高效液相色谱法测定涵水胶囊中吴茱萸次碱的含量

目的:建立涵水胶囊中吴茱萸次碱的高效液相色谱测定方法.方法:Waters Symmetry ShieldTM RP18分析柱(3.9 mm×150 mm,5 μm),柱温40℃,流动相为乙腈-水(36:62),检测波长为345 nm,流速为1.0 mL/min.结果:吴茱萸次碱在0.52～2.6μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率为102.1%,RSD=1.7%.结论:高效液相色谱法简便、灵敏、准确、重现性好,可用于控制涵水胶囊的质量.     

艾附暖宫胶囊中吴茱萸次碱含量测定的研究

目的采用高效液相色谱法,建立吴茱萸次碱的含量测定方法。方法选择合适的固定相,调整流动相组成、配比、流速以及柱温,在最大吸收波长下测定,使指标峰分离完全,理论塔板数符合要求。配制系列浓度的对照品溶液,以色谱峰的峰面积为纵坐标,以进样浓度为横坐标,进行线性回归,得回归曲线并考察线性范围。分别考察测定方法的精密度、重现性、稳定性和加样回收率。取3批样品分别测定指标成分的含量。结果吴茱萸次碱色谱条件为:Thermo(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相:0.04%辛烷磺酸钠-乙腈(45∶55),流速0.8 mL.min 1,柱温25℃,检测波长345 nm。吴茱萸次碱在8.52~85.2μg.mL 1范围内线性关系良好,r为0.999 8。该方法精密度、中间精密度、耐用性、重复性、在12 h内稳定性和加样回收率的RSD分别为0.37%、0.87%、1.02%、1.34%、1.24%、0.41%,加样回收率为99.6%,样品中吴茱萸次碱含量不低于0.067 mg.粒1。结论以公认的有效成分作为含量测定指标,采用高效液相色谱法进行检测,准确度高,专属性强,重复性好,能有效控制制剂质量。     

吴茱萸碱和吴茱萸次碱电喷雾-离子阱质谱裂解途径研究

目的:对吴茱萸碱和吴茱萸次碱的电喷雾质谱裂解机制进行研究。方法:在电喷雾离子源,正、负离子模式下,分析吴茱萸碱和吴茱萸次碱的一级和多级质谱图。结果:解析了吴茱萸碱和吴茱萸次碱多级质谱碎片,在正负离子模式下,主要发生Rretro-Diels-Alder(RDA)裂解。结论:吴茱萸碱和吴茱萸次碱的ESI-MS质谱裂解途径可为吲哚类生物碱的成分研究提供数据参考。     

东风桔化学成分研究

目的 研究东风桔Atalantia buxifolia 的化学成分。方法 运用硅胶、凝胶等多种色谱技术对东风桔的化学成分进行研究,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果 从东风桔95%乙醇提取物的氯仿和正丁醇萃取部位分离得到了15个化合物,分别鉴定为1, 6-二羟基-3, 4, 5-三甲氧基-10-甲基吖啶-9(10H)-酮（1）、9(10H)-吖啶酮（2）、1-羟基-3, 4, 5-三甲氧基-10-甲基吖啶-9(10H)-酮（3）、吴茱萸次碱（4）、吴茱萸碱（5）、柠檬苦素（6）、异土木香内酯（7）、5-羟基-2, 2-二甲基-12-异戊烯基-2H-吡喃 [3, 2-b] 吖啶-6(11H)-酮（8）、1, 3, 6-三羟基-4, 5-二甲氧基-10-甲基吖啶-9(10H)-酮（9）、甜橙碱（10）、1, 5-二羟基-2, 4-二异戊烯基-3-甲氧基-10-吖啶-9(10H)-酮（11）、1, 5-二羟基-2, 4-二异戊烯基-3-甲氧基-10-甲基吖啶-9(10H)-酮（12）、伞形花内酯（13）、胡萝卜苷（14）、β-谷甾醇（15）。结论 化合物1～7为首次从该植物中分离得到。     

茱萸丸抑制氧化三甲胺介导的ROS/TXNIP/NLRP3信号通路诱导血管内皮细胞焦亡

目的 研究茱萸丸对动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的影响及其相关机制。方法 采用高脂饲料喂养雄性低密度脂蛋白受体敲除（low density lipoprotein receptor knockout,LDLR^-/-）小鼠诱导AS模型,造模周期为12周。造模成功的50只LDLR^-/-小鼠随机分成模型组及茱萸丸低、中、高剂量（130.54、261.08、552.16 mg/kg）组和阿托伐他汀（10.40 mg/kg）组,每组10只,C57BL/6J小鼠10只作为对照组。给药12周后,采用生化法检测小鼠血清三酰甘油（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）水平;苏木素-伊红（hematoxylin-eosin,HE）、Masson、油红O染色观察小鼠主动脉的病理学改变;ELISA检测血清中白细胞介素-18（interleukin-18,IL-18）、IL-1β、活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性;超高液相色谱串联质谱法（ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UHPLC-MS/MS）检测小鼠血浆中三甲胺（trimethylamine,TMA）、氧化三甲胺（trimethylamine oxide,TMAO）含量;16S rRNA技术检测小鼠粪便中肠道菌群物种组成差异;荧光探针法检测主动脉ROS的荧光强度;免疫荧光及Western blotting检测小鼠主动脉硫氧还蛋白相互作用蛋白（thioredoxin interacting protein,TXNIP）和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白（NOD like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3）蛋白表达;qRT-PCR检测主动脉硫氧还蛋白（thioredoxin,TRX）、TXNIP、凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein,ASC）、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cystein-asparate protease-3,Caspase-3）mRNA表达。结果 与对照组比较,模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C水平升高（P＜0.01）,HDL-C水平显著下降（P＜0.01）,主动脉内膜大面积增厚,形成明显的泡沫细胞,脉壁胶原蛋白沉积增多,血清中IL-18、IL-1β、ROS、TMA、TMAO水平显著升高（P＜0.01）,SOD活性显著降低（P＜0.01）,Chao1、Ace以及observed species指数降低（P＜0.01）,拟杆菌门、粪杆菌属、布劳特氏属、乳杆菌属菌群丰度显著下降（P＜0.01）,主动脉中ROS含量增加（P＜0.01）,TXNIP、NLRP3蛋白与mRNA表达水平升高（P＜0.01）,TRX、ASC、Caspase-1 mRNA表达水平升高（P＜0.01）。与模型组比较,茱萸丸组血清TG、TC、LDL-C水平显著降低（P＜0.05、0.01）,HDL-C水平显著升高（P＜0.01）,主动脉斑块、血管壁泡沫细胞及胶原蛋白沉积均呈现不同程度的改善,血清中IL-18、IL-1β、ROS、TMA、TMAO水平显著降低（P＜0.05、0.01）,SOD活性显著升高（P＜0.01）,Chao1、Ace以及observed species指数均明显升高（P＜0.01）,拟杆菌门、粪杆菌属、布劳特氏属、乳杆菌属菌群丰度升高（P＜0.05、0.01）,厚壁菌门菌群丰度降低（P＜0.05）,主动脉中ROS含量减少（P＜0.05、0.01）,TXNIP、NLRP3蛋白与mRNA表达水平显著降低（P＜0.01）,TRX、ASC、Caspase-1 mRNA表达水平显著降低（P＜0.01）。结论 茱萸丸能够显著抑制LDLR^-/- AS小鼠主动脉病理改变、调节肠道菌群中有益菌和有害菌的相对丰度,减少TMAO生成,抑制ROS/TXNIP/NLRP3信号通路,改善炎症反应,减轻内皮细胞损伤,从而发挥抗AS的作用。     

东风桔化学成分研究

目的 研究东风桔Atalantia buxifolia的化学成分.方法 运用硅胶、凝胶等多种色谱技术对东风桔的化学成分进行研究,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构.结果 从东风桔95％乙醇提取物的氯仿和正丁醇萃取部位分离得到了15个化合物,分别鉴定为1,6-二羟基-3,4,5-三甲氧基-10-甲基吖啶-9(10H)-酮(1)、9(10H)-吖啶酮(2)、1-羟基-3,4,5-三甲氧基-10-甲基吖啶-9(10H)-酮(3)、吴茱萸次碱(4)、吴茱萸碱(5)、柠檬苦素(6)、异土木香内酯(7)、5-羟基-2,2-二甲基-12-异戊烯基-2H-吡喃[3,2-b]吖啶-6(11H)-酮(8)、1,3,6-三羟基-4,5-二甲氧基-10-甲基吖啶-9(10H)-酮(9)、甜橙碱(10)、1,5-二羟基-2,4-二异戊烯基-3-甲氧基-10-吖啶-9(10H)-酮(11)、1,5-二羟基-2,4-二异戊烯基-3-甲氧基-10-甲基吖啶-9(10H)-酮(12)、伞形花内酯(13)、胡萝卜苷(14)、β-谷甾醇(15).结论 化合物1～7为首次从该植物中分离得到.     

小儿腹泻贴膏剂中吴茱萸碱及次碱的含量测定

用薄层扫描法测定了小儿腹泻贴膏剂中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量。灵敏度中。回收率分别为吴茱萸碱１００．４％，ＲＳＤ２．８３％，吴茱萸次碱１０１．６％，ＲＳＤ２．３１％。     

超临界流体萃取吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱

目的研究超临界流体萃取(SFE)吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取工艺,并用高效液相色谱法(HPLC)测定吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量.方法采用95%乙醇作夹带剂,运用超临界流体的萃取工艺,含量测定时,在Water-C18柱上,以乙腈-水(43∶57)为流动相,流速1.0 mL*min-1,检测波长290 nm,柱温40℃.结果吴茱萸碱和吴茱萸次碱的标准曲线在0.024～0.120 μg(r=0.9994)和0.026～0.130 μg(r=0.9995)之间有较好的线性关系;加样平均回收率分别为102.7%(RSD=1.58)和101.7%(RSD=1.79%). 结论采用SFE萃取吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取工艺速度快,HPLC法测定吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量精确,重现性好.     

吴茱萸次碱对胃肠道运动影响的实验研究

目的：研究吴茱萸次碱对胃肠道运动的影响，并就其作用机制进行初步探讨。方法：考察吴茱萸次碱对正常小鼠肠道推进的影响，并分别以新斯的明、胃复安或利血平制作了小鼠胃肠道运动亢进的模型，观察了吴茱萸次碱的拮抗作用；豚鼠离体肠管在乙酰胆碱或组胺的刺激下发生收缩，在此基础上，了解吴茱萸次碱的抑制作用。结果：吴茱萸次碱抑制正常小鼠小肠推进和新斯的明所致的小肠运动亢进，但对后者的作用更为明显；对甲氧氯普胺和利血平所致的胃排空亢进表现出显著的抑制作用，同时有效地对抗了乙酰胆碱或组胺对豚鼠离体肠管的收缩作用。结论：吴茱萸次碱能抑制小鼠胃肠运动功能，可能与其对抗胆碱能神经对胃肠道运动的支配有关。     

液质联用法同时测定加味左金丸中13种有效成分

目的建立了HPLC-ESI-MS/MS法同时测定加味左金丸中阿魏酸、木香烃内酯、黄芩苷、芍药苷、延胡索乙素、吴茱萸次碱、小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱、柚皮苷、橙皮苷、柴胡皂苷a与柴胡皂苷d 13种有效成分的分析方法。方法 HPLC采用色谱柱Thermo Syncronis C_(18)柱(100 mm×4.6 mm,3.0μm),流动相为甲醇-0.02 mol/L乙酸铵水溶液,梯度洗脱,体积流量0.35 mL/min,进样量10μL;质谱采用电喷雾离子源、正负离子模式同时采集,通过多反应监测(MRM)同时对加味左金丸中的13种有效成分进行定量分析。结果加味左金丸中13种有效成分阿魏酸、木香烃内酯、黄芩苷、芍药苷、延胡索乙素、吴茱萸次碱、小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱、柚皮苷、橙皮苷、柴胡皂苷a与柴胡皂苷d的线性范围分别为2～80μg/mL(r=0.999 2)、0.5～20.0μg/mL(r=0.999 1)、3.5～140.0μg/mL(r=0.999 8)、1～40μg/mL(r=0.999 2)、0.3～12.0μg/mL(r=0.999 1)、1～40μg/mL(r=0.999 2)、3～120μg/mL(r=0.999 7)、2.5～100.0μg/mL(r=0.999 5)、0.5～20.0μg/mL(r=0.999 3)、0.5～20.0μg/mL(r=0.999 1)、1～40μg/mL(r=0.999 1)、0.3～12.0μg/mL(r=0.999 2)、0.3～12.0μg/mL(r=0.999 2),平均加样回收率分别为99.5%、98.9%、100.2%、99.2%、99.5%、99.7%、98.6%、99.9%、101.3%、98.7%、99.8%、97.9%、101.3%,RSD值分别为4.11%、4.88%、1.08%、3.23%、4.13%、3.23%、2.78%、3.12%、4.53%、3.43%、3.58%、5.22%、5.13%。12批加味左金丸样品中13种有效成分的质量分数分别为0.324～0.383、0.051～0.072、3.225～3.466、0.154～0.198、0.015～0.062、0.144～0.199、2.145～2.982、0.441～0.953、0.032～0.099、0.062～0.089、0.111～0.178、0.012～0.065、0.011～0.069 mg/g。结论所建立的分析方法快速、高效、灵敏度高、专属性好,可应用于加味左金丸的质量控制。