年龄因素对人牙周膜干细胞生物学行为影响的研究

 目的　研究年龄因素对人牙周膜干细胞（periodontal ligament stem cells，PDLSC）生物学行为的影响。方法  选取2017年10月至2018年10月于青岛市口腔医院口腔外科就诊的因阻生齿或正畸需要拔除牙齿的患者18例，根据不同年龄段分为3组，分别为A组（18 ~ 20 岁）、B组（30 ~ 35岁）、C组（50 ~ 55岁），每组6例。原代培养人PDLSC，采用衰老相关β-半乳糖苷酶染色、MTT法检测各组细胞衰老程度和增殖能力。成骨诱导人PDLSC，采用碱性磷酸酶（ALP）染色和茜素红染色检测各组细胞的成骨分化能力。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组多能性相关转录因子Nanog和Sox2的表达水平。结果　各组均成功原代培养出人PDLSC，经衰老相关β-半乳糖苷酶染色发现，A组阳性染色细胞率最低、B组次之、C组最高，组间差异均有统计学意义（均P < 0.05）。通过MTT法检测发现，不同年龄组OD值比较，差异有统计学意义（F = 22.354，P = 0.009），且各组OD值均随着培养时间的延长而增大（F = 28.367，P = 0.018），年龄与时间之间有明显的交互作用（F = 26.431，P = 0.015）。ALP染色和茜素红染色均发现，A组染色面积百分比大于B组和C组，B组染色面积百分比大于C组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。qRT-PCR结果显示，A组Nanog和Sox2的相对表达量均高于B组和C组，B组Nanog和Sox2的相对表达量高于C组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。结论　随着年龄增加，衰老的人PDLSC增多，其增殖能力、成骨分化能力以及多能性相关转录因子的表达水平也显著下降。     

年龄因素对人牙周膜干细胞生物学行为影响的研究

目的　研究年龄因素对人牙周膜干细胞（periodontal ligament stem cells,PDLSC）生物学行为的影响。方法  选取2017年10月至2018年10月于青岛市口腔医院口腔外科就诊的因阻生齿或正畸需要拔除牙齿的患者18例,根据不同年龄段分为3组,分别为A组（18 ~ 20 岁）、B组（30 ~ 35岁）、C组（50 ~ 55岁）,每组6例。原代培养人PDLSC,采用衰老相关β-半乳糖苷酶染色、MTT法检测各组细胞衰老程度和增殖能力。成骨诱导人PDLSC,采用碱性磷酸酶（ALP）染色和茜素红染色检测各组细胞的成骨分化能力。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组多能性相关转录因子Nanog和Sox2的表达水平。结果　各组均成功原代培养出人PDLSC,经衰老相关β-半乳糖苷酶染色发现,A组阳性染色细胞率最低、B组次之、C组最高,组间差异均有统计学意义（均P < 0.05）。通过MTT法检测发现,不同年龄组OD值比较,差异有统计学意义（F = 22.354,P = 0.009）,且各组OD值均随着培养时间的延长而增大（F = 28.367,P = 0.018）,年龄与时间之间有明显的交互作用（F = 26.431,P = 0.015）。ALP染色和茜素红染色均发现,A组染色面积百分比大于B组和C组,B组染色面积百分比大于C组,差异均有统计学意义（均P < 0.05）。qRT-PCR结果显示,A组Nanog和Sox2的相对表达量均高于B组和C组,B组Nanog和Sox2的相对表达量高于C组,差异均有统计学意义（均P < 0.05）。结论　随着年龄增加,衰老的人PDLSC增多,其增殖能力、成骨分化能力以及多能性相关转录因子的表达水平也显著下降。     

新型复合纳米银的热凝型丙烯类软衬基托修复材料生物学相容性评价

目的：探讨复合纳米银的热凝型丙烯类口腔修复用树脂基托软衬材料的生物安全性,为新型口腔修复材料的开发与临床应用提供安全性参考。方法①复合纳米银的口腔修复软衬材料的制备及使用含10%FBS的正常α-MEM培养液提取材料浸提液。②镜下观察含有浸提液的α-MEM与正常α-MEM培养的牙周膜干细胞的形态及生长状态差异,并比较两组细胞体外的增殖、分化能力。③经皮下注射浸提液及生理盐水后比较两组间有无迟发型超敏反应。④将C57小鼠随机分为浸提液注射组和生理盐水注射组,分别经腹腔内注射纳米银软衬材料浸提液及生理盐水后对小鼠的心、肺、肝、脾、肾取材进行组织学检测。结果①牙周膜干细胞在材料浸提液中状态良好,生长动力学检测（MTT）与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;两组间成骨、成脂分化能力比较,虽然实验组较对照组呈现略有下降趋势,但最终定量分析发现差异无统计学意义（P〉0.05）。②腹腔内注射实验表明,材料的生物相容性好,无毒性及致敏性。结论复合纳米银的软衬基托修复材料在口腔应用中具有良好的生物学相容性,将有望在临床中获得广泛应用。     

磷酸三钙/壳聚糖支架与牙周膜干细胞混合培养的动物实验

目的:检测磷酸三钙(TCP)/壳聚糖支架在动物实验中是否适合培养牙周膜干细胞(PDLSC)。方法:制作3种不同比例TCP/壳聚糖支架,加入PDLSC和TCP/壳聚糖支架混合培养24 h后植入裸鼠背部皮下,4周后切取移植物,HE染色和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)免疫组化染色,镜检。结果:PDLSC在TCP/壳聚糖支架上生长良好,TCP/壳聚糖支架比单纯壳聚糖支架降解率减低,3组支架均有Col-Ⅰ生成。结论:TCP/壳聚糖支架适合培养PDLSC。