二苯乙烯苷对H2O2诱导的血管内皮细胞P选择素和E选择素表达的影响

目的研究二苯乙烯苷(TSG)对H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞P选择素和E选择素表达的影响。方法运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测P选择素和E选择素的mRNA和蛋白表达。结果 200μmol/L的H2O2作用人脐静脉内皮细胞24 h,P选择素和E选择素的mRNA和蛋白表达水平均明显上调,与空白对照组比较,差异具有显著性(P<0.01),但TSG预处理人脐静脉内皮细胞4 h后再加200μmol/L H2O2作用24 h,H2O2诱导的内皮细胞P选择素和E选择素的mRNA和蛋白表达水平降低,与H2O2处理组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论 TSG通过降低黏附分子P选择素和E选择素的表达可保护内皮细胞免受氧化应激损伤,影响动脉粥样硬化进程。     

不同形态低切应力对小鼠腹主动脉重构及内皮P选择素表达的影响

目的 制备小鼠腹主动脉狭窄的实验模型,探讨短期不同形态的低剪切应力对动脉重建及内皮P选择素表达的影响.方法 24只小鼠随机平均分为3个实验组(1h组、4h组、24h组)和1个正常对照组,实验组用动脉银夹建立腹主动脉局部狭窄模型,彩色多普勒超声检测狭窄近心端和远心端血流动力学参数,计算切应力值;血管标本行HE染色和内皮P选择素免疫组织化学染色,定量分析动脉病理形态学的改变和半定量分析内皮P选择素表达的强度.结果 狭窄动脉近心端和远心端血流分别形成低切应力区和振荡性低切应力涡流区,并且在所有观察点狭窄动脉近心端和远心端血管发生不同程度的动脉重建与内皮P选择素表达,但近心端较远心端更明显(P<0.05).结论 血流动力学改变在较短的时间内可引起动脉重构及内皮P选择素的表达,而且不同形态低切应力导致的病变程度是不同的.     

冠心病患者血浆P选择素水平分析及其与预后的相关性研究

目的观察冠心病患者血浆P选择素（P—Selectin）水平变化,评价冠心病患者P—Selectin水平的影响因素及其与患者预后的关系。方法冠心病患者应用酶联免疫法测定血浆中P—Selectin水平,记录心血管疾病危险因素、伴随临床疾病、超声心动图、冠状动脉造影结果及介入治疗措施等,记录随访1a时心血管病事件。结果冠心病患者P—Selectin水平高于对照组,P—Selectin水平与冠心病严重程度、高敏C反应蛋白（hsCRP）、肌酸肌酶同工酶（CK—MB）、血胆固醇（CHO）水平及严重病变支数相关。临床合并糖尿病和介入治疗术后的冠心病患者P—Selectin较高。患者住院时P-Selectin水平增高与随访1a发生心血管病事件相关。结论冠心病患者P—Selectin水平升高能够反映病情的严重性,而且预示患者1a内发生心血管事件的危险性增加。     

持续气道正压通气治疗对阻塞性睡眠呼吸暂停—低通气综合征患者血浆一氧化氮、内皮素1和可溶性P选择素水平的影响

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停/低通气综合征患者血浆一氧化氮、内皮素1和可溶性P选择素水平的变化及持续气道正压通气治疗对其的影响。方法持续气道正压通气治疗前后分别采用硝酸盐还原酶法、放射免疫均相竞争分析法和酶联免疫法测定阻塞性睡眠呼吸暂停—低通气综合征患者血一氧化氮、内皮素1和可溶性P-选择素水平。结果阻塞性睡眠呼吸暂停/低通气综合征患者血一氧化氮水平(63.41±27.68μmol/L)明显低于健康对照者(83.26±47.74μmol/L),内皮素1水平(71.56±23.33μg/L)和可溶性P选择素水平(131.13±77.93mg/L)明显高于健康对照者(58.49±15.02μg/L和32.90±55.73mg/L);但阻塞性睡眠呼吸暂停/低通气综合征患者血一氧化氮水平明显高于伴有心脑血管疾病患者(59.59±34.19μmol/L),内皮素1水平和可溶性P选择素水平明显低于伴有心脑血管疾病患者(89.01±44.87μg/L和160.83±125.45mg/L)。持续气道正压通气治疗可明显提高一氧化氮水平(60.46±23.53μmol/L比75.11±23.91μmol/L)、降低内皮素1(73.60±20.78μg/L比61.84±18.79mg/L)和可溶性P选择素(137.34±90.35μg/L比89.56±34.60mg/L)水平(P<0.05)。结论阻塞性睡眠呼吸暂停/低通气综合征患者无论是否合并心脑血管疾病,血浆一氧化氮、内皮素1和可溶性P选择素均存在明显异常;而持续气道正压通气治疗可有效纠正其异常。     

Isotype controls in phenotyping and quantification of microparticles: a major source of error and how to evade it

BACKGROUND: The characterisation and quantification of cell-derived microparticles (MPs) using flow cytometry are often complicated by a low staining intensity and a non-discrete signal pattern of many cell surface antigens. Fluorescence-labelled isotype controls (ICs) are commonly used to set limits for the discrimination of antigen positive vs. negative events. OBJECTIVES: The influence of different ICs on the characterisation and quantification of MPs was studied. Antigen negative MPs stained with an antibody of interest were evaluated as an alternative control. METHODS: MPs were prepared from platelets, endothelial cell lines and leucemic cell lines and stained with fluorescein isothiocyanate (FITC) or phycoerythrin (PE) labelled antibodies or isotype controls. Results are given as the mean fluorescence intensity (MFI) or percentage of "false-positive" events above a fluorescence intensity >1. RESULTS: Using identical instrument settings, seven different ICs (FITC-conjugates N=3, PE-conjugates N=4) resulted in a wide range of MFI and percentage of positive events with a mean coefficient of variation (CV) of 0.77. Instead, NMPs showed less variability with a mean CV of 0.50 and allowed a reliable and reproducible quantification of MPs when set as controls with <2% false-positive events above an FI >1. As a result, the expression of certain antigens (e.g. CD62P) was lower compared to previous reports in the literature. CONCLUSIONS: Diversity in the staining intensity of isotype controls is a potential source of error in the characterisation and quantification of MPs by flow cytometry. The use of antigen negative MPs to adjust instrument settings is suggested.     

缺血预适应对缺血再灌注大鼠肾脏黏附分子表达的影响

目的 研究缺血预适应对缺血再灌注大鼠肾脏黏附分子表达的影响.方法 采用缺血6 min,再通血4 min,循环4次的缺血预适应方案,对Wistar大鼠肾脏进行缺血预处理,再缺血60 min后进行再灌注,与缺血再灌注大鼠肾脏进行比较,观察大鼠肾功能及肾内黏附分子ICAM-1、P-Selectin、E-Selectin的表达变化.结果 缺血预适应大鼠肾脏内的黏附分子ICAM-1、P-Selectin、E-Selectin表达明显低于缺血再灌注组,在第48 h 其血清肌酐也明显低于缺血再灌注组大鼠.结论 缺血预适应对肾功能有保护作用,其机制与减少缺血再灌注肾脏内黏附分子的表达有关.     

川芎嗪对实验性溃疡性结肠炎治疗作用的研究

目的：研究川芎嗪对小鼠溃疡性的炎的治疗作用及其机制。方法：在小鼠溃疡性结肠炎模型上观察川芎嗪的治疗作用,并用免疫组化LSAB（labelled streptavidin biotin)法检测肠组织中P选择素的表达,用ELISA法检测血浆P选择素含量。结果：溃疡性结肠炎小鼠结肠粘膜充血、水肿、糜烂或溃疡性形成;粘膜炎症细胞浸润（主要为中性粒细胞）及隐窝脓肿形成;川芎嗪治疗组小鼠未见明显病理变化,疾病活动指数（DAI）和病理学评分明显改善。免疫组化和ELISA检测发现,溃疡性结肠炎时肠组织P选择素表达和血中P选择素水平显著升高,经川芎嗪治疗的小鼠P选择素明显下降。结论：P选择素与溃疡性结肠炎密切相关,川芎嗪对溃疡性结肠炎具有治疗作用。     

急性冠状动脉综合征患者血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa和P选择素水平的变化

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血小板聚集功能及抗血小板治疗对其影响。方法入选ACS患者40例,分为不稳定型心绞痛组(26例)和急性心肌梗死组(14例),采用流式细胞术测定ACS患者应用阿司匹林及氯吡格雷抗血小板治疗前后血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa(PAC-1)和P选择素(CD62P)水平的变化,并与疑诊冠心病但冠状动脉造影检查正常的对照组(30例)进行比较。结果治疗前,不稳定型心绞痛和急性心肌梗死患者PAC-1、CD62P的表达率(%)均高于对照组(PAC-1:62.47±3.91和67.91±10.42比32.46±8.93;CD62P:16.73±3.74和18.53±5.62比7.67±2.21,均为P<0.05),经双重抗血小板治疗5 d后,两组PAC-1、CD62P的表达率(%)较治疗前均明显降低(PAC-1:43.62±9.67比62.47±3.91,46.55±4.86比67.91±10.42,均为P<0.05;CD62P:12.38±3.29比16.73±3.74,13.39±3.41比18.53±5.62,均为P<0.05),但仍高于对照组(均为P<0.05)。结论 ACS患者应用阿司匹林及氯吡格雷双重抗血小板治疗,可有效抑制血小板活化。     

P-选择素在牵拉性撕脱伤血管上的表达

目的：探讨牵拉性撕脱伤血管上的P－选择素的表达。方法：用免疫组织化学染色标记不同牵拉力下损伤血管P－选择素的表达。结果：撕脱伤静脉内膜及管腔内及管壁的附壁血检上有P－选择素的表达，牵拉力的增高强阳性就越明显。结论：提示P－选择素与内皮细胞的损伤、血小板在损伤血管内滞留、血栓形成有关。     

断指再植患者血浆血管性血友病因子和P选择素动态监测的临床意义

目的 通过对断指再植患者血浆中血管性血友病因子(VWF)与P选择素(GMP-140)水平变化的动态观察,探讨断指再植术患者血液出现高凝状态与再植成活率的关系.方法 选择2004年12月至2006年12月断指再植患者80例(再植组),采用定量ELISA法测定再植组患者术前、术后的VWF与P选择素水平,并与健康对照组比较;观察再植组术后2个指标的动态变化;比较同一观察时间点再植成活组与失败组间VWF与P选择素水平.结果 再植组与健康对照组间VWF水平差异有统计学意义(F=14.76,P<0.01);再植组血浆VWF水平在术后1、4、8、16 h分别为(1 715±493)、(1 396±549)、(1 266±504)、(1 163±436)U/L,与健康对照组(903±187)U/L比较,差异有统计学意义(P<0.01);再植组与健康对照组间P选择素水平差异有统计学意义(F=11.76,P<0.01);再植组血浆P选择素水平在术后1、4、8、16、24 h分别为(14.7±2.6)、(12.5±3.0)、(11.8±3.2)、(11.1±3.0)、(10.5±2.6)μg/L,与健康对照组(9.1±1.2)μg/L比较,差异有统计学意义(P<0.01).再植成活组VWF水平在术前、术后1、4、8、16、24、48、72 h分别为(854±209)、(1 535±389)、(1 177±407)、(1 040±283)、(958±216)、(829±193)、(777±151)、(713±137)U/L;再植失败组分别为(1 202±164)、(2 333±243)、(2 146±161)、(2 039±244)、(1 865±170)、(1 645±283)、(1 427±331)、(1 188±262)U/L,同一时间点组间比较,差异有统计学意义(t值分别为4.44、5.12、6.10、8.43、10.17、8.85、5.10、4.61,P均<0.05);再植成活组P选择素水平在术后1、4、8、16、24、48、72 h分别为(13.9±2.5)、(11.2±2.0)、(10.2±1.6)、(9.6±1.2)、(9.2±0.9)、(9.5±0.6)、(9.3±0.4)μg/L;再植失败组分别为(17.2±1.0)、(16.9±1.0)、(17.0±1.3)、(16.1±1.1)、(14.9±1.5)、(13.8±1.4)、(12.8±1.2)μg/L;同一时间点组间比较,差异有统计学意义(t值分别为5.22、9.91、10.35、12.79、9.46、9.45、9.33,P均<0.01);术后不同时间段VWF、P选择素有动态变化,在术后1～4 h升高明显,持续至24、48 h后逐渐恢复至术前水平.结论断指再植术后血液呈高凝状态与VWF与P选择素水平有关.动态监测两者水平对判断血液出现高凝状态和抗凝治疗有一定的指导意义.