高效液相-荧光检测法测定兔血浆羟基喜树碱方法的研究

目的 :为了测定羟基喜树碱在人体内的血药浓度 ,建立高效液相 -荧光检测法以测定兔血浆中羟基喜树碱的含量。方法 :色谱柱为DiscoveryC18(15cm× 4 6cm ,5 μm) ,流动相为柠檬酸缓冲液 -乙腈 - 75nmol·L-1磷酸二氢钾 (70∶2 3∶7) ,75nmol·L-1磷酸二氢钾中含 1%三乙胺。流速为 1 0mL·min-1,柱温为 4 0℃ ,荧光检测波长为λex36 3nm和λem5 30nm。结果 :该方法的线性范围为 13 76 5 6～ 195 7 4 4 6 8ng·mL-1(r =0 9993) ;提取回收率和方法回收率分别为 80 90 %～ 10 3 5 9% ,10 2 72 %～ 10 8 16 % ;日内RSD≤ 7 4 9% ,日间RSD≤ 9 4 0 %。最低检测限为 5 2ng·mL-1。结论 :主效渡相—荧光法专属性强 ,重现性好 ,操作简便 ,可用于羟基喜树碱的药代动力学研究和血药浓度监测。     

含羟基喜树碱联合方案治疗中晚期非小细胞肺癌

目的 :观察含羟基喜树碱 (HCPT)联合方案治疗中晚期非小细胞肺癌 (NSCLC)患者的客观疗效及毒副作用。方法 :4 6例中晚期非小细胞肺癌患者为治疗组 ,应用含羟基喜树碱方案化疗 ,其中 2 5例肺腺癌患者接受HFAP方案 ,2 1例肺鳞癌患者接受HCAP方案 ,4周为一周期 ,2周期为一疗程 ;以同期住院的未用HCPT联合化疗的同类患者 4 2例作为对照组 ,其剂量、周期、疗程与治疗组相同 ,但不用HCPT。结果 :治疗组 4 3例患者完成一疗程治疗 ,肺腺癌有效率为 5 6 % ,CR 2例 ,PR 12例 ;肺鳞癌有效率为 5 5 5 % ,CR为 0 ,PR 10例 ,总有效率 (CR +PR)为 5 5 8% ;对照组 4 2例均完成一疗程治疗 ,肺腺癌有效率为37 5 % ,CR 1例 ,PR 9例 ;肺鳞癌有效率为 33 3% ,PR 6例 ,有效率 35 7% ;两组间差异显著 (P <0 0 5 )。治疗组和对照组的毒副反应主要表现为食欲不振、脱发、恶心呕吐和白细胞及血小板减少 ,两组毒副反应发生率无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 :羟基喜树碱联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌疗效确切 ,副作用可耐受 ,该药是治疗非小细胞肺癌较为有效的药物 ,值得进一步在临床中观察和研究。     

羟基喜树碱联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

目的观察羟基喜树碱联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的疗效和毒副作用.方法 56例晚期非小细胞肺癌患者中,50例肺腺癌接受HEMe方案化疗,6例肺鳞癌接受HE方案化疗.结果总有效率为39.3%,肺腺癌有效率为42.0%,肺鳞癌有效率为16.7%.结论羟基喜树碱联合化疗治疗非小细胞肺癌疗效好,毒副作用小,费用低,值得临床推广应用.     

羟基喜树碱纳米乳的制备及其抗癌作用初步研究

目的制备羟基喜树碱纳米乳注射液,初步研究其抗癌作用。方法运用相变温度法制备羟基喜树碱纳米乳注射液,以MTT法测定羟基喜树碱纳米乳注射液与羟基喜树碱注射液对小鼠S180癌细胞的抑制作用,并比较了它们对小鼠移植瘤Heps抑制作用。结果羟基喜树碱纳米乳注射液与羟基喜树碱注射液对小鼠S180癌细胞的IC50分别为131和455μmol/L;与羟基喜树碱注射液组相比,羟基喜树碱纳米乳注射液抑制Heps的肿瘤生长作用可增加145%(P<005)。结论羟基喜树碱制备成纳米乳注射液后大大提高了其抑制癌细胞的能力。     

羟基喜树碱联合草酸铂方案对人大肠癌细胞作用的研究

目的探讨羟基喜树碱(hydroxycampothecin,HCPT)、草酸铂(oxaliplatin,L-OHP)以及两药联合对人大肠癌细胞株的作用机制.方法建立人大肠癌裸鼠实验动物模型,腹腔内注入HCPT、L-OHP及HCPT L-OHP后光镜、电镜观察细胞凋亡形态,流式细胞仪分析细胞凋亡比率的变化,免疫组织化学检测p53、Fas-L的表达.结果HCPT组和HCPT L-OHP组肿瘤结节较用药前及对照组明显缩小.HCPT组和HCPT L-OHP组均以细胞凋亡为主,HCPT L-OHP组细胞凋亡率明显高于单药HCPT组和对照组(P ＜0.05),L-OHP组主要表现为细胞坏死.L-OHP HCPT组与对照组相比突变型p53表达明显下降,而Fas-L的表达明显增高(P＜0.05).结论HCPT L-OHP对大肠癌细胞株有较好的疗效,其作用机制有可能是通过L-OHP加强HCPT诱导大肠细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,凋亡的调控可能与p53、Fas-L基因有关.     

羟基喜树碱对胃癌细胞凋亡和细胞周期的影响

目的 探讨羟基喜树碱诱导胃癌细胞凋亡与细胞周期变化的关系.方法 用MTT法测定不同浓度的HCPT对胃癌细胞的生长抑制作用,用流式细胞仪测定一定浓度下不同作用时间细胞凋亡率和细胞周期的变化.结果 在3.125～50.0 μg/ml浓度范围内药物对细胞的抑制率随浓度的增加而增加;在相同浓度下,随时间的延长细胞的凋亡率也逐渐增加,0、12、24、48h的凋亡率为2.8%、8.5%、10.2%,13.3%,在24h内S期细胞减少而G0/G1细胞增多,第二个24h S期和G2/M的阻滞.结论羟基喜树碱可诱导胃癌细胞凋亡,其细胞凋亡与细胞周期分布有关.     

siRNA沉默PPARα减弱羟喜树碱诱导的人结肠癌细胞凋亡

背景:多药耐药一直是遏制提高结肠癌化疗有效性的瓶颈问题。目的:探讨沉默PPARα能否减弱羟喜树碱诱导的人结肠癌细胞凋亡,从而阐明PPARα在羟喜树碱耐药中的潜在作用。方法:构建针对PPARα基因的siRNA干扰载体,并转染人结肠癌SW1116细胞,经G418筛选出稳定转染的细胞,以RT-PCR和蛋白质印迹法验证干扰效果。经羟喜树碱干预后,以MTT法检测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡。以定量RT-PCR检测不同浓度miR-506前体转染SW1116细胞后对PPARα下游调控靶基因mRNA表达的影响。结果:siRNA干扰载体Ⅲ的沉默效果最佳,PPARα mRNA和蛋白表达分别下调了约94.1%±3.4%和70.8%±8.6%。稳定转染siRNA的SW1116细胞的半数抑制浓度(IC_(50))为(332±19)μg/L,亲本SW1116细胞为(152±12)μg/L。在相同浓度羟喜树碱的作用下,亲本SW1116细胞的凋亡率显著高于稳定转染siRNA的SW1116细胞(150μg/L:7.0%±2.5%对2.8%±1.6%;300μg/L:32.4%±7.1%对18.5%±2.7%)。miR-506前体下调HMGCS-2表达,上调FABP-2、CCND1和TGF-β1表达,其中上调CCND1的作用最为明显。结论:成功构建了针对PPARα的siRNA干扰载体;沉默PPARα能增强SW1116细胞对羟喜树碱的抵抗性,可能与下调HMGCS-2表达并上调FABP-2、CCND1和TGF-β1表达有关。     

奥沙利铂与羟基喜树碱单用及联合应用对人大肠癌疗效的研究

目的观察奥沙利铂(L-OHP)、羟基喜树碱(HCPT),顺铂(CDDP),5-氟尿嘧啶(5-Fu),丝裂霉素(MMC)及表阿霉素(EPI)在体外单用及两药联用时对人大肠癌标本的敏感性。方法MTT法检测药敏结果,按中效原理计算不同药物联用的效果。结果大肠癌敏感率由高至低的单药依次为L-OHP>HCPT>CDDP>5-FU>MMC>EPI。联合用药组依次为L-OHP HCPT、L-OHP 5-Fu、HCPT MMC、HCPT CDDP、HCPT 5-Fu与MMC 5-Fu。L-OHP与HCPT对大肠癌敏感性均好。尤其是低分化癌。EPI对大肠癌细胞不敏感。L-OHP HCPT联合用药都对大肠癌最敏感。结论L—OHP与HCPT单用及联合用药对大肠癌细胞最敏感,尤其对低分化的癌的效果优于CDDP、MMC与5-Fu单药及联用。     

羟基喜树碱联合卡培他滨和亚叶酸钙治疗晚期结直肠癌的临床研究

目的：观察羟基喜树碱（HCPT）联合卡培他滨（Xeloda）和亚叶酸钙（CF）治疗晚期结直肠癌的有效性及安全性。方法：全组共44例，入组后给予HLX方案化疗，HCPT6mg／m^2，加入0．9％氯化钠注射液500ml中静脉滴注，第1～5天；希罗达1250mg／m^2，分2次口服，第1—14天；亚叶酸钙片50mg口服，每日2次，第1～14天，每3周重复，2周期后按照RE—CIST标准评价近期客观疗效，按照NCI-CTC评价毒性反应。结果：全组共接受了242个周期化疗，平均每例5．6个周期（2—8个周期）。43例可评价疗效，44例可评价毒副反应。获得CR2例（4．7％），PR9例（20．9％），有效率（RR）为25．6％，疾病控制率（DCR）62．8％。中位疾病进展时间（TTP）6．0个月（95％CI：4．8—7．2个月）。毒副反应主要为骨髓抑制，以Ⅰ～Ⅱ度为主，出现Ⅲ度白细胞下降2例，Ⅲ度血小板下降4例；Ⅲ度口腔溃疡1例，Ⅲ度手足综合征2例。结论：HLX方案治疗晚期结直肠癌有较确切的疗效，并且毒性可以耐受，值得临床进一步应用。     

羟基喜树碱脂质体的制备及质量评价研究

目的:制备羟基喜树碱(HCPT)脂质体,并对其质量进行评价.方法:采用薄膜分散-高压乳匀法制备羟基喜树碱脂质体;用激光粒度分析仪测定其Zeta电位、粒径大小;考察其在0.9%NaCl溶液、水、5%葡萄糖溶液中8 h的稳定性;用凝胶柱层析法考察包封率;采用薄膜透析法考察体外释药性质.结果:羟基喜树碱脂质体Zeta电位为(-33.1±1.3) mV,平均粒径(182.5±5.6) nm,8 h内在水、5%葡萄糖溶液中稳定性良好;包封率(91.2±1.2)%;体外释药曲线符合Higuchi方程Q=1.291 6t1/2 0.309 8,r=0.980 3.结论:本试验制备的羟基喜树碱脂质体稳定性好,大小均匀, 包封率高,并具有延缓药物释放的性质.