重组人神经营养因子-4/5蛋白抗三氧化二砷神经毒作用

目的初步观察重组人神经营养因子-4／5（hNT－4／5）蛋白对三氧化二砷毒性的抑制作用。方法利用hNT－4／5蛋白具有抗神经毒性的特点,采用本实验室克隆表达及部分纯化的具有天然hNT－4／5蛋白生物学活性的重组hNT-4／5蛋白,以不同水平的重组hNT4／5蛋白（0－100μl）与不同浓度的As2O3（0－160μmol／L）同时加入各组鸡胚前脑神经细胞和PC12细胞培养液中共同孵育24－48小时,观察其对染毒鸡胚前脑神经细胞存活和PC12细胞突起生长的影响作用。结果在鸡胚前脑神经细胞和PC12细胞中与As2O3共同培养48小时后,对照组与实验组的细胞存活率差异有显著性,而且细胞存活率和突起数目随hNT－4／5浓度增高而提高和增加。结论初步观察到重组hNT4／5蛋白具有抑制As2O3的毒性作用,为从基因工程途径寻找抗环境毒物因子提供了依据。     

三氧化二砷对神经母细胞瘤细胞增殖的影响

目的探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对儿童神经母细胞瘤有无潜在的治疗价值及伍用细胞因子有无增强疗效的作用。方法应用四甲基偶氮唑蓝法于体外观察Ａｓ２Ｏ３对神经母细胞瘤细胞株ＳＪ－Ｎ－ＳＨ增殖的影响；并观察Ａｓ２Ｏ３伍用重组人γ－干扰素、肿瘤坏死因子、白细胞介素４、６、１０后的情况。结果０．５～４μｍｏｌ／Ｌ的三氧化二砷明显抑制ＳＪ－Ｎ－ＳＨ细胞的增殖，Ａｓ２Ｏ３伍用γ－干扰素、白细胞介素４可明显增强Ａｓ２Ｏ３对ＳＪ－Ｎ－ＳＨ细胞增殖的抑制，而其他几种细胞因子无明显作用。结论Ａｓ２Ｏ３为治疗神经母细胞瘤的有效药物，联合应用合适的细胞因子可增强Ａｓ２Ｏ３的疗效。     

不同表面处理方法对纯钛表面形貌及成分的影响

分别用HNO3、热H2SO4/H2O2、热H2SO4/HC l处理纯钛片30 m in。采用扫描电子显微镜、X射线光电子能谱对试样的表面形貌及成分进行分析。扫描电镜结果显示,HNO3组表面形貌光滑,平整;而H2SO4/HC l、H2SO4/H2O2处理方法可获得粗糙的表面,其中H2SO4/HC l处理后的表面孔隙更大。X射线光电子能谱分析表明:三组钛片表面的主要成分均为钛、氧和碳,H2SO4/H2O2组的碳含量最低,而H2SO4/HC l组碳含量最高。HNO3组和H2SO4/H2O2组表面除了T iO2还存在T i2O3、T iO、金属T i等多种物质,而H2SO4/HC l组表面只存在T iO2。     

腹腔镜子宫肌瘤剜除术对人体蛋白质氧化、脂质过氧化影响的研究

目的探讨腹腔镜手术对子宫肌瘤患者体内蛋白质氧化、脂质过氧化的影响。方法将40例子宫肌瘤患者随机分为腹腔镜组和开腹组两组,每组20例。测定两组患者腹腔镜手术前、手术结束时(气腹解除后5min)及术后24h血浆晚期氧化蛋白产物(AOPP)、丙二醛、血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性和血浆总抗氧化能力(AOA)的水平,以及开腹手术术前、手术结束(缝合腹壁时)及术后24h的水平。结果(1)腹腔镜组手术结束时血浆AOPP、丙二醛水平高于术前[(69±13)μmol/Lvs(50±9)μmol/L,P<001;(252±055)μmol/Lvs(185±019)μmol/L,P<001],血浆GPx活性、AOA水平低于术前[(029±009)U/mlvs(062±027)U/ml,P<001;(090±024)mmol/Lvs(141±039)mmol/L,P<001];术后24h血浆AOPP、丙二醛、GPx与术前比较差异无统计学意义[(50±10)μmol/L,P>005;(205±068)μmol/L,P>005;(052±006)U/ml,P>005],但AOA水平仍低[(100±031)mmol/L,P<001]。(2)开腹组手术结束时血浆AOPP、丙二醛含量比术前略有升高[(53±100μmol/Lvs(52±70)μmol/L,P>005;(209±051)μmol/Lvs(183±064)μmol/L,P>005],GPx活性、AOA水平比术前略有下降[(051±017)U/mlvs(057±021)U/ml,P>005;(120±046)mmol/Lvs133±037,P>005];术后24h血浆AOPP、丙二醛与术前相比升高[     

三氧化二砷抑制人眼脉络膜黑色素瘤细胞生长的体外研究

目的研究三氧化二砷（ATO）对人眼脉络膜黑色素瘤细胞系OCM-1细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法OCM-1细胞经ATO处理后,采用噻唑蓝比色法测定细胞的生长状况;采用流式细胞技术观察细胞发生坏死和凋亡的比率;使用透射电镜观察细胞的形态改变,并测定细胞内谷胱甘肽过氧化物酶的活性;使用激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜的电位变化。结果ATO在一定浓度范围内可抑制OCM-1细胞的生长（P〈0．05）,且与时间和浓度有关,24h内ATO对OCM-1细胞的半数抑制率（Ic50）为16．8μmol／L。不同浓度ATO所致的细胞坏死率较细胞凋亡率高。电镜下可见OCM-1细胞出现坏死和凋亡等形态改变。ATO作用后细胞内谷胱甘肽过氧化物酶的活性降低（P〈0.05）;细胞线粒体膜电位下降,且与作用时间和ATO浓度有关（P〈0．01）。结论ATO可抑制OCM-1细胞生长,其主要机制为降低细胞内谷胱甘肽过氧化物酶的活性,使细胞线粒体膜电位下降,造成能量合成障碍,最终导致细胞坏死和凋亡。（中华眼科杂志,2005,41：887-891）     

当归对氧化低密度脂蛋白致内皮细胞分泌一氧化氮下降和细胞间粘附分子-I表达升高的影响

目的：探讨当归对氧化低密度脂蛋白（ＯＬＤＬ）致血管内皮细胞（ＶＥＣ）损伤的细胞保护作用。方法：以人脐静脉内皮细胞９ＨＵＶＥＣ）为实验模型,采用细胞培养,免疫组化等技术观察ＯＫＬＤＬ对ＶＥＣ分泌一氧化氮（ＮＯ）及细胞间粘分子－１（ＩＣＡＭ－１）表达的影响并研究当归的保护作用。结果：ＯＬＤＬ使ＥＣ分泌的ＮＯ显著降低,ＩＣＡＭ－１的表达显著升高。当归明显忱一作用,而阿托品能阻断当归的作用结论：当归能拮抗     

载银氧化石墨烯对变异链球菌生长及生物膜形成的影响

目的探讨载银氧化石墨烯（GO/Ag）纳米复合物对变异链球菌（S.mutans）生长及生物膜形成的抑制作用。 方法应用梯度稀释法检测GO/Ag、氧化石墨烯（GO）、纳米银（AgNPs）对变异链球菌的最小抑菌浓度（MIC）;菌落形成单位计数法比较GO/Ag、GO、AgNPs对变异链球菌的抑制作用;采用结晶紫染色法和XTT法测定变异链球菌24 h生物膜的生成量和活性;激光共聚焦扫描显微镜（CLSM）观察生物膜形态和计算24 h生物膜的活菌比例。数据以单因素方差分析（One-Way ANOVA）和LSD-t检验进行统计分析。 结果GO/Ag对变异链球菌的MIC为0.16 mg/mL。0.64 mg/mL GO/Ag对变异链球菌的抑菌率为（82.90 ± 4.87）%,与对照组间的差异有统计学意义（t= 30.804,P<0.001）。而GO和AgNPs材料浓度提升至2.56 mg/mL时,肉眼观察细菌仍未见明显减少。在0.16 mg/mL GO/Ag浓度下,变异链球菌生物膜生成量和活性的减少率分别为（25.12 ± 0.01）%和（38.90 ± 3.42）%,活菌比例为（42.76 ± 19.48）%,与空白对照组间的差异均有统计学意义（t_生成量= 7.274,P_生成量<0.001;t_活性= 7.765,P_活性<0.001;t_活菌比例= 10.412,P_活菌比例<0.001）。 结论与AgNPs和GO相比,GO/Ag新型纳米复合物对变异链球菌的生长具有较好的抑制作用,并能抑制其生物膜形成。     

砷剂和沙利度胺单用及联用对人骨髓增生异常综合征荷瘤小鼠抗瘤作用的研究

目的探讨砷剂（arsenic trioxide,ATO）和沙利度胺（thalidomide,THAL）单用及联用在人骨髓增生异常综合征（MDS）荷瘤小鼠体内抗瘤作用及其机制。方法（1）建立动物模型：取对数生长期人MDS细胞株MUTZ-1细胞接种于第一代4～6周龄SCID小鼠和裸鼠（BALB／CA-nμde）的肩胛皮下;用组织病理学、免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）、流式细胞术免疫学、染色体分析等方法对荷瘤组织来源及其生物学特性进行鉴定。动物传代,观察第二代61只SCID小鼠和8只裸鼠的成瘤率和成瘤潜伏期。（2）动物实验：随机取56只MDS荷瘤小鼠,分为治疗组40只（ATO、THAL单用及联用）和对照组16只（生理盐水和未治疗）;用病理学、IHC、微血管密度计数（microvessel densitycount,MVD）、DNA凝胶电泳、PI染色、TUNEL染色等多参数方法,观察药物对各组荷瘤小鼠生长、瘤体大小、生存期、存活率及细胞凋亡等影响。结果（1）动物模型的建立：SCID小鼠成瘤率（98．4％,60／61）明显高于裸鼠（62．5％,5／8）（P=0．0027）;SCID小鼠成瘤潜伏期（中位数12d）较短;而裸鼠潜伏期明显延长（中位数26d）（Z=4．605,P〈0．001）。荷瘤组织的来源鉴定结果证实为人源性的、保持了原细胞系（MUTZ．1细胞）生物学特性,表明动物模型建立成功。（2）动物体内实验：与对照组比较,大剂量ATO（7．5μg）单用有较强的抑制荷瘤生长（F=146．94,P=0．000）和诱导凋亡作用（F=30．10,P=0．000）,但副作用较大,小鼠难以耐受;小剂量ATO（5．0μg）单用亦有明显的抑瘤作用和诱导细胞凋亡作用、副作用较轻,小鼠平均生存期较长（F=25．11,P〈0．01）、疗效较好。大剂量ATO与THAL联用副作用大、小鼠平均生存期较短（P〈0．01）,疗效不佳。THAL单用抑瘤有效,但显效较迟缓,其机制并非诱导细胞凋亡（P〉0．05）,而可能与抑制血管生成机制有关。结论（1）成功建立人MDS-SCID荷瘤小鼠模型;（2）小剂量（5．0wg）ATO在MDS荷瘤小鼠体内抑瘤有效、副作用较轻,能延长荷瘤小鼠生存期、提高存活率,其机制与诱导细胞凋亡有关。     

复合掺杂半导体光催化材料消毒技术的建立及效果评价

目的 设计和研制一种具有自动消毒功能的复合掺杂半导体光催化材料。方法 通过量子化学理论计算半导体氧化物的结构和性能,设计和筛选在可见光条件下具有光催化氧化活性的复合半导体氧化合物,将其掺入硅酸盐材料,通过特殊工艺研制出复合掺杂半导体光催化材料,并对该材料进行消毒效果评价。结果 研制复合掺杂半导体光催化材料,具有自动杀灭细菌和病毒的作用。结论 复合掺杂半导体光催化材料,通过催化氧化分解H₂O产生强氧化性自由基杀灭细菌和病毒,消毒效果达到国家标准,是一种具有见光自动消毒的新型生态环境材料。