任意1种毒素、任意2种毒素组合、任意3种毒素组合并能同时检测4种毒素。灵敏度检测结果表明,RTB、CBTA、SEA、CPTε检测灵敏度分别为1 ng/ml、10 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml。结论本研究建立的4种常见生物恐怖毒素液相芯片多重检测方法通过1次检测能同时检测RTB、CBTA、SEA、CPTε,是一种准确、灵敏、快速和高通量的检测方法。     

溶酶体参与蓖麻毒素A链降解途径的研究

目的:研究溶酶体在蓖麻毒素A链(RTA)细胞内转运过程中的作用.方法:用DNA重组技术,将溶酶体的靶向信号肽KFERQ连接在RTA的羧基端;将构建好的重组质粒pKK223.3-RTA和pKK223.3-RTA-KFERQ转化感受态大肠杆菌JM109,经IPTG诱导表达RTA和RTA-KFERQ蛋白;重组蛋白质用Blue-Sepharose6B亲和柱纯化,以MTT法分别测定纯化后的RTA与RTA-KFERQ蛋白对体外培养的HEPG2(人肝癌细胞)、Hela(人宫颈癌细胞)、A549(人肺癌细胞)3种细胞的毒性作用.结果:在大肠杆菌中成功表达了RTA和RTA-KFERQ.与RTA相比较,纯化的重组蛋白在体外有相似的蛋白质合成抑制活性,RTA-KFERQ对HEPG2、Hela和A549细胞的毒性分别减少了约49.87%、54.18%、88.68%.结论:RTA不能完全被溶酶体灭活,RTA可能存在溶酶体外的降解途径.     

蓖麻毒素及其SPDP修饰物对小鼠肝脏GSH含量的影响

目的：观察麻毒素（ＲＴ）修饰前后对小鼠肝脏毒性的影响。方法：ＲＴ用３－（２－吡啶二巯基）丙酸Ｎ－羟基琥珀酰亚胺酯中（ＳＰＤＰ）－－一种异型双功能交联剂,进行化学修饰,自下而上的ＳＰＤＰ衍生物（ＰＤＰ－Ｒ）,测定两者在不同剂量和时间对小鼠肝脏还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量的影响,以比较两者的毒性差别,结果：随着中毒剂量的增加和时间的延长,两者与可使小鼠肝脏ＧＳＨ含量下降,但ＲＴ组下降程度较ＰＤＰ－Ｒ