胎肝细胞质液对小鼠IL－2系统的影响

用自制胎肝细胞质液（ＦＬＣ）对小鼠ＩＬ ２系统的影响进行研究，结果表明ＦＬＣ对正常小鼠体内Ｔ淋巴细胞有诱生ＩＬ ２的作用（Ｐ＜００５），可明显促进淋巴细胞ｍＩＬ ２Ｒ的表达（Ｐ＜００１）和血清ｓＩＬ ２Ｒ水平的降低（Ｐ＜００５）；对环磷酰胺免疫抑制后小鼠的ＩＬ ２诱生、ｍＩＬ ２Ｒ表达均有所改善（分别为Ｐ＜００５，Ｐ＜００１），提示ＦＬＣ对小鼠Ｔ淋巴细胞有一定程度活化和诱导ＩＬ ２产生的作用，可降低小鼠血清ｓＩＬ ２Ｒ水平。     

含mIL-12基因多顺反子逆转录病毒载体构建及其在肝癌细胞中的表达

构建含小鼠白细胞介素１２双亚基及新霉素磷酸转移酶基因多顺反子逆转录病毒载体,并观察其在小鼠肝癌细胞中的表达。方法利用脑心肌炎病毒（ＥＭＣＶ）及脊髓灰质炎（Ｐｏｌｉｏ）病毒内核糖体进入位点（ＩＲＥＳ）,连接ｍＩＬ－１２ｐ４０及ｐ３５ｃＤＮＡｓ和筛选基因新霉素磷酸转移酶（ＮｅｏＲ）,克隆至逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ中,使三个基因同时受逆转录病毒载体５’端ＬＴＲ启动子控制,转录至同一ｍＲＮＡ转录本上,通过     

X射线照射对人外周血淋巴细胞mIL2R表达的影响

目的观察Ｘ射线照射对人外周血淋巴细胞ｍＩＬ２Ｒ表达的影响。方法采用单克隆抗体间接免疫荧光标记ＦＣＭ检测。结果４Ｇｙ和６Ｇｙ单次照射组ｍＩＬ２Ｒ表达明显低于对照组（分别Ｐ＜０．０１）。７５ｍＧｙ及１００ｍＧｙ单次照射组ｍＩＬ２Ｒ表达明显高于对照组（分别Ｐ＜０．０１）。预先给予７５ｍＧｙ照射,继之又给予４Ｇｙ组ｍＩＬ２Ｒ表达明显高于单纯４Ｇｙ照射组。结论①４Ｇｙ以上Ｘ射线照射使ｍＩＬ２Ｒ的表达明显降低。②７５ｍＧｙ及１００ｍＧｙ小剂量照射后人外周血淋巴细胞ｍＩＬ２Ｒ表达显著增高。③７５ｍＧｙ预照射可诱导ｍＩＬ２Ｒ表达对其后４Ｇｙ照射的适应性反应。     

胎肝细胞质液对小鼠IL－2系统的影响

用自制胎肝细胞质液（ＦＬＣ）对小鼠ＩＬ２系统的影响进行研究，结果表明ＦＬＣ对正常小鼠体内Ｔ淋巴细胞有诱生ＩＬ２的作用（Ｐ＜００５），可明显促进淋巴细胞ｍＩＬ２Ｒ的表达（Ｐ＜００１）和血清ｓＩＬ２Ｒ水平的降低（Ｐ＜００５）；对环磷酰胺免疫抑制后小鼠的ＩＬ２诱生、ｍＩＬ２Ｒ表达均有所改善（分别为Ｐ＜００５，Ｐ＜００１），提示ＦＬＣ对小鼠Ｔ淋巴细胞有一定程度活化和诱导ＩＬ２产生的作用，可降低小鼠血清ｓＩＬ２Ｒ水平。     

pNEgr-mIL-12真核表达重组质粒的构建及在COS-7细胞和黑色素瘤B16细胞中的表达

目的:构建含辐射敏感启动子的pNEgr-mIL-12真核表达载体,转染哺乳动物细胞后经不同剂量X射线照射,检测mIL-12的表达.方法:限制性内切酶酶切构建pNEgr-mIL-12表达载体;脂质体转染法转染COS-7细胞和B16细胞;ELISA法检测mIL-12p70表达.结果:①pNEgrmIL-12重组质粒转染瞬时表达细胞COS-7细胞,经不同剂量X射线照射后,照射组mIL-12表达量比未照射组明显增高(P＜0.05,P＜0.001),约为未照组的1.5～2.5倍;在2.0 Gy照后表达增高最为明显,表达于照后4 h达峰值,在观察的72h内保持于较高水平;②转染pNEgr-mIL-12的B16细胞于2.0 Gy照后增高明显,为未照射组的1.5倍;并且经2.0 Gy X射线照射后随时间延长表达水平逐渐增高;低至0.05 Gy的剂量对两种细胞亦均有激活作用.结论:pNEgr-mIL-12重组质粒具有辐射激活下游基因表达的功能,且经不同剂量X射线照射后表达均有增强,尤以2.0 Gy照射组作用明显,但在低剂量50、75、100 mGy照后表达水平增高与对照组差异均有显著性.     

丙型病毒性肝炎患者PBMC mIL-2R的表达

目的　探讨丙型病毒性肝炎患者膜白介素 2受体 (mIL 2R)表达水平及其在丙肝转归中的作用。方法　用PCR和生物素 链霉亲和素法对 78例丙肝患者外周血单个核细胞 (PBMC)分别进行HCV RNA和植物血凝素诱导前后mIL 2R的检测。结果　丙肝患者PBMC静息期和诱导期mIL 2R表达水平分别为 (2 .94± 0 .88) %、(31.5 3± 3.38) % ,与正常对照相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。其中 ,急性丙肝患者静息期和诱导期mIL 2R表达水平分别为 (3.2 5± 0 .94 ) %、(32 .82± 3.84 ) % ,慢性丙肝患者静息期和诱导期mIL 2R表达水平分别为 (2 .77± 0 .84 ) %、(30 .97± 3.16 ) % ,两者相比差异有显著性 (P <0 .0 5 )。PBMC内HCV RNA(+)者静息期和诱导期mIL 2R表达水平分别为 (2 .37± 1.16 ) %、(30 .4 1± 4 .0 1) % ,PBMC内HCV RNA(- )者静息期和诱导期mIL 2R表达水平分别为 (3.2 1± 0 .80 ) %、(32 .15± 3.0 9) % ,两者相比差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　丙肝患者体内mIL 2R水平降低 ,与丙肝的慢性化程度似有一定关系 ;HCV侵入PBMC后可进一步抑制mIL 2R的表达     

聚乙二醇化重组人改构白细胞介素11在食蟹猴体内药代动力学检测方法的建立

目的 通过建立聚乙二醇(PEG)抗体结合ELISA法检测PEG化重组人改构白细胞介素11(PEG-mIL11)的血药浓度,PEG-mIL11在食蟹猴体内的药代动力学特征、血药浓度与量效关系.方法 食蟹猴皮下注射PEG-mIL11后,在不同时间点采集血样,采用PEG抗体结合ELISA法(双抗体夹心免疫法)测定血清中的PEG-mIL11浓度,计算药代动力学参数,并检测不同时间点的血小板计数,探索血药浓度与量效关系.结果 方法特异性良好,准确度与精密度均满足要求,线性范围26.34 ～ 200 ng/ml,可用于样品检测.PEG-mIL11在食蟹猴体内的消除T1/2为(13.4±2.4)h,Tmax为(6.7±2.3)h,Cmax为(2.4±0.5) μg/ml,AUC(01)值为(77.7±15.6) μg·h/ml,CL为(4.6±0.8)ml／(h·kg);而且PEG-mIL11血药浓度达峰先于药效达峰,药效明显滞后.结论 PEG抗体结合ELISA法测定PEG-mIL1 1浓度,方法稳定可靠,可满足药代动力学研究的需要.PEG修饰mIL-11达到了延长其体内代谢的效果,可减少给药次数,提高治疗便利性.     

隐孢子虫病患者与机体细胞免疫功能相关性的研究

目的　探讨隐孢子虫病患者与机体细胞免疫功能的关系。方法　采用生物素 链霉亲和素 (Biotin Streptavidin,BSA)法对卵囊阳性患者分别进行外周血T细胞亚群、膜白介素 2受体 (mIL 2R)检测。结果　隐孢子虫卵囊阳性者的CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 和CD4 + /CD8+ 阳性百分率分别为 (5 5 .87± 7.2 3) %、(39.2 6± 6 .4 3) %、(30 .0 4± 5 .6 7) %和 (1 .36± 0 .4 1 ) % ,诱导期mIL 2R表达水平为 (33.4 5± 2 .31 ) % ,两者分别与卵囊阴性者及静息期mIL 2R相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5～ 0 .0 1 )。结论　隐孢子虫病引起细胞免疫功能的变化 ,T细胞亚群、mIL 2R在抗隐孢子虫感染中起重要作用     

乙肝病人外周血T细胞亚群和mIL-2R表达水平的研究

目的：探讨乙型病毒性肝炎病人外周血T淋巴细胞亚群和膜白介素－2受体（mIL-2R）表达水平及其在乙肝发病机制中的作用。方法：用生物素－链霉亲和素法对196例乙肝病人外周血单个核细胞进行T细胞亚群及植物血凝素（PHA）诱导前后mIL-2R的检测。结果：乙肝病人外周血T淋巴细胞亚群和单个核细胞mIL-2R表达水平降低，与正常对照相比，差异有显著意义（P＜0．01）。结论：乙肝病人体内存在明显的细胞免疫功能紊乱，T细胞活化障碍，并与肝病的慢性化有关。     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群及膜白细胞介素2受体表达的研究

目的：探讨乙型病毒性肝炎（乙肝）患者外周血淋巴细胞亚群及膜表面白细胞介素２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）与乙肝发病机制的关系．方法：采用ＡＰＡＡＰ技术检测９２例慢性乙肝患者外周血淋巴细胞亚群及ｍＩＬ－２Ｒ．结果：慢性乙肝患者ＣＤ＋４细胞数明显降低（Ｐ＜０．０５），ＣＤ＋８细胞数显著上升（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），以致ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比值下降；ｍＩＬ－２Ｒ显著低于正常对照组（Ｐ＜０．０５），在ＰＨＡ激活后与正常接近，但均较ＰＨＡ激活前显著增高（Ｐ＜０．０１）．２０例慢活肝恢复期ｍＩＬ－２Ｒ已趋于正常．结论：慢性乙肝患者存在着免疫调节功能异常，可能与乙型肝炎病毒的持续存在互为因果关系．