血清HBV-DNA模板两种提取方法的比较

目的　选择提取血清HBV -DNA模板的最佳实验。方法　用碱裂解法、直接煮沸法两种方法提取81份血清HBV -DNA模板然后进行对比分析。结果　直接煮沸法优于碱裂解法 ,具有方法简单易行且阳性率高于碱裂解法 ,两种方法结果经u检验后 ,具有显著性差异 (P <0 .0 1 )。结论　直接煮沸法提取血清HBV -DNA模板优于碱裂解法 ,是值得推荐的一种经济、简单、易行的实验方法。     

人巨细胞病毒核酸定量检测试剂盒临床应用及初步评价

目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)核酸定量检测试剂(PCR-荧光探针法)的临床使用及初步评价。方法:用浓缩一步法试剂与煮沸法试剂对192例临床收集的样本进行HCMV DNA检测并对比其结果,同时,将两种试剂的检测结果分别与HCMV-pp65抗原检测结果进行对比。结果:新型人巨细胞病毒核酸检测试剂与煮沸法试剂的阳性一致性百分比98.06%,阴性一致性百分比95.51%,总一致性百分比96.88%;对6例不符样本进行测序复核,并对复核后的结果进行Kappa检验一致性分析,结果 Kappa值=1.000,表明新型试剂的检测结果与煮沸法试剂及复核检测的结果具有很好的一致性。在与HCMV-pp5抗原检测结果的对比中,两种试剂均表现出较好的准确性。结论:人巨细胞病毒核酸检测试剂与煮沸法试剂检测结果具有很好一致性,操作简单快速,减少污染环节,并具有内标控制假阴性,结果准确,符合临床检测要求,具有较高的应用价值。     

急性淋巴细胞性白血病微小残留病与中枢神经系统白血病的相关分析

目的 探讨急性淋巴细胞性白血病（简称急淋）缓解时和缓解期微小残留病（MRD）的水平和变化以及与发生中枢神经系统白血病（CNSL）的关系。方法 用改良一步煮沸法提取脑脊液DNA，酚／氯方法提取骨髓DNA，巢式聚合酶链反应（PCR）法和极限稀释定量PCR法追踪检测微小残留病，数据处理用Kaplan-Meier方法及COX回归模型等。结果 46例急淋患儿缓解时骨髓MRD定量值与中枢神经系统白血病的发生呈正相关（COX回归模型，γ＝0．3496，P＜0．05），脑脊液MRD阳性可预示发生CNSL的相对危险度（P＜0．05）；缓解期脑脊液MRD持续阳性或由阴性转为阳性，发生中枢神经系统白血病的相对危险度明显增高（P＜0．05）。结论 缓解时骨髓MRD定量值和脑脊液MRD定性结果以及缓解期间脑脊液MRD的变化可以预示CNSL的危险度，MRD检测对判断急性淋巴细胞性白血病的预后和指导治疗有重要意义。     

两种灭菌方法对新生儿脐带套安全性能的影响

目的 探讨新生儿脐带套的安全有效灭菌方式.方法 将由气门芯、索线制作成统一规格的脐带套800根均分为改良组和传统组,改良组采用预真空压力蒸汽灭菌器灭菌8 min,传统组煮沸15 min后置75%乙醇溶液浸泡备用,两组有效期均为2周.结果 有效期内传统组消毒灭菌合格率84.00%,改良组合格率100%,差异有统计学意义(P＜0.01);两组跨越实验合格率和拉力比较,差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 采用预真空压力蒸汽灭菌法对脐带套灭菌效果可靠,不影响脐带套的拉力,可替代传统方法 .     

过碘酸钾法测定酒中锰加热步骤改进

作者经多次的试验探索，将过碘酸钾测定酒中锰由直接加热处理改为水浴煮沸法。结果表明，两法结果无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。水浴煮沸法精密度较好，平均回收率为９９．２％。能避免操作过程中因液体转移及洗涤所造成的误差。认为可取代直接加热处理。     

不同核酸提取方法用于HBVDNA定量检测的比较

目的 探讨两种国产乙型肝炎病毒(HBV)DNA荧光定量检测试剂的临床应用价值。方法 选取于该院就诊的慢性乙型肝炎患者共176例,分别用两种国产HBV核酸定量检测试剂测定其HBV DNA水平。比较分析“煮沸法”的A试剂与“一步法”的B试剂的线性范围及其灵敏度。结果 176例慢性乙型肝炎患者血清标本用两种试剂检测,A试剂检测为阳性的样本有71例,阳性率为40.3%(71/176);B试剂检测为阳性的样本有120例,阳性率为68.2%(120/176)。阳性率的一致性为100%,阴性率的一致性为53.3%,总的一致性为72.2%。结论 两种国产HBV DNA检测试剂盒对于HBV载量在低复制水平的血清标本具有很好的可比性,B试剂的扩增效率高、操作简便、定量结果准确、线性范围广等优点,具有较好的临床应用价值。     

三种气管套管消毒方法的效果观察

气管套管是为解除病人呼吸困难而行气管切开安置或喉癌病人行半喉切除或全喉切除术后安置的 ,安置后一般需要一段时间 ,病人呼吸困难改善后才能拔除 ,全喉切除者甚至需要终身戴管。这样 ,为了保持气管套管通畅及预防感染 ,气管套管的清洁消毒就很重要。目前 ,术后安置的气管套管的消毒仍使用传统的煮沸法 ,其不仅操作时间长 ,而且因气管内套管与外套管长时间脱离易引起外套管内壁痰液结痂 ( 1) ,全喉套管长时间脱离新伤口易引起气管造瘘口收缩狭窄 ,阻塞气道 ,影响通气效果。为了达到彻底消毒 ,且提高工作效率的目的 ,笔者采用 3%过氧化氢浸…     

巧用热水器溶解甘露醇结晶

甘露醇遇冷容易结晶,输液时常用煮沸法来进行溶解,溶解时易使标签破损脱落,甚至瓶体破裂,另外煮沸时水中杂质附着于瓶壁上易影响透明度,给护士查对工作带来不便。现在每个     

新型人乳头瘤病毒核酸检测试剂的临床应用探讨

目的：通过对比实验,对新型人乳头瘤病毒（6,11型）（HPV6/11）核酸检测试剂（以下简称“一步法”）的临床使用进行评估.方法：用1例HPV6/11强阳性样本进行10倍梯度稀释,使用一步法试剂和市场上常用的煮沸法试剂（对照试剂）分别进行检测,考评其精确度与灵敏度.用一步法试剂与对照试剂对275例临床收集的样本进行HPV6/11 DNA定性检测并对比其结果.结果：强阳性样本梯度稀释实验显示,一步法的检测结果重复性好,灵敏度高;一步法试剂与对照试剂的阳性一致性百分比为100％,阴性一致性百分比为98.84％,总一致性百分比为99.22％.对此结果进行Kappa检验一致性分析：结果Kappa值=0.982,表明一步法试剂与对照试剂检测的结果具有很好的一致性.结论：一步法试剂与已上市的对照试剂检测结果具有很好的一致性,并且操作简单、结果准确,符合临床检测要求,具有较高的临床应用价值.     

血清HBV—DNA模板不同提取方法的比较和选择

目的比较直接煮沸法、碱裂解法、浓缩碱裂解法和碱裂解3倍量提取法四种提取法提取样本核酸的差异;选择简便、可靠的检测乙肝病毒DNA（HBV—DNA）提取方法。方法运用中山医科大学达安基因股份有限公司生产的HBV—DNA试剂盒中推荐的浓缩碱裂解法,与直接煮沸法、碱裂解法、碱裂解3倍量提取法,分别提取血清样本核酸模板,用美国MJ实时荧光定量PCR仪检测HBV—DNA,对结果进行对比分析。结果共89例乙肝表面抗原（HB—sAg）阳性患者血清,浓缩碱裂解法和碱裂解3倍量提取法检测,两者均有62例HBV—DNA阳性（〉1000拷贝／ml定性为阳性）阳性率69．6％,阳性拷贝／ml均值用对数形式表示分别为（6．652±1．301）和（6．601±1．282）,两者间结果无明显差异（P〉0．05）;直接煮沸法检测出47例阳性（均在上述62例中）阳性率52．8％;碱裂解法测出57例阳性（均在上述62例中）阳性率64．0％,阳性拷贝／ml均值与浓缩碱裂解法和碱裂解3倍量提取法相比较,阳性检出率较低,有非常显著性差异（P〈0．01）和显著性差异（P〈0．05）。结论碱裂解3倍量提取法操作简单,省时、省材料,重复性好,阳性检出率与浓缩碱裂解法一致,建议使用碱裂解3倍量提取法检测HBV—DNA。