土耳其斯坦东毕吸虫磷酸丙糖异构酶基因的克隆及其序列分析

目的 克隆土耳其斯坦东毕吸虫磷酸丙糖异构酶的全长基因。方法 根据日本血吸虫和曼氏血吸虫磷酸丙糖异构酶基因的保守区设计引物，利用RT—PCR扩增出土耳其斯坦东毕吸虫磷酸丙糖异构酶基闪的大片段，再结合RACE技术分别得到磷酸丙糖异构酶基因的3’端和5’端，将3部分序列拼接后获得磷酸丙糖异构酶基因全长cDNA序列，并提交GenBank。结果 成功克隆了土耳其斯坦东毕吸虫磷酸丙糖异构酶基因全长cDNA序列并提交GenBank，登录号为DQ092331。结论 土耳其斯坦东毕吸虫磷酸丙糖异构酶基因全长cDNA的克隆为进一步表达及其生物学性能的分析提供了理论基础。     

科技

中德科学家联手分析蛋白质拓扑结构和功能；纳米载体新疗法准确杀癌；绝症“渐冻症”找到病因。[编者按]     

烯烃的热力学性质的拓扑研究

目的：寻找一种性能优良的拓扑指数，方法：根据分子图的邻接矩阵和距离矩阵提出一种新的拓扑指数P1^*,P2^*,P3^*,p^4*。结果，拓扑指数P1^*,P2^*,P3^*,p^4*与烯烃的热力学函数－△Hf(g),S(g),△Gf(g)均有相关性，其复相关系数均在99．6％以上。结论：拓扑指数P1^*,P2^*,P3^*,p^4*与烯烃的热力学函的多种物理化学性质均有良好的相关性。     

贲门腺癌细胞多药耐药性及化疗药物敏感试验的临床应用

选取1999年6月～2000年6月我院和江苏省人民医院胸外科收治的贲门癌患者26例，均经胃镜检查诊断为贲门腺癌后行根治性切除术，手术未能切除者不纳入观察组，切除标本采用免疫组织化学法进行分析。对贲门腺癌手术切除标本中多个耐药基因糖蛋白P-170、谷胱甘肽S-转移酶(GST-π)和DNA拓扑异构酶-Ⅱ(TOPO-Ⅱ)的表达进行比较，并结合临床进行体外药物敏感试验后，给予患者个体化化疗。经3年的观察，现报道如下。     

耐药相关蛋白P-gp、GST-π、TopoⅡ在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的探讨原发性肝癌组织中的P-糖蛋白（P—glycoprotein，P—gP）、谷胱甘肽-S转移酶-π（glutahione-S—transferase-π，GST-π）、DNA拓扑异构酶Ⅱ（DNA—topoismerase，TopoⅡ）耐药基因的表达及其临床意义。方法采用免疫组化方法检测35例肝癌组织、20例癌旁和10例肝硬化组织中P—gP、GST-π、TopoⅡ的表达，并对其组织病理指标及3年生存率进行综合分析。结果①35例肝癌中的P—gp、GST-π、TopoⅡ的阳性表达率分别为85．7％、71．4％、31．4％。②肝癌组织中P—gp、GST-π表达显著高于癌旁组织及肝硬化组织。③P—gp＋GST-π＋TopoⅡ阳性表达率为17．1％，P—gp＋GST-π、P—gp＋TopoⅡ和GST-π＋TopoⅡ阳性率分别为60％、14．3％、2．8％，其中P—gP＋GST-π和GST-π＋TopoⅡ的阳性表达具有相关性（P〈0．01）。④TopoⅡ表达阳性者的3年生存率低于阴性者。结论①原发性肝癌多药耐药与其P—gp、GST-π、TopoⅡ表达有关。②对肝癌患者化疗前进行耐药基因检测，对患者化疗用药具有指导意义，有助于联合用药的合理选择，提高疗效及延长患者生存期。     

谷胱甘肽- S-转移酶π和 DNA拓扑异构酶Ⅱ-α在结直肠癌组织中的表达及其意义

目的探讨谷胱甘肽- S-转移酶π （GST-π ）和 DNA拓扑异构酶Ⅱ-α （Topo Ⅱ-α ）在肿瘤的表达及其与结直肠癌临床病理学特征之间的关系.方法应用免疫组织化学（免疫组化） ABC法检测 GST-π和 Topo Ⅱ-α在 60例结直肠癌、癌旁组织和 15例正常结肠黏膜中的表达并分析其意义.结果 GST-π和 Topo Ⅱ-α在结直肠癌组织中的阳性表达率分别为 90.0%和 86.7%,显著高于癌旁组织和正常黏膜（ P〈 0.01）. GST-π和 Topo Ⅱ-α表达强度与肿瘤大小和组织学类型无关（ P 〉0.05）,但与肿瘤的临床分期、分化程度和淋巴结转移与否密切相关（ P〈 0.01）. GST-π在低分化癌组织中高表达;Topo Ⅱ-α在高分化癌组织中的表达强度高于低分化癌（ P〈 0.01）.结论 GST-π和 Topo Ⅱ-α在结直肠癌组织中的表达与肿瘤的临床病理特征有关,可作为衡量肿瘤恶性程度和预后的指标之一.     

日本血吸虫磷酸丙糖异构酶编码基因的克隆与序列测定

目的克隆和鉴定日本血吸虫磷酸丙糖异构酶(SjTPI)编码基因,为寻找血吸虫病的候选疫苗联合应用打基础.方法设计合成引物,抽提日本血吸虫成虫总RNA,用RT-PCR法从中扩增出SjTPI基因编码序列,将其克隆入pGEM-T载体,用双酶切、以重组质粒为模板进行PCR扩增和测序进行鉴定.结果 RT-PCR法从成虫总RNA中扩增出大小为759 bp SjTPI基因编码序列,重组质粒pGEM-SjTPI经双酶切、PCR扩增,均可获得一条与RT-PCR产物一致的DNA片段,序列测定结果表明具有一个长度为759 bp的完整开放阅读框,与日本血吸虫(菲律宾株)和曼氏血吸虫磷酸丙糖异构酶核苷酸序列有高度同源性(分别为99%和88%).结论该实验成功地克隆了SjTPI编码基因,为进一步研究提供了条件.     

葡萄籽多酚对多药耐药的逆转作用及其机制

目的：探讨葡萄籽多酚(GSPs)逆转多药耐药的作用及其对多药耐药相关蛋白GSTπ、TopoⅡ α表达的影响。方法：以人乳腺癌MCF-7细胞及其耐药株MCF-7／ADR细胞作为实验对象，用MTT法观察GSPs对多药耐药的逆转作用，免疫细胞化学技术观察GSPs对GSTπ、TopoⅡα等多药耐药相关蛋白表达的影响。结果：GSPs在1．2、2．4mg／L浓度时对细胞无毒性作用，并且均能逆转MCF-7／ADR细胞的多药耐药性，逆转倍数分别为5．77和9．79倍；GSPs可使MCF-7／ADR细胞GSh表达下降，但对TopoⅡ α表达无影响。结论：体外试验证实GSPs具有多药耐药逆转作用，其机制可能与降低肿瘤细胞内GSTπ的表达有关，提示GSPs是一种潜在的肿瘤化疗增敏剂。     

DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达与颅咽管瘤预后的关系

目的检测颅咽管瘤组织中DNA拓扑异构酶Ⅱα(DNATopoⅡα)的表达情况,分析其表达与肿瘤复发的关系,探讨其是否可作为判定颅咽管瘤预后的一个有效指标。方法设计前瞻性队列研究方案,采用免疫组化方法和图像分析技术测定63例颅咽管瘤组织切片中DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平,评价颅咽管瘤釉质上皮瘤与鳞状乳头瘤病理亚型、复发组与非复发组、原发组与复发组之间肿瘤细胞的增殖能力。结果32例釉质上皮瘤14例复发,31例鳞状乳头瘤6例复发;釉质上皮瘤与鳞状乳头瘤病理亚型之间以及复发组与非复发组肿瘤之间DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平有显著性差异(P<0.05),而原发组与复发组肿瘤之间DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平无统计学差异(P>0.05)。结论颅咽管瘤的病理亚型以及DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平与肿瘤的预后和复发有关,可作为预测肿瘤复发危险性的一个参考指标;DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平在原发组和复发组肿瘤之间无显著性差异,提示肿瘤在复发过程中瘤细胞的增殖活性无明显变化。