一种简易的O_2与CO_2混合气体配制方法

一种简易的Ｏ_２与ＣＯ_２混合气体配制方法陈德森，付守芝，魏文芳，崔礼敬（郧阳医学院药理教研室十堰４４２０００）在科研及教学中所做的离体器官实验均需通９５％Ｏ２＋５％ＣＯ２或９７Ｏ２％＋３％ＣＯ２的混合气体，但这两种混合气体大多数地区不易购到，有介绍用...     

香菇多糖对巨噬细胞一氧化氮和一氧化氮合酶活性的影响

目的研究香菇多糖(LTN)诱导巨噬细胞的一氧化氮(NO)生成和一氧化氮合酶(iNOS)的活性,探讨LTN的免疫调节作用机理.方法采用Griess反应和荧光法测定不同剂量的LTN作用小鼠腹腔巨噬细胞后NO的生成量和iNOS活性.观察mRNA转录抑制剂、蛋白质合成抑制剂和iNOS抑制剂对巨噬细胞NO的生成和iNOS活性的影响.结果LTN能使小鼠腹腔巨噬细胞NO生成增加,iNOS活性增高,并呈作用剂量依赖关系.3种抑制剂均能抑制LTN诱导的小鼠腹腔巨噬细胞N0的生成和iNOS活性.结论LTN能刺激小鼠腹腔巨噬细胞提高iNOS活性和NO的生成.提示LTN的免疫调节作用机制可能与LTN刺激巨噬细胞NO生成有关.     

香菇多糖–番荔素纳米粒的性能考察及其对小鼠黑色素瘤肺转移癌的抑制作用

目的 考察香菇多糖–番荔素纳米粒的性能,及其对小鼠黑色素瘤肺转移癌的体内外抑制效果。方法 采用反溶剂沉淀法制备香菇多糖–番荔素纳米粒,以动态光散射法测定粒径、分散系数（PDI）及Zeta电位,及其在不同生理介质（5%的葡萄糖、生理盐水、PBS的混悬液）中的稳定性;采用透射电子显微镜观察纳米粒的形态、大小;精确称量香菇多糖–番荔素纳米粒质量,并采用HPLC法测量番荔素中番荔辛,计算载药量;用酶标仪在540 nm处测量不同浓度（2、1.5、1、0.5、0.25、0.125 mg/mL）香菇多糖–番荔素纳米粒与5%葡萄糖溶液等渗液的吸光度,并计算溶血率;采用透析袋法考察香菇多糖–番荔素纳米粒的体外释放行为。用划痕实验与MTT实验对香菇多糖–番荔素纳米粒进行体外药效学考察。构建黑色素瘤肺转移癌小鼠模型,以紫杉醇注射液为阳性对照,对不同剂量香菇多糖–番荔素纳米粒进行体内药效学研究。结果 香菇多糖–番荔素纳米粒的粒径为（160.6±1.0）nm,PDI为0.082±0.023,Zeta电位为（-28.10±1.14）m V,透射电镜下呈球状。香菇多糖–番荔素纳米粒在5%的葡萄糖、血浆中稳定,无溶血...     

顺铂与香菇多糖胸腔灌注治疗恶性胸腔积液临床观察

目的：观察顺铂与香菇多糖胸腔灌注治疗恶性胸腔积液的疗效与毒副反应的差异。方法：30例恶性胸腔积液患者随机分为A、B两组,给予胸腔内灌注顺铂或香菇多糖,每周1次,连续2—3周。观察两组治疗前后胸腔积液控制情况,生活质量改善及毒副反应情况。结果：A、B两组总有效率分别为60％和73．3％（P〉0．05）,80％和86．7％（P〉0．05）患者提高了生活质量。A组及B组患者毒性反应均轻微,可耐受。结论i顺铂与香菇多糖胸腔灌注治疗恶性胸腔积液的疗效均显著,可明显改善患者生活质量,毒副反应轻微。可耐受。     

辐射对小鼠脾脏损伤及香菇多糖的保护作用

目的 研究辐射对小鼠脾脏的损伤以及香菇多糖对其保护作用。方法 建立小鼠低剂量长期辐射的损伤模型。小鼠随机分为五组,对照组、模型组、香菇多糖组(低、中、高剂量组)。测定各组小鼠的脾脏系数、MTT法测定小鼠脾脏淋巴细胞的增殖情况,法分析脾脏组织的病理变化,用投射电镜法分析脾脏细胞的超微结构。结果：与对照组相比,低剂量慢性辐射能降低小鼠的脾脏系数、抑制脾脏淋巴细胞的增殖,对小鼠脾脏造成病理损伤,破坏脾脏细胞的超微结构。香菇多糖中、高剂量组可明显抑制辐射造成的脾脏的上述损伤。结论：香菇多糖对辐射造成的脾脏损伤具有保护作用。     

香菇多糖LNT2的提取分离纯化、结构及体外抗肿瘤活性研究

目的 从香菇子实体中分离纯化得到精制香菇多糖,并对其结构和体外抗肿瘤活性进行研究。方法 采用碱提-醇沉法提取香菇粗多糖,并通过脱色、超滤分离纯化得到精制香菇多糖,命名为LNT₂。苯酚-硫酸法测定总糖量,高效凝胶色谱法测定相对分子质量,紫外光谱检测蛋白质和核酸,旋光度实验测定比旋光度。综合运用酸水解、高碘酸氧化、甲基化等化学分析法和傅里叶红外光谱、核磁共振光谱等光谱分析法对LNT₂的化学结构进行分析;通过刚果红实验对LNT₂的糖链构象进行考察;采用四甲偶氮唑盐（MTT）比色法测定LNT₂对小鼠肝腹水瘤H₂₂细胞增殖的抑制率。结果 经测定香菇多糖LNT₂为均一组分多糖,其相对分子质量（M_W）为1.852×10⁵、含糖量为94.99%,比旋光度为+8.03°;紫外光谱显示LNT₂在280和260 nm处无吸收峰。综合化学分析和光谱分析推出LNT₂为β构型的葡聚糖,其主链由1-3连接的葡聚糖组成,分支点位于糖的6位,侧链由末端葡萄糖残基组成;刚果红实验表明LNT₂分子在较低浓度NaOH溶液中呈三螺旋构象。体外抗肿瘤实验表明LNT₂能显著抑制小鼠肝腹水瘤H₂₂细胞的增殖,且呈量效依赖性。结论 精制香菇多糖LNT₂为均一相对分子质量的多糖组分,其结构为β构型1-3连接葡聚糖;初步表明LNT₂为三股螺旋结构,且具有一定的抗肿瘤活性,为其进一步的开发利用奠定了一定的基础。     

基于网络药理学和实验验证探讨香菇多糖抑制三阴乳腺癌的作用机制

目的 基于网络药理学研究香菇多糖抑制三阴乳腺癌（TNBC）的作用机制并采用细胞和动物实验进行验证。方法 通过GeneCards数据库和DisGeNET数据库筛选与TNBC相关基因靶点，利用TCMID、PubChem、SwissTargetPrediction和GeneCards数据库查询香菇多糖相关基因靶点。使用Sangerbox软件进行基因本体论（GO）富集和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结合STRING数据库与Cytoscape 3.7.0软件将共同靶点进行可视化处理，筛选核心靶点，构建"化合物-靶点-通路"网络。利用Metascape软件进行转录因子及相关调控基因特异富集。体外培养小鼠TNBC细胞4T1和人TNBC细胞MDA-MB-231，磺酰罗丹明B染色法观察香菇多糖（31.25、62.5、125、250、500、1 000μg·mL^-1）对细胞存活率的影响；健康雌性BABLC小鼠sc接种1×10⁶个4T1-Luc细胞构建TNBC模型，通过小动物活体成像系统观察香菇多糖（100、200 mg·kg^-1）对肿瘤生长的影响，实时荧光定量PCR （qRT-PCR）技术检测肿瘤组织信号转导和转录活化因子3（STAT3）和血管内皮生长因子A （VEGFA） mRNA表达。结果 数据库及软件分析得到香菇多糖治疗TNBC关键靶点52个，靶点主要涉及PI3K-Akt、AGE-RAGE、HIF-1、MAPK信号通路和肿瘤蛋白多糖相关通路，PPI分析得到VEGFA、STAT3、MAPK1、IL2、TNF、RELA、AKT1、MAPK3、BCL2L1和HSP90AA1 10个hub基因。与对照组比较，香菇多糖对4T1和MDA-MB-231细胞存活率均有显著抑制作用（P<0.05、0.01），且作用呈浓度相关性；在给药14、21d后，与模型组比较，香菇多糖能够剂量相关性地抑制小鼠TNBC肿瘤的生长，高剂量组差异显著（P<0.05、0.01），21 d抑制率达到（91.9±4.7）%；与对照组比较，香菇多糖给药后能够剂量相关性抑制STAT3和VEGFA的mRNA表达，高剂量组差异显著（P<0.05、0.01）。结论 香菇多糖可通过多靶点、多途径协同作用抑制TNBC的生长。     

不同药物胸腔灌注治疗恶性胸腔积液的临床体会简

目的 比较单独应用顺铂或香菇多糖以及两者联合进行胸腔灌注治疗恶性胸腔积液的疗效及不良反应.方法 采用中心静脉导管留置引流术,对120例恶性胸腔积液患者随机分别采用单纯顺铂、单纯香菇多糖或香菇多糖联合顺铂胸腔灌注治疗,治疗4周后按WHO标准评价近期疗效和毒副反应.结果 联合组有效率优于单纯顺铂或单纯香菇多糖组;联合组患者的不良反应低于单纯顺铂组,但高于单纯香菇多糖组.结论 香菇多糖联合顺铂胸腔灌注是治疗恶性胸腔积液的有效手段.     

香菇多糖对酒精性肝损伤小鼠预防性肝保护作用的研究

目的观察香菇多糖对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法将昆明种小鼠分为空白对照组、病理模型组、香菇多糖高、中、低剂量保护组。对照组用生理盐水灌胃,病理模型组小鼠用56℃红星二锅头灌胃,造成急性酒精性肝损伤模型。香菇多糖各保护组,先用高、中、低剂量的香菇多糖处理,3 h后分别用56℃红星二锅头(12 mL/kg)灌胃。小鼠饲养10 d末次灌胃禁食不禁水16 h后,眼球取血分离血清,测定ALT和AST值;然后处死小鼠,立即取出肝脏制备肝匀浆,按试剂盒说明书要求检测肝匀浆中SOD、GSH-Px的活性及MDA、GSH的含量。结果香菇多糖能降低ALT、AST活性和AST/ALT比值,增加SOD、GSH-Px的活性,提高GSH含量,降低MDA的含量。结论香菇多糖可能对酒精性肝损伤有保护作用。     

香菇多糖对免疫抑制小鼠肠道派氏结T细胞的影响

目的研究香菇多糖对环磷酰胺免疫抑制小鼠的肠道派氏结T细胞的影响。方法通过胸腺指数,脾脏淋巴细胞的增殖转化和迟发型超敏反应情况观察香菇多糖对免疫抑制小鼠系统免疫功能的影响;在迟发型超敏反应条件下,通过肠道派氏结T细胞比例、亚群和活化的情况观察香菇多糖对免疫抑制小鼠肠道派氏结T细胞的影响。结果香菇多糖对环磷酰胺诱导的小鼠胸腺指数降低,脾淋巴细胞增殖和迟发型超敏反应能力下降表现出明显的恢复作用;对环磷酰胺诱导的DTH小鼠小肠派氏结数目减少,派氏结中T淋巴细胞比例升高、活化水平降低等肠道黏膜免疫系统抑制状态同样具有明显改善作用。结论香菇多糖可以正向调节免疫抑制小鼠肠道派氏结的T细胞功能,提示香菇多糖对肠道黏膜免疫系统具有一定的免疫调节作用。