7,8-二羟基黄酮对6-羟基多巴胺诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的 探讨7,8-二羟基黄酮（D HF）对6-羟基多巴胺（6-O HD A）诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法 将6-OHDA（25～200 Lmol/L）和PC12细胞混合后孵育24 h,观察6-O HD A的毒性作用;以D HF（1～25Lmol/L）预处理细胞1 h,再加入100 Lmol/L 6-O HDA继续培养24 h,观察D HF对6-O HD A诱导PC12细胞损伤的保护作用;25 Lmol/L D HF预处理前30 min加入10 n mol/L L Y294002,观察D HF的保护作用是否可被磷酸肌醇3激酶（PI3K）抑制剂所阻断。采用MTT法测定细胞存活率。结果 与对照组相比,50～200 Lmol/L 6-O HDA作用24 h可明显降低细胞存活率,其中100 Lmol/L 6-O HD A可导致半数细胞死亡。D HF预处理剂量依赖性抑制了6-OHDA诱导的细胞损伤,该作用部分被PI3K抑制剂所阻断。结论 DHF对6-OHDA诱导PC12细胞损伤具有明显的保护作用,该作用可能与PI3K信号通路有关。     

6-羟基多巴在帕金森病发病机制中的作用

目的：探讨神经毒素6-羟基多巴（6-OHDA）在帕金森病（PD）发病机制中的作用。 方法：采用立体定向术将神经毒素6-OHDA注入大鼠右侧纹状体内,制备经典的帕金森病动物模型。造模2个月后,检测其纹状体内还原型谷胱甘肽(GSH)和活性氧,并观察黑质的病理改变。结果：帕金森病模型组右侧纹状体内GSH含量［（36.85±8.64 μg•mg^-1 prot）］明显下降,活性氧含量［（58.69±9.84）U•mg^-1 prot］明显增高,与假手术组及正常对照组比较差异均有显著性（P<0.05）。光镜下可见帕金森病模型组右侧黑质致密带内多巴胺能神经元减少,与模型组左侧及对照组、假手术组黑质相比差异均有显著性（P<0.05）。 结论：6-OHDA可通过耗竭GSH及增加自由基的生成损害多巴胺能神经末梢,并逆行性损毁神经元胞体,导致黑质致密带多巴胺能神经元变性死亡。     

加压素对大鼠穿梭箱被动回避行为的影响

海马注射精氨酸加压素(AVP)既可延缓大鼠穿梭箱被动回避行为的消退,又可促进这种行为的获得。海马注射6-羟多巴胺(6-OHDA)可阻断AVP的促记忆效应。用高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)观察到,AVP可加速海马内儿茶酚胺的降解。结果提示:(1)AVP可易化大鼠穿梭箱被动回避行为;(2)AVP对动物的长时记忆和短时记忆均有增强作用;(3)AVP对记忆的影响很可能通过加强海马内去甲肾上腺素和/或多巴胺的降解代谢来实现。     

The determination of biogenic amines in four strains of the fruit flyDrosophila melanogaster

A range of biogenic amines were measured in the heads from four strains ofDrosophila melanogaster. Quantitation was carried out using gas chromatography—negative ion chemical ionization mass spectrometry (GC—NICIMS) with stable isotope dilution. The principal amines detected in the heads were dopamine, noradrenaline and 5 HT with small amounts ofp- andm-tyramine;p-octopamine could not be detected in samples of 25 heads with a limit of detection of 10 pg per sample. In addition to conventional neurotransmitters or putative neurotransmitters the amines 5- and 6-hydroxydopamine were detected in the heads in substantial amounts.     

纹状体内注射6-羟基多巴胺制作帕金森病大鼠模型

[目的]研究帕金森病(PD)大鼠模型的制作方法.[方法]采用单点双注法将6-羟基多巴胺(6-OHDA)立体定向注入到大鼠右侧纹状体,观察大鼠的行为变化和中脑黑质区的形态学变化.[结果]注药后2周,大鼠经阿扑吗啡诱导出现向健侧旋转行为,在2个月的观察中见旋转行为稳定.形态学观察结果示,损伤侧黑质区致密部和中脑被盖腹侧区内酪氨酸羟化酶阳性神经元数量明显减少.[结论]6-OHDA单针道双点法是制作大鼠PD模型的可行方法.     

3 种不同脑区定点注射 6-OHDA 单侧损伤大鼠帕金森病模型的比较研究

[摘要] 目 的 从 神 经 行 为 学、组 织 病 理 和 生 化 方 面 对 3 种 不 同 脑 区 单 侧 定 点 注 射 6- 羟 基 多 巴 胺 ( 6- hydroxydopamine , 6-OHDA )损伤大鼠帕金森病( Parkinsondisease , PD )模型进行比较研究。方法 健康雄性 SD 大 鼠随机分为 3 组( n =10 ):纹状体组、黑质组、黑质 + 中脑腹侧被盖区组。根据脑立体定位图谱,将微量 6-OHDA 单点定位注入大鼠中脑黑质区、纹状体区和双点定位注入黑质区与中脑腹侧被盖区。观察阿朴吗啡诱发大鼠旋转 行为,免疫组织化学检测大鼠黑质区酪氨酸( tyrosinehydroxy-lase , TH + )阳性神经元数目,电化学高效液相色谱法 检测纹状体中多巴胺( dopamine , DA )及其代谢产物 3 , 4- 二羟苯乙酸( dihydroxy-phenylaceticacid , DOPAC )和高香 草酸( homovanillicacid , HVA )含量。结果 纹状体组 3 周后模型稳定,黑质组与黑质 + 中脑腹侧被盖区组大鼠 2 周后稳定, 3 组 30min 内向健侧转圈数均呈升高趋势,黑质 + 中脑腹侧被盖区组高于纹状体组和黑质组,组间· 时点间交互作用差异有统计学意义( P <0.05 )。纹状体组和黑质 + 中脑腹侧被盖区组造模成功率高于黑质组 ( P <0.05 )。 3 组大鼠注射 6-OHDA 损伤侧纹状体中 DA 、 DOPAC 、 HVA 含量和 TH + 神经元数目均明显低于非 损伤侧( P <0.05 )。结论 纹状体单点注射 6-OHDA 损伤建立 PD 模型成功率高,可作为研究 PD 的一种稳定可靠 的动物模型。     

尼古丁对6-羟多巴胺诱导PC12细胞凋亡的拮抗作用

目的　探讨尼古丁对 6 羟多巴胺 (6 OHDA)诱导PC1 2细胞凋亡的拮抗作用及其与烟碱受体的关系。方法　用 6 OHDA诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株PC1 2细胞凋亡的细胞模型 ;用MTT、二乙酸荧光素活细胞染色、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳等方法检测PC1 2细胞的凋亡 ;用尼古丁及N型和M型受体拮抗剂预处理 ,观察尼古丁的拮抗作用及其与受体的关系。结果　尼古丁可明显拮抗 6 OHDA(50 μmol·L-1 )诱导PC1 2细胞凋亡 ,呈钟型浓度效应关系 ,1 0 μmol·L-1 尼古丁的拮抗作用最强。用 1 0 μmol·L-1 尼古丁预处理PC1 2细胞 2h可明显降低 6 OHDA诱导的细胞凋亡。用 1 0 μmol·L-1 六甲溴胺阻断烟碱受体 ,可取消尼古丁对 6 OHDA诱导细胞凋亡的拮抗作用 ;但用阿托品阻断M型胆碱受体 ,对尼古丁的拮抗作用则无明显影响。结论　尼古丁对 6 OHDA诱导的PC1 2细胞凋亡有明显的拮抗作用 ,这种作用由烟碱受体所介导。     

IGF-1对6-OHDA诱导神经元氧化损伤的保护作用

目的 探讨胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对6-羟基多巴胺（6-OHDA）诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法 以25、50、100、150、200 μmol/L 的6-OHDA 处理PC12细胞,在12、24、48 h用MTT 法检测6-OHDA 对PC12细胞活性的影响,筛选最佳的实验浓度和观察时间。实验分为3组：对照组、6-OHDA组（150 μmol/L处理24 h）和IGF-1+6-OHDA组（IGF-1 100 nmol/L预处理2 h,后加入150 μmol/L 6-OHDA处理24 h）,MTT法检测各组细胞活性;免疫荧光染色法检测细胞活性氧（ROS）水平;Hoechst33342/PI双染法检测细胞凋亡。结果 随6-OHDA浓度的增加和作用时间的延长,PC12细胞的活性呈梯度降低,150 μmol/L 6-OHDA浓度和处理后24 h作为本研究的最佳的实验浓度和观察时间。与6-OHDA组比较,IGF-1+6-OHDA组PC12细胞活力增强、ROS水平下降、细胞凋亡减少。结论 IGF-1预处理能减少6-OHDA引起的PC12细胞氧化损伤及凋亡,增加细胞活性,为防治帕金森病提供了潜在的治疗策略。