一叶秋碱诱导人白血病HL—60细胞凋亡

目的 研究一叶秋碱能否诱导ＨＬ－６０细胞凋亡,方法 用ＭＴＴ法检测一叶秋碱对细胞增殖影响;应用流式细胞仪检测凋亡细胞数;采用琼脂糖凝胶电泳法观测ＤＮＡ碎片,透射电镜观察凋亡的形态改变,结果：一叶秋碱５－８０ｍｇ．Ｌ＾－１能诱导ＨＬ－６０细胞凋亡,电镜观察到典型的凋亡形态学改变,电泳呈现出阶梯状条带,流式细胞仪检测到凋亡率随剂量的增高而升高,ＭＴＴ法示一叶秋碱抑制ＨＬ－６０细胞增殖,并且呈时间,剂量     

雌激素通过对p38和p44／42 CCDPK的相反作用阻止TNF—α诱导牛主动脉内皮细胞凋亡

目的：研究雌二醇（17β－estradiol,E2)对肿瘤坏死因子α（TNF－α）诱导牛主动脉内皮细胞（BAEC）凋亡的影响及机制。方法：BAEC培养并传代于DMEM.BAECHoechst 33258染色后用荧光显微镜观察形态学变化及计数凋亡细胞;用MTT法测定细胞活性;用琼脂糖凝胶电泳分析DNA降解;用Western blot法检测磷酸化p38和p44/42 CCDPK表达。结果：TNF－α诱导BAEC产生典型的凋亡细胞形态学变化（核浓梁,核碎裂）和DNA断片。E2（0.1pmol/L-100nmol/L)能增强TNF－α诱导的磷酸化p44/42表达,同时抑制p38 CCDPK的活化而浓度依赖性阻止TNF－α诱导的BAEC凋亡;E21nmol/L明显减弱TNF－α所致DNA断裂;p44/42 CCDPK抑制剂U0126可拮抗E2的作用。结论：雌激素通过激活p44/42 CCDPK ,同时抑制p38 CCDPK而产生的抗凋亡效应,是其使内皮细胞存活的重要机制。     

HPLC法测定强力痔根断片中芦丁的含量

目的建立高效液相色谱测定强力痔根断片中芦丁含量的方法。方法选用C18色谱柱,甲醇-水-冰醋酸(40∶60∶1.8)为流动相,检测波长为354nm,柱温30℃,结果芦丁在6.008～48.064μg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,(r=0.9999),平均回收率100.3%,RSD=0.5%(n=5)。结论该方法简便、快速、分析结果准确、稳定,专属性强,可用于强力痔根断片的质量控制。     

Effect of manoalide on apoptosis induced by deprivation of growth factors in vascular endothelial cells

研究ｍａｎｏａｌｉｄｅ对除去生长因子（ａＦＧＦ和血清）而诱导的血管内皮细胞凋亡的影响．方法：通过细胞形态观察,ＤＮＡ凝胶电泳及荧光显微术等方法确定ｍａｎｏａｌｉｄｅ对细胞凋亡的抑制或促进作用．结果：向去除ａＦＧＦ和血清的培养液中加低浓度的ｍａｎｏａｌｉｄｅ（１－４μｍｏｌ·Ｌ－１）,培养细胞４８ｈ,细胞的脱壁和ＤＮＡ片断化受到抑制;ｍａｎｏａｌｉｄｅ浓度为７μｍｏｌ·Ｌ－１时,促进细胞脱壁和ＤＮＡ片断化．结论：低浓度的ｍａｎｏａｌｉｄｅ（２μｍｏｌ·Ｌ－１）抑制血管内皮细胞凋亡,而较高浓度的ｍａｎｏａｌｉｄｅ（７μｍｏｌ·Ｌ－１）促进该细胞凋亡．     

Securinine induced apoptosis in human leukemia HL 60 cells 1

目的：研究一叶秋碱能否诱导ＨＬ６０细胞凋亡．方法：用ＭＴＴ法检测一叶秋碱对细胞增殖影响;应用流式细胞仪检测凋亡细胞数;采用琼脂糖凝胶电泳法观测ＤＮＡ碎片;透射电镜观察凋亡的形态改变．结果：一叶秋碱５－８０ｍｇ·Ｌ－１能诱导ＨＬ６０细胞凋亡．电镜观察到典型的凋亡形态学改变,电泳呈现出阶梯状条带,流式细胞仪检测到凋亡率随剂量的增高而升高．ＭＴＴ法示一叶秋碱抑制ＨＬ６０细胞增殖,并且呈时间、剂量依赖性,药物作用１２ｈ的ＩＣ５０（９５％可信区间）分别为２７（１５－４７）ｍｇ·Ｌ－１．结论：一叶秋碱诱导ＨＬ６０细胞凋亡     

Oxidized low-density lipoproteins induce apoptosis in vascular smooth muscle cells

目的：研究氧化型低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）诱导血管平滑肌细胞凋亡．方法：梯度超速离心分离血浆ＬＤＬ，以ＣｕＳＯ４１０μｍｏｌ·Ｌ－１氧化，观察ｏｘＬＤＬ对培养兔胸主动脉平滑肌细胞的损伤作用．Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８荧光染色观察形态学改变，抽提细胞ＤＮＡ进行琼脂糖凝胶电泳．结果：ｏｘＬＤＬ３００ｍｇ·Ｌ－１与ＶＳＭＣ共温育２４ｈ诱导典型的凋亡形态学变化和ＤＮＡ降解，但天然低密度脂蛋白无此作用．当ｏｘＬＤＬ为４００ｍｇ·Ｌ－１或温育时间延至４８ｈ，上述变化更加明显．硫酸葡聚糖２０ｍｇ·Ｌ－１和ＢＨＴ５０μｍｏｌ·Ｌ－１对此作用无影响．ＬＰＣ１２５μｍｏｌ·Ｌ－１无诱导凋亡作用．结论：ｏｘＬＤＬ诱导血管平滑肌细胞凋亡，氧自由基和ＬＰＣ不参与这一过程．     

放射工作人员微核和染色体断片畸变调查分析

目的从多角度分析小剂量慢性放射辐射对放射工作人员遗传物质的损害影响,借助微核和染色体断片畸变检测手段,探究具针对性的放射防护建议和措施。方法研究放射工作人员年龄、放射工龄和职业照射种类对微核和染色体断片畸变异常率有无显著影响,进一步分析各年龄组、各放射工龄段及各职业照射种类的微核及染色体断片畸变发生发展规律。结果放射工作人员的年龄对微核异常率影响显著,差异有统计学意义(χ~2=90. 180,P=0. 000 0. 05),随着年龄增长,微核异常率呈下降趋势。放射工作人员年龄对染色体断片异常率差异有统计学意义(χ~2=9. 015,P=0. 029 0. 05),其中31～40岁年龄组染色体断片畸变率最低。放射工作人员工龄对微核异常率差异有统计学意义(χ~2=34. 728,P=0. 000 0. 05),随放射工龄增长,微核异常率呈下降趋势。放射工作人员放射工龄对染色体断片异常率差异无统计学意义(χ~2=3. 323,P=0. 344 0. 05)。职业照射种类对微核异常率差异无统计学意义(χ~2=9. 873,P=0. 079 0. 05),其中介入放射学微核异常率最高。在合理的放射防护建议下,微核复检的微核异常率显著低于初检结果(χ~2=425. 100,P=0. 000 0. 05)。结论小剂量电离辐射对放射工作人员细胞遗传学的影响与放射工作人员年龄、放射工龄和职业照射种类密切相关,通过微核和染色体断片畸变检测指标,针对性地为放射工作人员施行放射防护、改善工作环境,切实保障劳动者的身体健康。     

Active site of trichosanthin acting as a ribosome-inactivating protein

天花粉蛋白核糖体灭活活性部位的定位方法：羟胺特异裂解天花粉蛋白唯一ＡｓｎＧｌｙ肽键．制备性凝胶电泳获ＨＡＴｆ１和ＨＡＴｆ２二片段．免疫印迹确定天花粉蛋白上不同表位并筛选抗体．兔网织红无细胞系统测定天花粉蛋白及片段对蛋白合成的抑制活性．结果：ＨＡＴｆ１和ＨＡＴｆ２纯度各达９６６％和８０５％．ＨＡＴｆ１保留完整天花粉蛋白的抑制活性．第１４号和第１６号抗天花粉蛋白单抗与二片段显示不同免疫反应性，并用于封闭试验．第１４号单抗能封闭天花粉蛋白及ＨＡＴｆ１活性，而第１６号单抗则否．结论：天花粉蛋白抑制蛋白质生物合成的活性部位位于ＨＡＴｆ１侧，近二部分交界．     

高糖增强过氧化氢诱导牛主动脉内皮细胞凋亡(英文)

目的:研究高糖对过氧化氢(H_2O_2)诱导牛主动脉内皮细胞(BAEC)凋亡作用。方法:BAEC培养并传代于正常葡萄糖(5.5 mmol·L~(-1))和高糖(25mmol·L~(-1))中,经H_2O_2处理24 h后,Hoechst 33258染色,荧光显微镜观察形态学变化及凋亡细胞计数;琼脂糖凝胶电泳分析DNA降解,Western blot法检测磷酸化p38 CCDPK表达。结果:H_2O_2诱导BAEC产生典型的凋亡细胞形态学变化(核浓染,核碎裂)。在100-300 μmol·L~(-1)范围内,正常糖和高糖BAEC经H_2O_2处理后,浓度依赖性诱导细胞凋亡和磷酸化p38 CCDPK表达。高糖条件下诱导BAEC DNA降解浓度低于正常糖BAEC,细胞凋亡率和磷酸化p38 CCDPK表达均显著高于正常糖组(p<0.05)。结论:高糖促进H_2O_2诱导BAEC凋亡,可能与其增强磷酸化p38 CCDPK的表达相关。