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1.
2.
3.
Gene expression regulation and cancer 总被引:1,自引:0,他引:1
4.
寻找有效的抗原表位是近期肿瘤免疫治疗的热点.人端粒酶逆转录酶(hTERT)的免疫学特性使其成为肿瘤免疫治疗中一个吸引人的目标。从人和鼠系统获得的数据证实,细胞毒淋巴细胞(CTL)能识别hTERT特异的肽并杀死多种组织类型hTERT表达的肿瘤细胞。由于hTERT在人肿瘤组织中的广泛表达,在极少正常组织的低水平表达,临床试验已开始检验将hTERT作为肿瘤免疫治疗目标的可行程度。近期树突状细胞(DC)转运系统及其相关技术的发展和成熟提供了一个快速有效筛选抗原肽的方法。 相似文献
5.
We investigated the regulation of the rat neuron-specific enolase gene using a transient transfection approach. Recent transgenic
mouse studies have shown that a 1.8-kb segment of the ratNSE gene 5′ flanking region, including the first (noncoding) exon but not the first intron, is able to drive expression of a
reporter gene in parallel with endogenousNSE. These data suggest thatcis-acting elements responsible for the spatial and temporal pattern ofNSE gene expression are located within the proximal 1.8 kb of the 5′ flanking sequence. To further investigate this region, we
joined the 1.8-kb regulatory cassette to thecat reporter gene and generated a number of constructs in which the flanking sequence was progressively deleted from the 5′ end.
These constructs were tested by transient transfection into neuronal and nonneuronal cells, followed by an assay for CAT activity.
We found that as little as 255 bp of 5′ flanking sequence was able to confer cell type-specificity on the reporter gene. Further
truncation to 120 bp of 5′ sequence resulted in a sharp downregulation of reporter activity in PC12 cells but a significant
rise in both Neuro-2A neuroblastoma cells and nonneuronal Ltk- cells, indicating thatcis-acting elements controlling the regulation ofNSE in Ltk-, Neuro-2A, and PC12 cells may lie within the 135 bp region covered by this deletion. This region contains an AP-2
site and an element similar in sequence and position to a motif identified in the proximal promoter region of the neuron-specific
peripherin gene. Reduction to 95 bp of 5′ sequence resulted in a slight downregulation of CAT activity in all cell lines tested,
and further truncation to 65 bp of 5′ sequence caused a universal reduction to background levels of CAT activity, concomitant
with the disruption of the basalNSE promoter. Our results show that the 5′ flanking region of theNSE gene is capable of conferring cell type-specificity on a heterologous gene in transfected cells and that elements responsible
for this are located within the proximal 255 bp. 相似文献
6.
目的 克隆出视蛋白基因启动子。方法 以小鼠全基因组为模板,用PCR法克隆出目的大小的片断。然后连接到T-载体上作酶切鉴定,最后测序。结果 酶切结果与预期相符,测序结果与公布序列完全一致。结论 视蛋白基因启动子克隆成功。 相似文献
7.
8.
目的:构建含有目的基因kring5的真核植物细胞穿酸表达载体。方法:应用RT-PCR方法,从正常人肝脏组织中获得kringle5基因,测序后,再通过DNA重组技术,将kringle5基因片段克隆到真核植物细胞表达载体pBI121和pCAMBIA3301上。结果:得到的kringle5基因序列测定结果与文献相符,重组载体pB1k5和pC33k5经酶切鉴定正确,含有植物高效表达CaMV35S启动子。结论:重组载体pB1k5和pC33k5不仅可以在大肠杆菌中稳定复制,而且可以在植物细胞中表达。 相似文献
9.
目的:构建串联的MYC反应元件修饰人端粒酶逆转录酶(hTERT)核心启动子引导酵母胞嘧啶脱氨酶基因Fcy1表达的复制缺陷型腺病毒载体。方法:将串联的MYC反应元件修饰的hTERT核心启动子及下游酵母胞嘧啶脱氨酶基因Fcy1克隆到穿梭质粒pDC316上,上辅助质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染HEK293细胞获得重组复制缺陷型腺病毒并在HEK293细胞中扩增重组病毒。PCR法及斑形成实验鉴定重组腺病毒和病毒滴度。结果:成功获得由6倍和18倍MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1基因表达的复制缺陷型腺病毒载体。结论:MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1基因表达的腺病毒载体为进一步研究骨肉瘤转录靶向基因治疗奠定了基础。 相似文献
10.