流行性乙型脑炎患者体内干扰素变化的临床意义

目的 :了解流行性乙型脑炎 (乙脑 )患者体内干扰素 (IFN)水平的变化。方法 :采用细胞病变抑制法 (CPE)检测5 1例乙脑患者血清及脑脊液 (CSF)中的IFN水平。结果 :(1)急性期血清及CSF中的IFN水平均显著升高 ,恢复期显著下降 ,但仍明显高于正常对照 ;CSF中的含量高于血液 ,并与病情的严重程度关系密切。 (2 )采用IFN肌肉注射治疗的患者用药后血清中IFN升高 ,但CSF中IFN水平未见升高 ,而且临床主要症状及体征改善与未用IFN组无显著差异。结论　 (1)IFN参与了乙型脑炎的发病过程。 (2 )IFN治疗并不能提高疗效 ,临床上不易贸然使用 ,需寻找其它更为有效的抗病毒治疗方法。     

板蓝根化学成分、药理及质量控制研究进展

目的对板蓝根各方面研究进展进行综述。方法按照化学成分、药理作用、质量控制方法、制剂工艺将文献分类综述。结果与结论板蓝根具有抗菌、抗病毒、促进免疫的作用 ,质量标准和提取工艺有待于改进     

2.2.15细胞生长规律的探讨及在药物筛选中应用

目的　探讨 2 .2 .15细胞生长及其分泌HBsAg和HBeAg的规律以及在药物筛选中的应用。方法　利用HBV的体外细胞培养系统 (2 .2 .15细胞系 )建立抗HBV药物筛选的实验技术常规 ,对 2 .2 .15细胞及其分泌HBsAg和HBeAg的特性进行初步观察 ,并在此基础上对几种药物体外抗HBV活性进行研究。结果　选择每孔接种 0 .1mL浓度为 3× 10 8L-1的 2 .2 .15细胞培养至 8～ 12d为细胞指数生长期 ,滴板后第 1天上清中HBsAg和HBeAg均阳性 ,第 12天达高峰且含量最高。药物阿特福韦二吡呋酯、鞣花鞣质、无环鸟苷、α -干扰素对细胞的半数毒性浓度分别为 0 .6 7M ,0 .4 9g/L ,0 .75g/L ,>10× 10 8IU/L ,对病毒HBsAg和HBeAg的治疗指数 (TI)分别为 2 79,4 .4 7;2 7.2 2 ,5 .4 4 ;1,1;1,1。结论　 2 .2 .15细胞抗HBV药物筛选以 3× 10 8L-1/孔培养至 12d作为常规方法较为合适。阿特福韦二吡呋酯、鞣花鞣质均有显著体外抗病毒作用 ,可以作为阳性药物对照。     

An evaluation of the RNase H inhibitory effects of Vietnamese medicinal plant extracts and natural compounds

Context: Acquired immune deficiency syndrome (AIDS) is a severe pandemic disease especially prevalent in poor and developing countries. Thus, developing specific, potent antiviral drugs that restrain infection by human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), a major cause of AIDS, remains an urgent priority.

Objective: This study evaluated 32 extracts and 23 compounds from Vietnamese medicinal plants for their inhibitory effects against HIV-1 ribonuclease H (RNase H) and their role in reversing the cytopathic effects of HIV.

Materials and methods: The plants were air-dried and extracted in different solvent systems to produce plant extracts. Natural compounds were obtained as previously published. Samples were screened for RNase H inhibition followed by a cytopathic assay. Data were analyzed using the Microsoft Excel.

Results and discussion: At 50?μg/mL, 11 plant extracts and five compounds inhibited over 90% of RNase H enzymatic activity. Methanol extracts from Phyllanthus reticulatus and Aglaia aphanamixis leaves inhibited RNase H activity by 99 and 98%, respectively, whereas four extracts showed modest protection against the cytopathic effects of HIV.

Conclusion: The screening results demonstrated that the butanol (BuOH) extract of Celastrus orbiculata leaves, methanol (MeOH) extracts of Glycosmis stenocarpa stems, Eurya ciliata leaves, and especially P. reticulatus leaves showed potential RNase H inhibition and protection against the viral cytopathic effects of HIV-1. Further chemical investigations should be carried out to find the active components of these extracts and compounds as potential anti-HIV drug candidates.     

2012年EASL慢性乙型肝炎病毒感染临床实践指南解读

最近,EASL官方网站上公布了新一版EASL慢性乙型肝炎临床实践指南(2012版)[1],这是在2008版[2]的基础上经增加新近文献,对部分内容进行的更新.更新版指南仍保留了前几版指南的一贯体例和鲜明特点.(1)在文献综述同时穿插其中逐条列出循证证据和提出临床处理推荐意见;(2)重要循证证据文献和推荐意见后逐一列出循证证据级别和推荐强度.循证证据级别和推荐强度分别按GRADE( Grading of Recommendations Assessment Developmentand Evaluation)系统确定.GRADE系统包括证据级别和推荐强度,前者按高、中、低分A、B、C三级,后者按强弱分1、2两级;(3)由于不如美国、亚太等指南是将推荐意见在文献综述后单独列出而一目了然,因此在阅读时需要费更多时间进行归纳、整理后才能更好读懂和理解;(4)具有鲜明的欧洲患者和国情特点,应当联系我国实际来理解和运用.这次指南更新的内容并不多,但其中仍然包括对一些概念的新诠释,也增加了一些新的推荐意见.笔者在仔细阅读和学习的基础上,结合2008版EASL指南,并对照国内外其他指南进行比读[3-5].现将个人浅显的认识和理解与各位临床医生分享,并对其中部分新修改的推荐意见结合我国实际、对我国临床的参考价值进行了评论.个人见解不一定准确,仅供参考.     

法匹拉韦的合成

目的：设计并探索一条工艺稳定、收率较高的抗病毒化合物法匹拉韦（T-705）的合成工艺路线。方法以氨基丙二酸二乙酯盐酸盐为起始原料,氨水氨解后与乙二醛环合得到3-羟基-2-吡嗪酰胺、经硝酸钾硝化后制得3-羟基-6-硝基-2-吡嗪酰胺,再经三氯氧磷氯代、氟化钾氟代制得3,6-二氟-2-氰基吡嗪,水解成盐,最后经过氧化氢（双氧水）氧化制得目标化合物法匹拉韦。结果设计出的合成路线能有效制备目标化合物。结论该合成路线各步反应中除氟取代需要严格去水外,其余各步反应条件较温和且操作简单、收率稳定,适合规模制备。     

女贞子及其活性成分防治呼吸系统疾病的药理作用研究进展

女贞子药对及女贞子的活性成分红景天苷、齐墩果酸和熊果酸均有平喘作用。红景天苷、齐墩果酸和熊果酸有抗脂多糖、脓毒症、休克、百草枯、氯气、油酸和缺氧引起的急性肺损伤作用,也有抗缺氧、香烟烟雾、二氧化硅、博来霉素和野百合碱引起的慢性肺损伤和肺纤维化作用。它们的肺保护作用的共同机制可能是：（1）上调T-bet基因表达和下调GATA3基因表达,调节Th1/Th2之间的平衡,抑制IgE生成和炎性细胞因子表达,减轻肺和气道的炎症反应;（2）上调Nrf-2通路,发挥抗氧化作用,减轻肺组织的氧化应激反应引起的炎性肺损伤;（3）激活PI3K/AKT信号通路和阻滞TLR4/MyD88/NF-κB炎性信号通路,保护肺上皮细胞;（4）阻滞TGF-β1/Smad通路,抑制胶原合成和成纤维细胞增生,减轻肺纤维化形成。女贞子药对和红景天苷有抗病毒性肺炎作用,齐墩果酸和熊果酸具有广谱抗病毒作用,除了直接抗病毒作用外,提高机体的免疫功能也是作用机制之一。     

喜炎平注射液抗Ⅱ型登革病毒作用的体内及体外实验研究

目的 分别通过体外和体内实验研究喜炎平注射液对Ⅱ型登革病毒（Dengue virus serotype 2, DENV2）的抗病毒作用。方法 体外实验以利巴韦林注射液作为阳性对照药物,分别以灭活、抑制进入、治疗性给药以及预防联合维持治疗的方式处理人肝癌细胞株HepG2细胞,在不同时相点收获上清和细胞,分别利用间接免疫荧光（indirect immunofluorescence assay, IFA）和实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR, qPCR）检测DENV2的病毒载量,从而评价喜炎平注射液的体外抗DENV2作用。体内实验以SCID小鼠为实验鼠,腹腔注射HepG2细胞,建立模型小鼠,腹腔注射感染DENV2,次日给予不同剂量（1、2、4 mg/只）的喜炎平注射液,连续给药4 d,部分小鼠于感染第6日取材,利用IFA检测实验鼠脾、肝及血清中病毒载量,并观察实验鼠的生存率。结果 体外实验显示,喜炎平注射液能够灭活DENV2,并抑制DENV2进入细胞,同时无论是治疗还是治疗联合预防给药,均可对DENV2的复制具有良好的抑制作用,即在病毒感染早期及晚期,喜炎平均可发挥抗病毒作用,且优于利巴韦林。进一步在体内实验中同样显示喜炎平具有较好的抗病毒作用,可以降低实验鼠脾、肝及血清中病毒载量,并可提高实验鼠的生存率。结论 喜炎平注射液具有明显的抗DENV2病毒的作用,可为DENV感染的治疗提供新的候选药物。     

大蒜素体外抗猴甲型轮状病毒的研究

目的  研究大蒜素体外抗猴甲型轮状病毒（SA11）的作用。方法  通过病毒滴度测定来确定大蒜素能否抗SA11以及最佳浓度。结果  大蒜素对MA104细胞的最大无毒浓度为100 mg/ml,病毒滴度测定可以得出,50 mg/ml的大蒜素可以抑制SA11感染的MA104细胞出现细胞病变效应（CPE）。结论  一定浓度的大蒜素在体外有抗SA11的作用。

     

草血竭纯化部分对小鼠甲型H1N1流感的疗效

目的探讨草血竭纯化部分对于小鼠甲型H1N1流感的疗效。方法采用滴鼻法建立甲型H1N1流感病毒感染小鼠模型,通过灌胃途径给予不同剂量的草血竭,以给予奥司他韦者为阳性对照,以未给予药物者为病毒对照组。观察14d内小鼠生活状态,计算小鼠肺指数,检测肺组织内流感病毒核酸相对量和病毒滴度。结果甲型H1N1流感病毒对小鼠的半数致死量为10-6。阳性对照组和草血竭高、中剂量组小鼠的存活率均为100%,平均生存日数均为14d,草血竭低剂量组小鼠的存活率为42.86%,平均生存日数为9.14d,而病毒对照组小鼠的存活率及平均生存日数分别为0和3.57d。不同组别小鼠平均生存日数比较,差异有统计学意义(F=8.53,P=0.02);阳性对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组小鼠平均生存日数均高于病毒对照组(P0.05)。阳性对照组和草血竭高剂量、中剂量、低剂量组及病毒对照组肺指数分别为:(0.84±0.07)%、(0.81±0.07)%、(0.84±0.10)%、(0.84±0.10)%和(1.42±0.12)%,差异有统计学意义(P=0.03);病毒核酸相对量分别为:0.37±0.11、0.42±0.06、0.42±0.06、0.65±0.19和1.00±0.06,差异有统计学意义(P=0.04);病毒滴度分别为:2.49±0.12、2.35±0.29、2.43±0.15、2.46±0.12和2.80±0.16,差异有统计学意义(P=0.04)。阳性对照组和草血竭各剂量组的肺指数、肺组织内流感病毒核酸相对量和病毒滴度均低于病毒对照组(P0.05);而阳性对照组的上述指标与草血竭各剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论草血竭纯化部分在体内对甲型H1N1流感病毒具有抑制作用,能够改善甲型H1N1流感小鼠的肺组织的病变,降低病死率。