丹参酮生物合成相关SmERF108转录因子的鉴定及其靶基因分析＊

目的 鉴定与丹参酮合成相关转录因子AP2/ERF家族中SmERF108转录因子，并分析转录因子SmERF108的靶基因。方法 利用生物信息学在线分析平台如NCBI、PFAM等分析SmERF108的序列特征；MEGA-X软件用于构建SmERF108与不同功能转录因子的系统进化树；拟南芥原生质体转化法鉴定SmERF108蛋白的亚细胞定位；通过实时荧光定量PCR（Real-time qPCR）对SmERF108基因在丹参不同器官和组织差异表达进行检测；利用酵母体系对SmERF108的转录激活活性进行探究并用酵母单杂技术确定其靶基因。结果 SmERF108具有典型的AP2/ERF保守结构域，属于ERF-B3亚组，系统进化树和保守基序分析显示SmERF108与丹参中SmERF128、青蒿中AaERF2亲缘关系较近且保守基序分布一致；亚细胞定位显示SmERF108蛋白定位于细胞核；SmERF108基因在周皮中表达最高，且呈现周皮（R1）>韧皮部（R2）>木质部（R3）的规律；酵母自激活验证SmERF108具有转录激活活性，同时酵母单杂交确认其能与关键酶基因SmCPS1启动子结合。结论 鉴定到丹参中一个新转录因子SmERF108，生物信息学分析及差异表达分析预测与丹参酮合成相关，分子互作初步证实靶基因为SmCPS1二萜环化酶。     

Redox active or thiol reactive? Optimization of rapid screens to identify less evident nuisance compounds

Compounds that exhibit assay interference or undesirable mechanisms of bioactivity are routinely encountered in assays at various stages of drug discovery. We observed that assays for the investigation of thiol-reactive and redox-active compounds have not been collected in a comprehensive review. Here, we review these assays and subject them to experimental optimization to improve their reliability. We demonstrate the usefulness of our assay cascade by assaying a library of bioactive compounds, chemical probes, and a set of approved drugs. These high-throughput assays should complement the array of wet-lab and in silico assays during the initial stages of hit discovery campaigns to pursue only hit compounds with tractable mechanisms of action.     

基于“证治代谢组学”假说探讨中药（单体/复方）药效物质基础的研究思路与实践＊

中药(单体/复方)药效物质基础研究是中医药现代研究的关键问题之一。然而,目前运用的生化和分子生物学方法很难诠释其多靶点、整体性和动态性的整合调节作用。课题组提出的"证治代谢组学"假说理论指出,不同的证候存在"证相关代谢谱群"和"证相关生物标志物",这可能是中药药效物质基础所在,辨证论治后偏离的代谢网络功能呈现回归趋势。基于"证治代谢组学"假说开展中药(单体/复方)药效物质基础研究,这将为阐释中药(单体/复方)防病治病和养生保健的科学内涵及其对疾病个体的整合调节作用提供新的思路。本文以冠心病为研究载体、气阴虚血瘀证为切入点、活血保心丸为干预措施,就该研究思路的内涵与总体模式、提出的背景与依据、实践的方式与可行性、创新与特色及其研究意义等进行了简要介绍。     

丹参对持续癫痫幼鼠脑损伤保护作用的实验研究

目的 探讨丹参对持续癫痫发作诱发幼鼠脑神经元损伤是否具有保护作用。方法 皮下及腹腔注射贝美格针诱发健康幼龄鼠癫痫持续状态发作。光镜下观察神经元病变情况；电镜观察海马神经元超微结构的改变。结果 持续癫痴组幼鼠脑组织光镜下可见明显的神经元病变。电镜下可见海马区神经元的超微结构病变。丹参治疗组神经元病变均轻于持续癫痴组；而正常对照组未见类似病变。结论 丹参在组织、细胞和亚细胞水平对持续癫病幼鼠脑神经元损伤具有一定的保护作用，为临床有效防治小儿惊厥性脑损伤提供了可靠的实验依据。     

骨内高压丹参治疗后骨髓微循环实验研究

目的:寻找中药对 Legg-Perthes 病及各种骨性关节炎等伴有骨内高压症的治疗方法并研究其治疗机理。方法:将18只骨内高压模型家兔随机分为相等的治疗组和对照组,分别肌肉注射等量的丹参注射液和生理盐水3周,然后分不同时期取材制作电镜标本进行研究。结果:发现治疗组早期骨髓微循环及造血组织病理状态即有显著恢复,晚期基本恢复正常,而对照组骨髓微循环及造血组织各期均呈现明显病理状态。结论:丹参能显著改善骨内高压下的骨髓微循环病理状态,从而降低骨内高压,为临床用中药治疗骨内高压症提供了理论依据。     

The effect of MS-818, a pyrimidine compound,on the regeneration of peripheral nerve fibers of mice after a crush injury

One of the pyrimidine compounds, 2-piperadino-6-methyl-5-oxo-5,6-dihydro(7H)pyrrolo[3,4-d]pyrimidine (MS-818), has neurotropic effects in vitro. Therefore, we studied the effect of MS-818 on the regeneration of the peroneal nerve in C57BL/6J mice after a crush injury. Two test groups, which received a daily intraperitoneal injection of 5 mg/kg or 10 mg/kg MS-818, respectively, were compared with controls, which received daily intraperitoneal injections of physiological saline, over a 14-day period. The maximum foot-width ratio (crushed side/uncrushed side) was obtained on days 1, 8 and 14 after the crush injury, and the various morphometric parameters were evaluated at both 5 and 10 mm distal to the proximal portion of the crush site. The significant effects of MS-818 included a larger maximum foot width (P<0.04) and a greater number of unmyelinated axons per nerve at both levels (P<0.003) in both test groups than in controls. MS-818 had no significant effects on body weight, the increase of total transverse fascicular area after the crush injury, the total number of myelinated fibers with their size distributions, or the number of nuclei of Schwann cells and macrophages. Therefore, we conclude that MS-818 promotes axonal sprouting and elongation after a crush injury in mice.     

复方华蟾胶囊抗小鼠肿中瘤作用的实验研究

目的了解复方华蟾胶囊抗小鼠移植性肿瘤的作用.方法以小鼠肝癌22(H22)、小鼠肉瘤180(S180)为瘤株,应用动物移植性肿瘤的体内试验法对药物进行抗癌药效学试验.结果复方华蟾胶囊灌胃4,2 g/kg@d,连续14 d,对小鼠移植性肝癌实体型生长有明显的抑制作用,抑瘤率分别为38.09%,30.95%.对小鼠移植性S180实体型生长有明显的抑制作用,抑瘤率分别为34.7%,30.08%.复方华蟾胶囊对荷瘤小鼠的胸腺和脾脏重量无影响.结论复方华蟾胶囊在试验条件下有一定抗肿瘤作用.     

老年护理院医院感染病原菌及其耐药特征分析

目的探讨目前老年护理医院院内感染病原菌及其耐药特征。方法对2000年4月-2004年3月徐汇区两家老年护理院出院病人的病史进行统计分析。结果两家老年护理院共计发生医院感染939例次，医院感染率12．86％，检出病原菌284株，阳性率30．28％；病原菌以革兰阴性菌为主，占44．65％，其次为真菌、革兰阳性菌，分别为29．12％、25．92％，位于前3位的病原菌分别为其他真菌（14．36％）、白色念珠菌（12．23％）、铜绿假单胞菌（8．69％）；除嗜麦芽寡养单胞菌外，革兰阴性菌以亚胺培南最敏感，敏感率87％，对氨苄西林、阿莫西林的耐药率〉51％，对头孢哌酮、哌拉西林的耐药率〉33％；MRSA和MRSE的检出率高达86．76％和76．32％；混合感染率34．51％。结论老年护理院医院感染率高．真菌所占的比例高；细菌对抗菌药物的耐药性相当严重。     

复方丹参注射液干扰素治疗乙肝后肝纤维化

目的探讨复方丹参注射液联合干扰素治疗慢性乙肝患者的疗效。方法110例慢性乙肝患者，按随机方法分成①对照组30例，应用普通保肝药物治疗，疗程6个月；②丹参组30例，应用复方丹参注射液（每ml含丹参、降香各1g）30ml加入10％葡萄糖溶液300ml中静脉注射1个月；③IFN组30例，应用IFN—α 3MU，隔日一次肌内注射，3个月；④联合组20例，应用复方丹参注射液30ml加10％葡萄糖溶液300ml静脉注射1个月，IFN-α 3MU，隔日一次肌内注射，3个月。丹参组，IFN组和联合组保肝药物治疗同对照组。四组病例在性别、年龄、病程，治疗前肝功能等方面均无统计学差异。治疗前检测肝功能，肝炎病毒标志，血清HA、IV—C、PCI—Ⅱ，部分病例进行肝穿病理检查。治疗开始后每月检测肝功能，3个月（治疗后）和6个月（随访时）时检测血清HA、IV—C、PCⅢ及乙肝病毒标志，治疗后1年行肝穿病理检查。结果治疗前四组患者血清HA、PCⅢ、IV—C水平无统计学差异；治疗后丹参组、IFN组、联合组血清HA、FCⅢ、IV—C水平较治疗前及对照组有不同程度的降低。结论复方丹参注射液联合IFN治疗可使血清HA、PCⅢ、IV—C有明显下降，肝组织病理改变明显改善，为目前有效的慢性乙肝治疗措施。     

大型尿基复合肥养分偏差的原因分析及措施

介绍大型尿基复合肥装置在生产中引起产品养分偏差的原因及采取的操作措施。