知母甙元ZMS对老龄大鼠学习、记忆的影响

雄性SD大鼠，10～20月龄时起在饲料中加一定量知母中提取的皂甙元ZMS．到23～24月龄时用三臂等长Y型迷宫作实验，发现其学习和记忆能力明显高于饲料中不加ZMS的平行对照老年大鼠。用放射配基结合法和免疫沉淀法测定两组动物脑M受体密度。ZMS组M1受体密度显著高于对照组．联系M胆碱系统在学习记忆等脑功能中的重要作用，对ZMS上述两方面作用的相互关系进行了讨论。还联系朱丹溪关于衰老时“阳有余而阴不足”的学说．对知母的滋阴作用和抗衰老作用进行了讨论。     

新蛋白质合成介导知母活性成分对M_2受体稳定性的调节作用

目的 探讨知母活性成分ZMS提高CHOm2细胞毒蕈碱样乙酰胆碱2型受体 (M_2受体) mRNA表达的机制.方法 体外培养至80% ～90%融合的CHOm2细胞分为ZMS 1组(单纯添加1×10~(-5) mol/L ZMS作用24 h)、ZMS 2组(添加1×10~(-5) mol/L ZMS作用24 h后加入1 μg/mL环己酰亚胺作用12 h)、ZMS 3组(加入1 μg/mL 环己酰亚胺预处理4 h后加入1×10~(-5) mol/L ZMS作用24 h),以上各组分别设立对照组(以等体积DMSO替代ZMS,其他处理与相应ZMS组相同).各组细胞培养基中均加入放线菌素D抑制mRNA合成,于不同时间点收集CHOm2细胞,Real-time PCR检测M_2受体mRNA相对表达量并计算半衰期.结果 与相应对照组比较,ZMS 1组和ZMS 2组CHOm2细胞M_2受体mRNA的半衰期明显延长,分别为(4.75±0.54)h vs(2.13±0.23)h和(5.43±1.13)h vs (2.46±0.09) h(均P<0.05);添加1 μg/mL 环己酰亚胺预处理的ZMS 3组CHOm2细胞M2受体mRNA半衰期的(3.06±0.23)h与其相应对照组的(3.00±0.20)h比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 ZMS提高M2受体mRNA的稳定性需要有新蛋白质合成的参与.     

知母皂甙元对东莨菪碱所致学习记忆障碍和脑胆碱乙酰转移酶活力降低的影响

目的:观察知母活性成分知母皂甙元(ZMS)对学习记忆和脑中胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性的影响。方法:腹腔内一次注射东莨菪碱建立小鼠拟痴呆模型,用避暗法及跳台法测定学习记忆能力,用~3H-乙酰辅酶A掺入法测定脑组织ChAT活性。结果:ZMS可使东莨菪碱拟痴呆小鼠在学习记忆实验中的错误次数明显减少,潜伏期显著延长,并能显著增强脑内ChAT活性。结论:ZMS能够提高东莨菪碱拟痴呆小鼠的学习记忆能力,增强脑内ChAT的活性,但是,由于ZMS提高ChAT活性没有明显的量效关系,而且Tacrine也有类似作用,所以很可能不是直接提高ChAT活性,而是通过提高脑M受体密度实现的。     

知母皂苷元对拟痴呆大鼠β-淀粉样肽沉积及胆碱能系统功能的影响

目的　观察知母皂苷元 (ZMS)对拟痴呆大鼠模型脑内 β 淀粉样肽沉积及胆碱能系统功能的作用。 方法　单侧基底核内联合注射 β 淀粉样肽2 5-3 5片段 (β AP2 5-3 5)和兴奋性氨基酸建立大鼠拟痴呆模型 ,然后将模型动物分为假手术组 37、模型组和ZMS组 ,采用免疫组织化学方法和图像分析法测定β AP2 5-3 5沉积斑块的面积。用避暗法及跳台法测定动物的学习记忆功能 ,用放射配基结合分析法分别测定脑胆碱乙酰转移酶 (ChAT)活性和M受体密度。结果　一次性脑内联合注射 β AP +IBO后 ,模型大鼠脑内有明显的 β AP斑块沉积 ,而模型大鼠喂服ZMS 6 0d后 ,能有效地减少β AP沉积的面积 ,同时ZMS能明显改善模型动物的学习记忆功能 ,并提高模型动物脑内ChAT活性和M受体密度。结论　ZMS可能对脑内 β AP的沉积有一定的清除作用 ,并对AD低下的胆碱能系统功能有一定的改善和治疗作用     

知母皂甙元对脑内注射β—淀粉样肽痴呆模型大鼠的影响

目的 制造一种新的大鼠痴呆模型,考察模型大鼠学习,记忆和M受体密度的变化,以及知母有效成分知母皂甙元（ZMS）的影响。方法 单侧基底核内联合注射β-淀粉样肽1－40片段（Aβ1－40）和兴奋性氨基酸建立大鼠痴呆模型,然后将模型动物分为假手术组、模型组、阳性对照组和ZMS三个剂量组。用避暗法及跳台法测定动物的学习、记忆功能、用放射配基结合分析法测定脑M受体密度。结果 模型动物造型45d后,避暗法及跳台法实验错误次数增加,潜伏期缩短、脑内M受体密度降低,平行的模型动物喂服知母皂甙无45d后,上述指标明显改善。结论 用单侧脑内定位注射Aβ和兴奋性氨基酸成功地制造了一种新的痴呆模型,ZMS能明显改善其学习,记忆功能并提高其M受体密度。     

知母皂甙元对老年小鼠脑M受体上调机理的研究

用Ｍ受体选择性烷化剂ＢＣＭ将脑内原有受体不可逆地阻断，用３Ｈ—ＱＮＢ测定新生受体的时相曲线，通过数学模型求解生成速率（Ｐｒ）和降解速率常数（Ｋ）。二批平行实验表明，用知母皂甙元（ＺＭＳ）的老年小鼠脑Ｍ受体更新明显快于不用药的对照组，两组半更新时间分别为１１．６２ｈ和１６．５ｈ；受体降解速率常数分别为（０．０５９７±０．０１）／ｈ和（０．０４２±０．００３）／ｈ（Ｐ＜０．０５）；生成速率分别为每小时（９０．２３±１０．６０）ｆｍｏｌ／ｍｇｐｒｏｔｅｉｎ和（５９．４６±４．０３）ｆｍｏｌ／ｍｇｐｒｏｔｅｉｎ（Ｐ＜０．０１）。故认为ＺＭＳ通过相对加快受体的合成来调节衰老动物降低的脑Ｍ受体数。     

ZMS对自然衰老小鼠脑M受体调整作用的时效和量效研究

目的:观察滋阴中药知母中活性成分ZMS的不同剂量和不同疗程对老龄小鼠脑M受体的调整作用.方法:纯系老年Balb/c小鼠,每天胃管灌服一定剂量ZMS,以对M受体无选择性3H-QNB为放射配基,用单点放射配基结合分析法测定脑M受体密度,和灌服溶媒的平行老年小鼠做统计比较.结果:ZMS 0.5-5.0mg/d 2个月后能使老年小鼠脑M受体密度明显高于不服药的同龄对照鼠.ZMS 0.5mg/d剂量下,随用药时间延长,对老龄小鼠脑M受体的上调作用越来越明显,用药60d和160d组与对照组比较有显著差异.上述大、中、小三种剂量组的死亡率与老年对照组做x2检验,均明显降低.结论:知母甙元ZMS对老龄小鼠脑M受体具有上调作用,并与剂量和疗程成正相关.     

知母皂甙元对青年小鼠学习记忆及其大脑胆碱酯酶活力的影响

采用避暗法研究知母皂甙元ＺＭＳ对小鼠学习记忆行为的影响。连续口服３００、１５０、２５ｍｇ／ｋｇＺＭＳ１５天后，东莨菪碱（Ｓｃｏｐ）记忆障碍模型小鼠的避暗回避反应力无明显改善作用，其避暗潜伏期及５ｍｉｎ内错误次数与对照组相比无显著性意义，提示ＺＭＳ不能对抗Ｓｃｏｐ引起的记忆获得障碍；同时观察到不同剂量的ＺＭＳ对脑胆碱酯酶活力没有明显影响。     

知母皂甙元对大鼠脑内总M及M_1受体的影响

目的观察知母皂甙元对青年和老年大鼠脑M及M1受体的不同影响。　方法以对M1受体有相对选择性的哌仑西平为非标记竞争剂 ,3H -QNB为非选择性标记配基 ,建立M和M1受体的放射配基竞争结合分析方法 ,观察知母皂甙元对青年大鼠和老年大鼠脑M和M1受体的影响。　结果与青年大鼠相比 ,老年大鼠脑M及M1受体减少 ,知母皂甙元能上调M和M1受体 ;对正常青年大鼠脑M及M1受体的密度 ,知母皂甙元没有影响。结论知母皂甙元对下降的M及M1受体密度有明显的上调作用 ,但不超过正常值 ,对正常水平的M及M1受体密度 ,知母皂甙元不会造成密度过高     

知母皂苷元及其异构体对老年大鼠学习记忆和脑内M_1受体密度的影响

目的　观察知母皂苷元 (ZMS)及其异构体 (ZMR)对老年大鼠学习记忆和脑内M1受体密度的作用。方法　选择 2 4mon龄SD老年大鼠 ,将动物分为老年对照组、ZMS组和ZMR组 ,并以 3～ 4mon龄青年大鼠作为正常对照 ,用迷宫法测定学习记忆能力 ,采用放射配基结合分析法测定脑内M1受体密度。结果　用药组大鼠连续口服ZMS和ZMR 4 0d后 ,与老年对照组比较 ,其学习记忆能力明显增强 ,脑内M1受体密度升高。结论　知母皂苷元及其异构体对老年性痴呆的胆碱能系统功能渐进性退化有一定的预防和治疗作用