酶法浸提枸杞的研究

通过对外源酶酶解枸杞效果的研究，结果表明：外源酶能显著提高枸杞浸提液中可溶性固形物和营养成分的含量，其单一纤维素酶和木瓜蛋白酶浸提枸杞的适宜pH值分别是5．0～5．5和pH值6．0，适宜的酶质量浓度分别为0．20g／dL和0．40～0．60g／dL，温度分别为55．C和65℃，适宜时间都为50-60min；两种酶组合浸提枸杞的较适pH值、温度、时间和酶组合分别为pH值5．5～6．0，55-60℃．50min和0．20g／dL纤维素酶＋0．40g／dL木瓜蛋白酶。     

其他植物产品专利题录及专利号

●含姜根、茴香籽、胡椒薄荷、从番木瓜树衍生的木瓜蛋白酶、从菠萝衍生的菠萝蛋白酶等组方的饮食和维生素补充剂治疗和减轻胃肠道功能紊乱US2006115468-A1●山楂、枣和人参提取物治疗肝癌或胃癌、前列腺癌或乳腺癌WO2006059104-A1●含银杏叶、黄杞、茶叶、香蜂花叶和茎以及花生皮提取物的过敏原减活剂用于花粉或螨类过敏原失活JP2006143700-A●以香液和山茶油为活性成分的皮肤外用剂防治过敏、炎症和瘙痒病症JP2006143659-A●含玛卡和王浆提取物的药品和食品补充剂防治自主失调如身体不适、疲劳和头痛JP2006143664-A●用石胡荽属Cen…     

薄层层析和反相高效液相色谱检测木瓜蛋白酶催化合成的Aspartame及其中间产物

本文报道以TLC和HPLC法检测以木瓜蛋白酶在水-乙酸乙酯两相反应体系中合成的Aspartame及其中间产物（I）（Ⅱ）。TLC条件为：展开剂（正丁醇：冰醋酸：水=3：1：1），展开时间（4-5h)，检测（荧光检测253.7nm，1%茚三酮丙酮溶液显色）。HPLC条件为：流动相（乙腈：水=45：55），流速1ml/min，检测（紫外检测260nm)，进样量20ul,灵敏度6，纸速1-4mm/min，分析周期10min。该方法简便、准确、灵敏度高。用该方法也证实以木瓜蛋白酶催化合成的Aspartame及其中间产物（Ⅱ）与以嗜热蛋白酶（Thermolysin)催化合成的Aspartame及其中间产物（Cbz-Asp-PheOMe)完全一致。     

玻璃酸钠对关节腔内注入木瓜蛋白酶所致兔膝关节退行性改…

采用在兔膝关节内注入木瓜蛋白酶造成的膝关节退行性改变模型，考察关节腔内长期多次注射玻璃酸钠对这种退行性改变的抑制和改善作用。结果表明：玻璃酸钠对已造成退行性改变的关节软骨有减轻和改善其病变程度的作用。     

SARS-CoV-2 PLpro在对IFN-α应答的肝细胞中独立诱导过度炎症相关坏死性死亡

目的：探讨新型冠状病毒（SARS-CoV-2）木瓜蛋白酶样蛋白酶（PLpro）在对干扰素α(IFN-α)应答的肝细胞中所介导的功能蛋白质组改变及其效应机制。方法：构建稳定表达PLpro的三株单克隆Huh7肝细胞（PLpro1～3）和对应的空载细胞（NC）,分别以IFN-α刺激各株细胞建立处于IFN-α应答状态的肝细胞模型,采用数据非依赖质谱分析PLpro和NC组的定量蛋白质组,以生物信息学分析,预测PLpro对IFN-α应答性肝细胞的作用机制,并采用RT-qPCR、Western blot、细胞促炎因子水平分析、乳酸脱氢酶（LDH）细胞毒性分析和Annexin V-Alexa Fluor 647/PI凋亡检测等方法对上述机制进行生物学验证。结果：IFN-α可显著上调空载Huh7细胞株（NC细胞）中的ISG化蛋白（P<0.01）,而相同条件下,PLpro细胞蛋白的ISG (IFN-stimulated gene)化修饰被显著下调（P<0.01）,表明PLpro细胞株表达了具去ISG化活性PLpro,提示本研究成功建立了细胞模型。质谱分析鉴定和定量得到5 619个交集蛋白质和1...     

不同自身抗体吸收法的比较与分析

目的：通过比较和分析不同的自身抗体吸收法,寻找一个合适、经济和有效的自身抗体吸收法,以更好地筛选和鉴定自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者血清中的同种抗体。方法取20例 AIHA 患者血清,分别采用木瓜蛋白酶自身红细胞温吸收法、聚乙二醇（PEG）自身红细胞温吸收法、木瓜蛋白酶同种红细胞吸收法和 PEG 同种红细胞吸收法对自身抗体进行吸收,比较吸收时间、吸收次数、吸收后血清抗体鉴定结果。结果 PEG 同种红细胞吸收法平均每例吸收1．8次,明显低于木瓜蛋白酶同种红细胞法的平均值4．1次（P＜0．05）。两种方法平均吸收时间分别为90．0 min 和225．1 min ,二者比较差异有统计学意义（P＜0．05）。两种吸收方法同种抗体的特异性、效价检测结果一致,均为 RH 系统的同种抗体。结论 PEG 法可以快速、经济和有效去除 AIHA 患者血清中的自身抗体,便于同种抗体鉴定。     

化香树果序多糖脱蛋白工艺研究

目的 应用木瓜蛋白酶法脱除化香树果序多糖中蛋白,探究最佳工艺条件。方法 通过对酶用量、酶作用时间、酶作用温度及pH值四个单因素考察,采用响应面优化法试验分析。结果 最佳工艺条件,木瓜蛋白酶用量1.508%,温度65 ℃,酶解时间92.3 min,pH＝7.0,多糖蛋白脱除率为90.90%,多糖保留率为84.06%。结论 木瓜蛋白酶法是一种较优的多糖脱除蛋白方法。     

地黄梓醇干预早期膝骨关节炎大鼠膝关节滑膜组织中炎症相关因子的表达

文题释义：地黄梓醇：是从地黄中提取出来的一种环烯醚萜苷化合物,2015 版《中国药典》明确规定了地黄梓醇可作为地黄质量控制的指标。地黄梓醇的药理作用包括抗细胞凋亡、抗炎等。半乳糖凝集素3：具有争议的促炎或抗炎活性,取决于各种因素,包括其细胞内或细胞外定位以及与这些过程有关的靶细胞。一方面半乳糖凝集素3通过清除凋亡的中性粒细胞可能有助于消除炎症;另一方面,半乳糖凝集素3通过加强巨噬细胞、肥大细胞和自然杀伤细胞以及T和B淋巴细胞的活化而显示出大部分促炎作用。背景：在膝骨关节炎早期,滑膜分泌炎症递质可能是诱导膝骨关节炎发病的重要因素之一,伴随着膝骨关节炎的进一步加重。 目的：观察不同浓度地黄梓醇对早期膝骨性关节炎大鼠膝关节滑膜组织中白细胞介素1β、半乳糖凝集素3、钙结合蛋白S100A12表达水平的影响,探讨地黄梓醇治疗早期膝骨性关节炎的作用机制。方法：从48只成年雄性Wistar大鼠中随机抽取14只为正常对照组,其余34只为模型组,实验开始后第1,4,7天于右膝关节腔注射4%木瓜蛋白酶联合0.03 mol/L半胱氨酸溶液0.2 mL制备早期膝骨关节炎模型。实验开始后第10天随机抽取正常对照组大鼠4只,造模组大鼠4只,采用苏木精-伊红染色及Mankin、OARSI评分进行模型验证,将模型组剩余30只大鼠采用随机数字法分为模型对照组、地黄梓醇低剂量组、地黄梓醇高剂量组,每组10只。验证造模成功后第2天,地黄梓醇低剂量组、地黄梓醇高剂量组灌胃0.2 mL/kg相应浓度的地黄梓醇,正常对照组、模型对照组灌胃等量生理盐水,均为1次/d,连续灌胃28 d。取各组大鼠右膝关节滑膜组织,采用ELISA法检测各组大鼠滑膜组织中白细胞介素1β、半乳糖凝集素3、钙结合蛋白S100A12水平。结果与结论：①模型组Mankin评分和OARSI分均显著高于正常对照组,差异有显著性意义(P < 0.05);②与正常对照组比较,模型对照组滑膜组织中S100A12、白细胞介素1β、半乳糖凝集素3水平显著升高(P < 0.01);与模型对照组比较,地黄梓醇低剂量组滑膜组织中S100A12、白细胞介素1β、半乳糖凝集素3水平有所降低(P < 0.05),地黄梓醇高剂量组降低更明显(P < 0.01);③结果表明,地黄梓醇可通过降低滑膜组织中相关炎症因子水平来减轻炎症反应从而减缓膝骨关节炎进展。ORCID: 0000-0002-0811-4737(张斌)中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

木瓜蛋白酶溶栓效果观察

0 引言 精制木瓜蛋白酶(papain)是含木瓜蛋白酶、木瓜肽酶A、木瓜凝乳蛋白酶A和B的多酶复合体[1],应用广泛.本文就papain在体内是否具有纤溶酶原激活作用进行了探讨.     

抗体Fc片段的离子交换法制备和印渍法鉴定

免疫球蛋白经羧甲基纤维素(CM22)柱交换,并用增加盐浓度分段洗脱,可分得4个蛋白峰。其中,用0.1M醋酸钠缓冲液洗脱出的3个蛋白峰具Fc性质,而用0.225M醋酸钠缓冲液洗脱的蛋白质不与葡萄球菌A蛋白(SPA)相结合。将具Fc性质的组分合并,由木瓜蛋白酶消化后,各蛋白质片段再经CM22柱分段洗脱,得到5个蛋白峰。分离出的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳后转移至滤膜上。膜上各蛋白质用SPA-HRP探针作酶分析,从而鉴定IgG的Fc片段。实验提示,0.225M醋酸钠缓冲液洗脱出的蛋白蜂是抗体Fc片段。